鱉病的檢查與診斷

鱉病防治要想取得理想的效果，最重要的是對(duì)病害做出準(zhǔn)確、快速的診斷，對(duì)癥下藥。只有對(duì)鱉病進(jìn)行全面的檢查與分析，并對(duì)鱉的生活環(huán)境進(jìn)行詳細(xì)的調(diào)查，才能做到準(zhǔn)確、快速診斷。

一、現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

1.觀察中華鱉有無(wú)出現(xiàn)異常表現(xiàn)和癥狀

中華鱉得病后，會(huì)出現(xiàn)各種異常表現(xiàn)和各種癥狀。

根據(jù)對(duì)中華鱉的活動(dòng)情況、攝食情況、體色變化、病理癥狀及死亡情況等進(jìn)行觀察、分析和判斷，可初步確定引起病害的原因。

如受到病原體侵襲或感染時(shí)，病鱉體表或病灶部位常有充血、出血、發(fā)炎或皮膚潰爛等癥狀，并且攝食量減少或停食，體質(zhì)瘦弱，行動(dòng)遲緩，受到驚嚇不躲藏，或長(zhǎng)時(shí)間趴在曬背臺(tái)上或食臺(tái)旁不動(dòng)等；

因受傷導(dǎo)致水霉感染，會(huì)引發(fā)水霉病，在水中觀察病鱉，可見(jiàn)體表長(zhǎng)有“白毛”。

2.環(huán)境狀況

養(yǎng)殖水體的環(huán)境條件，如水溫、溶解氧、pH值、氨氮、亞硝酸鹽、有機(jī)物含量、重金屬鹽、水生生物的種類(lèi)和數(shù)量等，與鱉病的發(fā)生與流行有密切的關(guān)系，都是需要調(diào)查的內(nèi)容。

3.飼養(yǎng)管理狀況

鱉病的發(fā)生與飼養(yǎng)管理水平也有密切的關(guān)系，放養(yǎng)規(guī)格與密度、飼料類(lèi)型與投喂方式、加水換水是否科學(xué)合理，與病害的發(fā)生密切相關(guān)。放養(yǎng)密度過(guò)大，鱉攝食不足，體質(zhì)差，對(duì)疾病的抵抗力弱；

投喂變質(zhì)的飼料，易引起動(dòng)物中毒；投喂?fàn)I養(yǎng)不平衡的飼料，會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不良??；投喂脂類(lèi)超標(biāo)的飼料，易引發(fā)營(yíng)養(yǎng)性肝?。煌娥D量過(guò)多容易引起水質(zhì)惡化，影響鱉的生長(zhǎng)，給病原微生物的孳生創(chuàng)造了條件。

二、鱉病的檢查

1.目檢法

中華鱉受病原體感染和侵襲后常會(huì)顯現(xiàn)出一定的癥狀，并且病原體不同，顯現(xiàn)的癥狀也不同，因此，用肉眼觀察癥狀是鱉病診斷最常用的方法。

病毒病、細(xì)菌病、原蟲(chóng)病等，雖然肉眼無(wú)法看到病原體，但受其感染和侵襲后，鱉會(huì)顯現(xiàn)出特有的癥狀；一些大型寄生蟲(chóng)，如寄生于鱉體表的水蛭，肉眼就能看清病原體；

有些疾病需借助水體條件才能夠觀察到，例如白斑病、水霉病等，需要浸泡在水體中，才能看得清楚。

目檢時(shí)可用比較法來(lái)查看鱉病，如將病鱉與健康鱉放在一起進(jìn)行比較，病鱉往往行動(dòng)緩慢、疲軟，而健康鱉兇猛活潑。

另外，還可以比較頸部粗細(xì)、四肢粗細(xì)、有無(wú)水腫、體色是否正常、有無(wú)充血或出血斑、腹腔內(nèi)有無(wú)積水等。

除查看外表各個(gè)部位外，對(duì)病死鱉還要進(jìn)行解剖檢查，查看腸胃、肝臟、心臟、胰臟、腎臟等器官，是否紅腫、充血、變色（變黑或變白等）、壞死、潰爛，腸道內(nèi)是否有寄生蟲(chóng)等。

2.鏡檢法

在目檢不能確診的情況下，需用顯微鏡或解剖鏡對(duì)疾病作進(jìn)一步的確認(rèn)，為確定病因提供依據(jù)。鏡檢的部位與順序與目檢基本相同。

鏡檢時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：

①用癥狀典型的活體或剛死亡不久的病鱉來(lái)檢查；

②鏡檢時(shí)，病體及內(nèi)臟器官要保持濕潤(rùn)；

③解剖時(shí)要保持內(nèi)臟器官完好無(wú)損；

④解剖、檢查工具要清潔衛(wèi)生，避免引起交叉污染。

鏡檢的采樣方法為：

①取體表充血、潰爛、發(fā)炎、變白等處的組織或黏液；

②取癤腫處的內(nèi)容物；

③取血液、腹水等；

④取外觀變化明顯的內(nèi)臟器官。

由于每次鏡檢只能檢查很小的組織，為了避免遺漏，每一病變部位至少要檢查三次，每次取不同點(diǎn)的組織。

三、微生物檢查

微生物檢查是診斷由細(xì)菌、病毒感染引起的傳染性鱉病最有效的方法之一，該方法通過(guò)從鱉體直接分離病原，經(jīng)培養(yǎng)、鑒定、動(dòng)物試驗(yàn)等確定此分離物是否為該傳染性鱉病的病原以及病原的種類(lèi)。

1.細(xì)菌性病原的分離與鑒定

①將瀕死病鱉用無(wú)菌水洗凈，并用70%酒精擦拭消毒，在無(wú)菌條件下解剖。

②取病鱉體表病灶、血液、內(nèi)臟器官的病變組織等，用接種環(huán)反復(fù)插入后，劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿，倒置放入28℃恒溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)，分離純化。

③觀察各菌落形態(tài)，并挑取各菌落進(jìn)行涂片，經(jīng)革蘭氏染色和鞭毛染色后，在高倍光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)；也可取細(xì)菌培養(yǎng)物銅網(wǎng)上制膜，2%磷鎢酸負(fù)染后，用透射電鏡觀察細(xì)菌的超微結(jié)構(gòu)。

④進(jìn)行生理生化試驗(yàn)，確定分離菌株的生長(zhǎng)適溫、理化特性。根據(jù)細(xì)菌菌落特征及菌株的形態(tài)、理化特性，參考《常用細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》（東秀珠等，2001）、《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》（第九版）等資料，確定病原菌的名稱(chēng)。

⑤動(dòng)物回歸試驗(yàn)：將分離純化的菌株感染健康中華鱉，觀察是否發(fā)病及發(fā)病癥狀與自然發(fā)病癥狀是否類(lèi)似；若類(lèi)似，對(duì)人工感染發(fā)病的鱉重新進(jìn)行細(xì)菌的分離鑒定，分離鑒定出的病原與感染接種病原相同，可證實(shí)此分離菌株為該鱉病病原。

⑥藥物敏感試驗(yàn)：用紙片擴(kuò)散法檢測(cè)分離細(xì)菌病原對(duì)常用藥物的敏感程度，從而指導(dǎo)生產(chǎn)用藥。

2.病毒性病原的分離與鑒定

分離病毒的方法很多，這里介紹一種比較簡(jiǎn)單的方法。

①解剖病鱉，取肝、脾、腎等內(nèi)臟器官，用滅菌生理鹽水洗2～3次后，剪碎，勻漿機(jī)勻漿，加入含800～1000國(guó)際單位/毫升青霉素、鏈霉素的Hank's液，制成10%～20%的組織懸液，再以2000轉(zhuǎn)/分鐘離心10～20分鐘；取上清液，使其通過(guò)0.2微米的細(xì)菌濾器除菌。

②取濾液接種健康鱉，觀察動(dòng)物是否出現(xiàn)與自然發(fā)病相似的癥狀。若出現(xiàn)相似癥狀，可證明該鱉病為病毒性疾病。但要鑒定為何種病毒，需要繼續(xù)進(jìn)行電鏡觀察和特定的生理生化實(shí)驗(yàn)，確定其核酸類(lèi)型和生物學(xué)特征。

③對(duì)常見(jiàn)病毒可進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)、PCR鑒定或免疫學(xué)鑒定等。