對蝦黃頭病的鑒定與檢測技術(shù)

病原

黃頭病由黃頭病毒（Yellow head virus,YHV）導(dǎo)致,黃頭病毒屬于套式病毒目桿套病毒科頭甲病毒屬，目前已知有6個基因型，其中YHV為基因1型，腮聯(lián)病毒（GAV）為基因2型，另外4個基因型（3型~6型），極少或從不引起疾病。

癥狀

黃頭病毒一般影響50天~70天對蝦，感染后3~5天發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率達(dá)80%~90%。感染的病蝦有一個食量大增然后突然停止的過程，一般在2天~4天出現(xiàn)停食、頭胸部發(fā)黃和全身發(fā)白，肝胰腺變軟并由褐色變成黃色。許多瀕死下聚集在池塘角落水面，引起對蝦的迅速死亡。

流行

黃頭病于1990年首次在泰國斑節(jié)對蝦中發(fā)現(xiàn)，隨后在中國、中國臺灣、印度、印度尼西亞、菲律賓和越南等地，我國將其列為二類疫病，OIE將其列為必須申報的疫病。YHV主要是通過水平傳播，鳥類也是傳播媒介之一。

診斷及檢測

臨床診斷法：根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病例特征作出初步的診斷；

實驗室診斷：

① 組織及病理診斷

取瀕死蝦腮絲或表皮用蘇木精-伊紅染色，觀察細(xì)胞內(nèi)球形強(qiáng)嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體，適用于對蝦活體中的黃頭病毒檢測，但不適合于非感染性病毒攜帶樣品的診斷。

② 分子檢測技術(shù)

恒溫PCR法：通過靶基因六個獨立區(qū)域設(shè)計的4對引物，利用Bst DNA聚合酶，在63°C恒溫條件下，在短時間內(nèi)快速擴(kuò)增核酸片段。該技術(shù)簡單、經(jīng)濟(jì)、快速，適用于對蝦各個生活期及其他生物或底泥等樣品的黃頭病毒情況進(jìn)行定性檢測，也適合病原篩查和疾病確診。

以恒溫PCR為技術(shù)平臺的恒溫?zé)晒鈾z測系統(tǒng)

原位雜交法：用地高辛標(biāo)記cDNA探針進(jìn)行，適用于黃頭病毒敏感宿主的感染程度及病毒擴(kuò)增狀況的評估和疾病確診。

③ 免疫檢測技術(shù)

通過制備特異性抗黃頭病病毒抗體，用于檢測病毒的方法。免疫印跡試驗（WB）、ELISA或免疫熒光等方法鑒定樣品是否有黃頭病毒感染，從而確診；

(來源：Dhelix雙螺旋基因)