一例南美白對蝦放苗后大量死亡原因的調(diào)查及分析

姜路辛，施禮科，陳 喆，陸曉明，孫海濤，陳 凡，郭水榮

(1.杭州市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江 杭州 310017；2.嘉興華才檢測技術(shù)有限公司，浙江 嘉興 314500)

南美白對蝦是我國重要的蝦類養(yǎng)殖品種，在養(yǎng)殖過程中，放苗前后的相關(guān)環(huán)節(jié)至關(guān)重要。2021年3月中旬，浙江某養(yǎng)殖場在放養(yǎng)南美白對蝦苗種后出現(xiàn)大量死亡，為明確死亡原因，筆者進(jìn)行了實地取樣調(diào)查。現(xiàn)將有關(guān)情況總結(jié)如下。

一、基本情況

養(yǎng)殖場位于杭州灣圍墾區(qū)域，上一年度養(yǎng)殖池發(fā)生了白對蝦“長不大”的情況，經(jīng)原因調(diào)查，為腸胞蟲病害。為殺滅底泥中的腸胞蟲，養(yǎng)殖戶在清塘?xí)r使用了敵百蟲，7天后進(jìn)水放苗，隨后出現(xiàn)了蝦苗大量死亡情況。以同一河道為水源的白對蝦周邊養(yǎng)殖場未出現(xiàn)類似情況，故排除外源水污染的可能性，將主要原因判定為場內(nèi)因素。由于未能采集到存活的白對蝦苗，未對常規(guī)病原進(jìn)行檢測，考慮到甲殼動物對敵百蟲敏感，重點對水中殘存的敵百蟲和其在堿性條件下易轉(zhuǎn)化成的敵敵畏進(jìn)行了檢測分析。

二、實驗室分析結(jié)果

1.池塘水中敵百蟲含量檢測

取養(yǎng)殖池塘水20.12 克于50 毫升離心管中，加入40毫升乙腈，勻漿提取1分鐘，再加入5克氯化鈉，3 800 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取上清液20 毫升40℃旋蒸至1 毫升，過氨基固相萃取柱，收集液40℃旋蒸至近干，加入1 毫升乙腈＋水(3＋2)混勻，過0.22 微米濾膜，在液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜儀中檢測，未檢出敵百蟲，檢測結(jié)果見表1。

2.池塘水中敵敵畏含量檢測

取養(yǎng)殖池塘水25.30 克于50 毫升離心管中，加入40 毫升乙腈、4 克硫酸鎂、1 克氯化鈉、1 克檸檬酸鈉、0.5 克檸檬酸氫二鈉及1 顆陶瓷均質(zhì)子，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1分鐘后4 200轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，吸取6 毫升上清液加到內(nèi)含900 毫克PSA 的15 毫升離心管中；4 200 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，準(zhǔn)確吸取1 毫升上清液于10 毫升試管中，40℃水浴中氮氣吹至近干；加入20 微升內(nèi)標(biāo)溶液，加入1毫升乙酸乙酯復(fù)溶，過微孔濾膜，進(jìn)行氣相色譜—質(zhì)譜測定，結(jié)果顯示池水中敵敵畏的含量達(dá)到60微克/千克，測定結(jié)果見表1。

表1 池水中敵百蟲、敵敵畏含量檢測結(jié)果

三、分析和討論

敵敵畏對南美白對蝦幼蝦的毒性較敵百蟲更強(qiáng)，根據(jù)文獻(xiàn)報道，其半致死濃度為0.22×10-7毫克/千克，本案例中池水?dāng)硵澄窛舛冗_(dá)到60 微克/千克，故初步判定本次白對蝦苗種死亡是由敵敵畏中毒造成。

根據(jù)文獻(xiàn)報道，敵百蟲對池內(nèi)的蟹類、橈足類和白對蝦等具有較強(qiáng)的殺滅力，因此敵百蟲常用作清池藥物以預(yù)防蝦類病害。但敵百蟲在弱堿性條件下可形成毒性更大的敵敵畏，該過程隨堿性的增強(qiáng)和溫度的升高而加速，當(dāng)pH 為8～10 時，敵百蟲轉(zhuǎn)變成敵敵畏僅需半小時?？紤]到杭州灣圍墾區(qū)域土壤普遍呈堿性，清塘?xí)r使用敵百蟲，相當(dāng)于作用于堿性土壤的浸出液，加速了敵百蟲的轉(zhuǎn)化。敵敵畏在30℃的環(huán)境中，18 天水解50%，所以本案例中養(yǎng)殖戶在使用敵百蟲7 天后進(jìn)水放苗，顯然是在敵敵畏沒有完全降解的情況下進(jìn)行的。雖然筆者對該池底部土壤的腸胞蟲檢測結(jié)果顯示呈陰性，但仍不建議在堿性土壤的白對蝦池清塘?xí)r使用敵百蟲。

腸胞蟲對世界各地的對蝦養(yǎng)殖均造成了不同程度的損害，是目前危害南美白對蝦的主要病害。2021年2月，筆者對杭州南美白對蝦主養(yǎng)區(qū)的池塘底泥進(jìn)行了抽樣檢測，在41批次樣品中，3批次的池塘底泥呈現(xiàn)腸胞蟲陽性；進(jìn)一步跟蹤了解，發(fā)現(xiàn)陽性池塘前期均使用了漂白粉消毒，而使用生石灰消毒的池塘未檢測到陽性。根據(jù)該檢測結(jié)果，在殺滅底泥中的腸胞蟲時，筆者初步認(rèn)為生石灰的作用優(yōu)于漂白粉，建議采用生石灰作為防控腸胞蟲的清塘手段。