簡(jiǎn)要分析輪蟲的培養(yǎng)

輪蟲培養(yǎng)是一種重要餌料浮游動(dòng)物的人工大量培養(yǎng)方法。輪蟲個(gè)體小，世代周期短，培養(yǎng)方法簡(jiǎn)便。特別是海產(chǎn)的褶皺臂尾輪蟲（Brachionus plicatilis）能適應(yīng)較大范圍溫、鹽度的變化，繁殖力強(qiáng)，且營(yíng)養(yǎng)豐富，易于消化，是養(yǎng)殖魚、蝦蟹類幼體期的優(yōu)良餌料。輪蟲人工大量培養(yǎng)成功，對(duì)促進(jìn)海產(chǎn)魚類人工育苗與養(yǎng)殖事業(yè)的發(fā)展，起到了重要作用。

概況 輪蟲培養(yǎng)的研究始于淡水種類。早期的研究者都特別注意輪蟲生殖方式的研究，后來轉(zhuǎn)向培養(yǎng)、繁殖和營(yíng)養(yǎng)生態(tài)工作。19世紀(jì)末葉，莫帕斯（E.Mau-pas）最早從事輪蟲的培養(yǎng)。20世紀(jì)50年代日本伊藤隆在對(duì)褶皺臂尾輪蟲生理、生態(tài)研究的基礎(chǔ)上，提出了海水培養(yǎng)、保存以及作為餌料用于飼育海產(chǎn)仔稚魚的問題。60年代后培養(yǎng)技術(shù)有了很大進(jìn)展，在生產(chǎn)上已廣泛用作海產(chǎn)仔魚初期餌料。對(duì)于輪蟲的餌料價(jià)值日本也進(jìn)行過很多工作。此外，斯皮特勒（P.Spittler，1969）曾對(duì)波羅的海的狹甲輪蟲〔Colurella colurus（Ehrenberg）〕和十字龜甲輪蟲變種（Keratella cruci-formis var.Eichwaldi）進(jìn)行了培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。中國(guó)50年代后期已開始輪蟲的培養(yǎng)和利用的試驗(yàn)。60年代進(jìn)行了褶皺臂尾輪蟲的大量培養(yǎng)方法和繁殖生態(tài)條件的研究并開始培養(yǎng)利用。80年代為適應(yīng)水產(chǎn)養(yǎng)殖事業(yè)發(fā)展的需要，輪蟲的大量培養(yǎng)與利用有了新的進(jìn)展。美國(guó)和歐洲其他國(guó)家也把輪蟲視為養(yǎng)殖海產(chǎn)動(dòng)物稚仔期的重要餌料生物。

種類與分布 輪蟲綱（Rotatoria）隸屬于扁形動(dòng)物門（Platyhelminthes）或線形動(dòng)物門（Aschelmin-thes），還是獨(dú)立為門，至今尚無定論。褶皺臂尾輪蟲是輪蟲綱、單卵巢目（Monogononta）、游泳亞目（Ploima）、臂尾輪蟲科（Brachionidae）、臂尾輪蟲屬（Brachionus Pallas）的代表。分布很廣，已知約1500種以上，大多數(shù)為世界種，在淡水浮游動(dòng)物中占重要地位，而在海洋中約50種，數(shù)量也不多。營(yíng)海洋浮游生活的主要為游泳亞目的種類，分布于沿岸淺海，尤其河口低鹽水域。褶皺臂尾輪蟲廣泛分布于中國(guó)從溫帶到熱帶的半咸水和沿岸水域。日本把背甲長(zhǎng)于210微米（平均238.9微米）的和小于210微米（平均160.3微米）的褶皺臂尾輪蟲分為L(zhǎng)型和S型兩個(gè)遺傳性狀不同的品系。經(jīng)對(duì)兩個(gè)品系進(jìn)行分類學(xué)的研究，定為兩個(gè)亞種：L型為（B.plicatilis tipicus），S型為（B.plicatilis rotundiformis）。

形態(tài)特征 輪蟲個(gè)體微小，體型多樣，有圓筒形、長(zhǎng)形、袋形和球形等，外被透明的角質(zhì)膜，體前端頭部為叢生纖毛的輪盤（見圖）。褶皺臂尾輪蟲的輪盤發(fā)達(dá)，角質(zhì)膜增厚成為光滑、透明的被甲。足部粗長(zhǎng)，環(huán)狀無節(jié)，前端有趾是本屬主要特征。體腔內(nèi)部比較復(fù)雜?？谖挥谳啽P纖毛環(huán)的腹面，漏斗狀，依靠纖毛擺動(dòng)，濾食水流中的食物?？诤蠓骄捉滥覂?nèi)的咀嚼器發(fā)達(dá)，嚼碎的食物經(jīng)膨大的胃和腸被消化、吸收后，從肛門排出糞便。生殖系統(tǒng)由單個(gè)的卵巢、卵黃腺和輸卵管構(gòu)成。成熟的卵經(jīng)輸卵管、泄殖腔排出，粘于足基部，在體外進(jìn)行胚胎發(fā)育。雄性輪蟲壽命短，極難見到，軀體不及雌體的一半，假體腔內(nèi)主要是一個(gè)發(fā)達(dá)的精囊，無攝食運(yùn)動(dòng)。

生物學(xué)特性

生態(tài)習(xí)性 輪蟲對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)。褶皺臂尾輪蟲喜在有機(jī)質(zhì)較多的水域中生活。能耐受2‰～50‰范圍的鹽度變化，鹽度在10‰～30‰時(shí)生長(zhǎng)較好，15‰～25‰時(shí)生長(zhǎng)、繁殖最好。在5～40℃溫度范圍內(nèi)能生長(zhǎng)繁殖，較適宜的繁殖溫度為25～40℃，而以30～35℃為更適宜。最適水溫因不同類型而異。L型輪蟲在25℃時(shí)繁殖率最高，S型輪蟲在34℃時(shí)最高。S型在低于15℃水溫條件下不繁殖，而L型在5℃條件下仍能繁殖。該屬輪蟲分布限于pH值為6.6以上的水域。但褶皺臂尾輪蟲對(duì)pH值的變化，適應(yīng)性廣，培養(yǎng)的適宜pH值為5～9，在pH7.5～8.1范圍內(nèi)密度高。休眠卵孵化的適宜鹽度為1.5‰～35‰，最適為15‰～20‰。但對(duì)突然大幅度的鹽度變化，耐受性較差，須逐漸過渡才能適應(yīng)。休眠卵在5～35℃溫度范圍內(nèi)可孵化，最適溫度為20～25℃。輪蟲食性廣，攝食小球藻、杜氏藻、扁藻等單細(xì)胞藻類以及細(xì)菌、酵母、小型原生動(dòng)物和有機(jī)碎屑等。中國(guó)培養(yǎng)輪蟲多用扁藻，日本主要用酵母和小球藻，藻類中以綠藻的營(yíng)養(yǎng)效果較好。輪蟲可能攝食的餌料大小為22～30微米。

褶皺臂尾輪蟲

生活史和生殖習(xí)性 褶皺臂尾輪蟲存在單性生殖世代個(gè)體和兩性生殖世代個(gè)體。其世代交替現(xiàn)象是雌蟲不經(jīng)交尾產(chǎn)生非需精卵、經(jīng)過單性發(fā)生產(chǎn)生雌蟲的單性生殖和經(jīng)過交尾之后產(chǎn)生需精卵的兩性生殖兩個(gè)世代的交替。單性生殖雌蟲稱為不混交雌蟲（amictic female）。產(chǎn)生需精卵的雌蟲稱為混交雌蟲（mictic female），需精卵不經(jīng)受精排出體外，進(jìn)行單性發(fā)生，產(chǎn)生雄蟲；如在事先交尾受精，則形成受精卵，即休眠卵。誘發(fā)兩性生殖產(chǎn)出休眠卵的原因，因品種不同而有其特異性。環(huán)境等外部原因，遺傳等內(nèi)部原因均對(duì)兩性生殖有重大影響。

L型雌體輪蟲有的個(gè)體生長(zhǎng)到被甲長(zhǎng)達(dá)140微米即可抱卵，一個(gè)個(gè)體產(chǎn)卵數(shù)約10個(gè)左右，最多達(dá)24個(gè)。卵在25℃水溫下1天內(nèi)孵化。剛孵出的小輪蟲攝食小型藻類，迅速生長(zhǎng)。變態(tài)為成體的輪蟲在20～25℃條件下，12小時(shí)之內(nèi)產(chǎn)卵。孵化以后的壽命，在25℃條件下，估計(jì)為3.4～4.4天。褶皺臂尾輪蟲的單性生殖增殖迅速，如在平均溫度22～24.5℃，鹽度22‰～25‰，餌料充足的條件下，經(jīng)10天培養(yǎng)后，群體密度由原來的3個(gè)/毫升增加到610～980個(gè)/毫升，增長(zhǎng)200～300倍。溫度25℃，餌料供應(yīng)充足，經(jīng)10天培養(yǎng)，由1個(gè)/毫升增殖到1500～2000個(gè)/毫升，增長(zhǎng)1000～2000倍。

培養(yǎng)方法 培養(yǎng)技術(shù)可分為小型培養(yǎng)和大面積培養(yǎng)兩種。

小型培養(yǎng) 

種蟲從野外自然水體中用浮游生物網(wǎng)采集分離出來，或取保存的休眠卵在適宜的溫、鹽度條件下孵化得之。常用的培養(yǎng)容器為各種玻璃缸、水族箱、廣口陶缸或小水泥池。所用海水需經(jīng)過濾以消除敵害，用清潔淡水調(diào)節(jié)鹽度，添加少量人尿以增加有機(jī)質(zhì)，然后按1～3個(gè)/毫升比例接種輪蟲。常用餌料為扁藻等單細(xì)胞藻類、各種酵母、微生物團(tuán)絮等，單獨(dú)使用或配合使用。每日投餌兩次，達(dá)到飽食為度。投餌密度扁藻以2萬～5萬個(gè)細(xì)胞/毫升、硅藻以30萬～50萬個(gè)細(xì)胞/毫升為宜。隨著輪蟲密度的增高和環(huán)境因子（如溫度等）的變化，及時(shí)調(diào)整投餌量。每次投餌后輕輕攪動(dòng)，使餌料分布均勻，增加水中氧氣。在培養(yǎng)過程中，要隨時(shí)檢查輪蟲的生長(zhǎng)情況和繁殖密度，生長(zhǎng)良好的輪蟲，個(gè)體肥大，腸胃飽滿，游動(dòng)活潑，多數(shù)成體帶夏卵。如有多數(shù)輪蟲不帶卵，或帶休眠卵、沉底、不活躍以及出現(xiàn)雄體、死殼等，說明生長(zhǎng)不良，應(yīng)及時(shí)采取補(bǔ)救措施。條件適宜，經(jīng)過一段時(shí)間（10天左右）輪蟲密度達(dá)到200個(gè)/毫升以上，即可全部采收利用，取部分種蟲接種到培養(yǎng)了扁藻或小球藻的另一容器中，再次培養(yǎng)?；蜻m量采收，供作餌料使用，在原容器中補(bǔ)充水量，繼續(xù)培養(yǎng)。前者為接種法，一次培養(yǎng)；后者為間收法，連續(xù)培養(yǎng)。

大面積培養(yǎng) 

可用室外水泥池或土池培養(yǎng)，建池地點(diǎn)須便于海水排灌和引入淡水。使用前進(jìn)行藥物清池，按每立方米水體中魚藤精2克和六六六粉10～15克比例，混合使用。此法成本低，可殺滅敵害生物，不傷害浮游生物。清池后，灌入過濾海水達(dá)到要求深度。如系砂濾海水，應(yīng)先接種藻種，然后施肥。主要施氮肥和磷肥。每立方米水體硝酸銨50克，磷酸二氫鉀5克，檸檬酸鐵銨0.5克。也可施用其他肥料。以后每隔5～7天追肥1次。追肥時(shí)間和施肥量依水池中藻類含量而定。待池中餌料藻類繁殖到一定數(shù)量后，接種輪蟲入池。接種密度一般為50～1000個(gè)/升。在培養(yǎng)過輪蟲的水池中，有休眠卵存留，可不接種或少接種。

培養(yǎng)期間應(yīng)注意：①適時(shí)、適量追肥，繼續(xù)繁殖藻類，使池中餌料藻類經(jīng)常處于適宜數(shù)量范圍。大量培養(yǎng)，亦可投喂面包酵母、或添加了油脂的油脂酵母。②為控制池水保持適宜鹽度和正常水位，應(yīng)隨時(shí)灌入淡水或新鮮海水調(diào)節(jié)。③注意水質(zhì)變化，發(fā)現(xiàn)有異常跡象，立即輸入新鮮海水。④經(jīng)常檢查輪蟲生長(zhǎng)和繁殖情況，及時(shí)處理。輪蟲繁殖到一定密度，即可采收或間收，供作餌料使用。用XX14或XX18號(hào)篩絹制作的浮游生物網(wǎng)采捕，或用光誘法誘集輪蟲，用水桶舀取。合理采收，一次不宜太多，方能連續(xù)大量培養(yǎng)，保證育苗餌料的持續(xù)供應(yīng)。

為下一次培養(yǎng)準(zhǔn)備種蟲，當(dāng)輪蟲發(fā)育良好，達(dá)到較大密度時(shí)，突然中斷投餌，饑餓幾天，促使產(chǎn)生休眠卵，然后從池底吸采休眠卵，裝瓶蠟封；或仍任其留存池中作為種蟲備用。