養(yǎng)殖對蝦偷死病及綜合防控措施

養(yǎng)殖對蝦偷死病及綜合防控措施

文/許杰 鄧威 李娜 張麗 馬文婷 薛淑霞

目前，關(guān)于對蝦偷死病的相關(guān)防治技術(shù)仍以預(yù)防為主，本文闡述了對蝦偷死病的危害、特征、病理研究和防治措施等方面的研究現(xiàn)狀，以期為建立有效防控技術(shù)方案提供參考。

近年養(yǎng)殖對蝦偷死病已成為我國對蝦養(yǎng)殖地區(qū)危害日益嚴(yán)重的疫病，該病貫穿養(yǎng)殖全過程，危害最嚴(yán)重的是養(yǎng)殖對蝦早期死亡綜合征（Early Mortality Syndrome，EMS）和養(yǎng)殖中后期的對蝦偷死綜合征（Covert Mortality Syndrom，CMS），主要發(fā)生在高密度養(yǎng)殖的蝦塘，由于患病對蝦在池底深水區(qū)陸續(xù)死亡，不易及時察覺，故被養(yǎng)殖者稱之為“偷死病”。蝦病呈現(xiàn)出爆發(fā)性流行的趨勢，部分養(yǎng)殖場累計死亡率達(dá)80%～100%，經(jīng)濟(jì)損失巨大。

一、由細(xì)菌感染致病

對蝦早期死亡綜合征于2010年在越南、中國南方、馬來西亞和泰國對蝦養(yǎng)殖地區(qū)出現(xiàn)，感染對蝦幼苗，蝦苗放養(yǎng)7d～30d內(nèi)死亡率高達(dá)100%?；疾ξr空腸空胃，生長緩慢，甲殼變軟，在水面旋轉(zhuǎn)游泳，沉入池底死亡。病蝦肝胰腺大面積壞死，顯著萎縮，肝胰腺盲管上皮細(xì)胞壞死、脫落，細(xì)胞核腫大，分泌細(xì)胞（B cells）、高嗜堿性細(xì)胞（F cells）和脂肪儲存細(xì)胞（R cells）的細(xì)胞功能紊亂，胚細(xì)胞（E cells）有絲分裂能力顯著降低。發(fā)病后期肝胰腺盲管間或盲管內(nèi)發(fā)生血細(xì)胞浸潤，肝胰腺出現(xiàn)繼發(fā)性細(xì)菌感染。

2013年5月1日，全球水產(chǎn)養(yǎng)殖聯(lián)盟（GAA）宣布由未知因子引起的東南亞和中國爆發(fā)的對蝦早期死亡綜合征（技術(shù)上稱為急性肝胰腺壞死綜合征Acute HepatopancreaticNecrosis Disease, AHPND）的疾病，病原可能是一種特異的革蘭氏陰性菌，嗜鹽的副溶血性弧菌。目前關(guān)于AHPND的病因還沒有定論，但國內(nèi)外研究顯示，分泌二元毒素（PriAvp和PriBvp）的副溶血弧菌與AHPND的發(fā)生存在密切關(guān)系，菌株內(nèi)均存在分子量約為69kbp的毒力質(zhì)粒，是高致病力的副溶血弧菌引發(fā)AHPND的關(guān)鍵，導(dǎo)致蝦肝胰腺組織感染惡化，大量對蝦急性死亡。目前世界動物衛(wèi)生組織（OIE）已將AHPND列入水生動物疫病法定報告名錄。

有國外學(xué)者從蝦糞便樣本檢測到AHPND致病菌副溶血性弧菌，實驗得出當(dāng)水環(huán)境中存在污染AHPND的糞便，AHPND可能通過糞便經(jīng)口的途徑傳播，增加健康蝦感染AHPND的幾率，控制弧菌可以減少AHPND爆發(fā)的風(fēng)險。我國水產(chǎn)專家提出患急性肝胰腺壞死癥對蝦兩三天內(nèi)大量死亡，表現(xiàn)為急性中毒癥狀，認(rèn)為細(xì)菌感染和藍(lán)藻、甲藻等藻毒素中毒導(dǎo)致肝胰腺廣泛性壞死，可能是對蝦早期死亡綜合征的病因，加強(qiáng)水質(zhì)調(diào)控和防治對蝦細(xì)菌病是有效控制對蝦早期死亡綜合征的關(guān)鍵。

二、由病毒感染致病

2015年中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所首次證實偷死野田村病毒（Covert mortality noda virus，CMNV）是導(dǎo)致對蝦病毒性偷死病的疑似病原，厄瓜多爾、越南、馬來西亞、泰國和中國等主要養(yǎng)殖對蝦國家傳播流行，感染凡納濱對蝦、中國對蝦、日本囊對蝦、斑節(jié)對蝦和羅氏沼蝦等。病蝦出現(xiàn)肝胰腺顏色變淺、萎縮，空腸空胃，生長緩慢，腹節(jié)肌肉不透明或局部發(fā)白等癥狀，該病多發(fā)生于高溫季節(jié)，水溫28℃以上，養(yǎng)殖30d～60d之后，累計死亡率60%～80%。2005年海南、廣西等地養(yǎng)殖對蝦發(fā)生CMNV，2009年該病向北擴(kuò)散，廣東、福建、江蘇、山東等地。CMNV可侵染多種甲殼類的肝胰腺和肌肉組織，在肝胰腺小管和淋巴器官上皮細(xì)胞和肌肉細(xì)胞內(nèi)形成嗜酸性的包涵體，導(dǎo)致肝胰腺小管萎縮及肌肉纖維的凝固狀壞死。該研究團(tuán)隊從受CMNV影響的蝦池采集了15種無脊椎動物，利用逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)的等溫擴(kuò)增（RT-LAMP）、逆轉(zhuǎn)錄嵌套PCR（RT-nPCR）、基因測序，原位RNA雜交（ISH）和組織病理學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)海水鹵蟲、藤壺、輪蟲、珊瑚蟲、太平洋牡蠣、寄居蟹、蛤蜊、沙蟹、浮游動物、招潮蟹等樣品攜帶CMNV病毒，棲息在蝦塘的無脊椎動物可能是構(gòu)成CMNV爆發(fā)的生物風(fēng)險因素。近年篩查研究了CMNV的傳播途徑，脊尾白對蝦（Exopalaemon carinicauda）是蝦類養(yǎng)殖池塘中常見的甲殼動物，脊尾白對蝦親體感染CMNV，經(jīng)PCR檢測和電子顯微鏡觀察，在親蝦卵原細(xì)胞、卵細(xì)胞、精細(xì)胞、受精卵和孵化中的幼體細(xì)胞內(nèi)均檢出大量CMNV顆粒，CMNV可能通過精細(xì)胞和卵細(xì)胞在脊尾白對蝦中進(jìn)行垂直傳播，脊尾白對蝦在CMNV傳播中可能起到了中間宿主和寄存宿主的作用。

2013年～2015年海南、廣東、廣西、福建、浙江、江蘇、山東、河北、天津、遼寧等省市養(yǎng)殖對蝦經(jīng)檢測CMNV流行率依次為45.9%、27.9%和20.9%，具有流行范圍廣，宿主種類多，流行率高的特點。CMNV是一種單鏈RNA病毒，會導(dǎo)致病毒出現(xiàn)較快變異。2016年～2017年我國沿海省市養(yǎng)殖蝦類CMNV的分子流行病學(xué)調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)，一些發(fā)病對蝦中不存在CMNV原始株（河北株）的感染，存在一種類似CMNV變異株系的新型野田村病毒的感染，患病對蝦表現(xiàn)出游泳性能下降，沉底的特點，稱為行動障礙野田村病毒（Movement disorder nodar virus，MDNV），2016年CMNV和MDNV兩種新發(fā)野田村病毒陽性檢出率合計36.22%，顯示近年野田村病毒流行率沒有明顯降低，但是流行株系發(fā)生了較大變化。CMNV作為一種新發(fā)病毒，其主要特征性基因出現(xiàn)了明顯變異，該病毒在蝦類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中的危害應(yīng)引起足夠重視，加強(qiáng)病原監(jiān)測和預(yù)防控制。

三、由養(yǎng)殖生態(tài)惡化致病

對蝦養(yǎng)殖中后期（30d～50d之后）極易爆發(fā)對蝦偷死綜合征，期間氣溫較高，池塘底部殘餌、糞便以及死亡藻類等含氮有機(jī)物大量積累，經(jīng)過異養(yǎng)菌的作用，產(chǎn)生大量的含氨有害物質(zhì)，導(dǎo)致對蝦慢性中毒、代謝紊亂和攜氧能力下降，缺氧，病蝦活動減弱，攝食減弱或不攝食，在池底死亡。當(dāng)池塘水質(zhì)不穩(wěn)定，死亡的藍(lán)綠藻類釋放的藻毒素積累到一定濃度時，破壞對蝦神經(jīng)和肝胰臟，肝胰腺邊緣不清晰呈彌散狀，肝小管B、F、R細(xì)胞壞死或脫落，肝小管結(jié)締組織松散或壞死、崩解，肝胰腺壞死，養(yǎng)殖到90d左右死亡率可達(dá)60%～80%。肝胰腺萎縮壞死是患偷死綜合癥的主要臨床癥狀，因此技術(shù)上稱“偷死綜合征”為對蝦肝胰腺壞死征（Hepatopancreas necrosis syndrome，HPNS）。

據(jù)報道對蝦肝胰腺壞死癥與多種細(xì)菌如副溶血弧菌、蘇云金芽孢桿菌等有關(guān)，其原因可能歸于HPNS爆發(fā)與水體理化因子（氨氮、亞硝酸鹽）、有毒藻類等中毒密切相關(guān)，水環(huán)境脅迫及導(dǎo)致條件致病菌繁生的生態(tài)系統(tǒng)是對蝦發(fā)生HPNS的根本原因。甲殼動物在環(huán)境脅迫條件下，會將自身儲存的營養(yǎng)物質(zhì)主要用于維持機(jī)體的基本生理代謝，當(dāng)脅迫因子超過肝胰腺的解毒能力時，肝胰腺的正常結(jié)構(gòu)和生理功能將被破壞，肝細(xì)胞內(nèi)空泡和轉(zhuǎn)運泡數(shù)量增多，體積增大有助于肝胰腺對營養(yǎng)物質(zhì)的代謝吸收，若進(jìn)一步肝細(xì)胞空泡化，會造成肝胰腺代謝異常，降低營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，導(dǎo)致全身功能障礙，免疫機(jī)能下降，增加繼發(fā)細(xì)菌感染的機(jī)率。因此改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境，有利于對蝦健康養(yǎng)殖和預(yù)防控制病害的發(fā)生。

四、防控措施

目前對蝦偷死病仍以預(yù)防為主，采取保證蝦苗質(zhì)量，調(diào)控水環(huán)境，定期檢測病原，藥物和生物防治等綜合防控措施預(yù)防疾病。

保證蝦苗質(zhì)量，從源頭嚴(yán)格質(zhì)量把關(guān)，加強(qiáng)親蝦檢疫，養(yǎng)殖生產(chǎn)健康蝦苗，選用無病害優(yōu)質(zhì)蝦苗。重視養(yǎng)殖全程病原監(jiān)測，定期監(jiān)測養(yǎng)殖對蝦弧菌及病毒。

嚴(yán)格控制放養(yǎng)苗種數(shù)量，封閉式養(yǎng)殖模式：傳統(tǒng)凡納濱對蝦（土苗或二代苗）放苗密度3萬尾/畝～4萬尾/畝，生長快的品種2萬尾/畝～3萬尾/畝。高位池養(yǎng)殖模式：小于2畝的池塘，普通蝦苗小于10萬尾/畝，生長快品種小于7.5萬尾/畝；5畝左右池塘，普通蝦苗7.5萬尾/畝，生長快的品種小于5萬尾/畝；大于5畝的池塘，相應(yīng)苗種密度要進(jìn)一步減少。

加強(qiáng)水環(huán)境調(diào)控，放養(yǎng)前池塘進(jìn)行清淤，消毒處理，保證水源清潔，池塘排換的養(yǎng)殖尾水經(jīng)無害化處理后再外排。定時人工增氧，保證溶解氧含量5mg/L以上。定期適量換水和使用有益菌制劑，控制水體氨氮、亞硝酸鹽的濃度。監(jiān)控藍(lán)藻和有毒藻類，調(diào)節(jié)水體藻相，合理使用有益微生物，控制水環(huán)境中的病原微生物數(shù)量。

嚴(yán)格養(yǎng)殖管理，根據(jù)養(yǎng)殖對蝦不同階段的攝食特點，合理投喂餌料，科學(xué)飼喂益生菌、中草藥等營養(yǎng)免疫調(diào)節(jié)劑，提高對蝦免疫力?？茖W(xué)套養(yǎng)不同生態(tài)位的魚類，優(yōu)化水體環(huán)境，切斷對蝦病害的水平傳播，實現(xiàn)養(yǎng)殖病害的生物防控。