論文：大銀魚人工繁殖技術(shù)研究

大銀魚人工繁殖技術(shù)研究

王煜恒 ，陳軍 ，王會(huì)聰 ，張坤 ，李華

（1.江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院畜牧獸醫(yī)學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江 212400；2.句容市華南水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)合作社，江蘇 鎮(zhèn)江 212400）

當(dāng)前大銀魚資源面臨著資源量上升到一定高度后會(huì)急劇下跌，并且?guī)啄甑貌坏交謴?fù)，甚至出現(xiàn)絕產(chǎn)的現(xiàn)象。大銀魚在自然情況下自身繁殖，受精率及孵化率都非常低，一般都在10%以下，而以前移植過銀魚的水庫在移植之后基本依靠大銀魚自繁自育，這是目前大銀魚資源量下降的主要因素之一。因此急需相關(guān)人員對已形成種群的大銀魚資源采取新的技術(shù)和方法進(jìn)行合理保護(hù)，保持資源穩(wěn)定與持續(xù)高產(chǎn)的研究已成為水庫生態(tài)資源保護(hù)和開發(fā)的一大課題。該試驗(yàn)將探索開展人工授精的魚卵進(jìn)行室內(nèi)人工孵化，并對孵出的仔魚進(jìn)行人工培育，以期提高魚苗孵化率、出苗率以及增殖存活率。

1 材料與方法

1.1 場地和魚卵

試驗(yàn)場地為句容市華南水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地內(nèi)。試驗(yàn)所用大銀魚卵來自宿遷洪澤湖（泗洪縣半城鎮(zhèn)）和句容墓東水庫。洪澤湖魚卵于2019年1月9日采集，句容墓東水庫魚卵于2019年1月15日采集。

1.2 魚卵的采集

親魚用單層刺網(wǎng)捕撈，1 h收集1次，收獲后立刻送至岸邊進(jìn)行半干法人工授精。親魚按雌雄比例3∶1搭配，30尾雌魚一組，首先將親魚用5%的鹽水消毒，然后用毛巾擦干體表水分，擠壓雌魚生殖腔將魚卵置于干凈塑料袋內(nèi)，隨后將10尾雄魚生殖腔剪開后放入卵粒中用毛筆輕輕攪動(dòng)，加入少量0.7%的生理鹽水，塑料袋充氣后搖晃30 s，完成授精。受精卵靜置2～4 min后，用湖水沖洗2～3次，洗掉剩余精液和未成熟卵子及其他污物，最后開始孵化。

1.3 孵化管理

該試驗(yàn)采用了4種孵化方式，分別為水庫網(wǎng)箱、水泥池、室內(nèi)網(wǎng)箱、塑料箱4種孵化方式。其中后3種方式均在室內(nèi)開展，并提供微流水環(huán)境，水源為水庫水，經(jīng)過濾后轉(zhuǎn)入蓄水塔中。水庫網(wǎng)箱為100目紗絹制成，長寬高分別為2 m×2 m×2 m，孵化時(shí)網(wǎng)箱上端離水面0.2 m；水泥池的長寬高分別為4 m×2 m×1 m，孵化時(shí)保持水深0.5 m；室內(nèi)網(wǎng)箱置于前述水泥池內(nèi)，長寬高分別為1 m×1 m×1 m，孵化水深0.5 m；塑料箱的長寬高分別為0.6 m×0.5 m×0.4 m，保持水深0.25 m。為了便于統(tǒng)計(jì)相關(guān)數(shù)據(jù)，每種孵化方式中獨(dú)立設(shè)置3個(gè)長寬高分別為0.3 m×0.3 m×0.3 m小網(wǎng)箱置于其中，塑料箱中放3個(gè)同體積的小塑料箱，每個(gè)小箱放入1 000個(gè)受精卵，用于計(jì)數(shù)孵化率和出苗率。

1.4 苗種培育

仔魚孵出后第4 d點(diǎn)數(shù)，第12 d后具平游能力時(shí)收集1200尾用于開口餌料的試驗(yàn)，其余均投入水庫。試驗(yàn)分成4組，分別為對照組（不投喂）、餌料組（選用蛋黃、輪蟲和鹵蟲3種餌料），每組3個(gè)盆（直徑40 cm，水深10 cm），每盆100尾同一批次的仔魚，試驗(yàn)期間每天換1/2的水。試驗(yàn)開展40 d，結(jié)束后計(jì)數(shù)成活的仔魚數(shù)，統(tǒng)計(jì)各組成活率。

1.5 指標(biāo)測定

孵化時(shí)間是指同批次受精卵中50%孵化出膜是所用的時(shí)間。

受精率/%=受精卵數(shù)量/魚卵總數(shù)×100%；

孵化率/%=孵化仔魚數(shù)/受精卵數(shù)量×100%；

出苗率/%=平游仔魚/受精卵數(shù)量×100%；

仔魚成活率/%=仔魚存活數(shù)/仔魚總數(shù)×100%。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2003初步整理后，用SPSS 18.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析（one-way ANOVA），用Duncan氏多重比較檢驗(yàn)分析組間差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義性程度，P＜0.05為差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SE）形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩次受精的基本情況

洪澤湖魚卵受精結(jié)束后，在當(dāng)?shù)胤€(wěn)定1天后帶水運(yùn)回句容基地孵化，句容墓東水庫魚卵采集結(jié)束后就地開展孵化。大銀魚受精卵直徑為0.9 mm左右，1 mL卵數(shù)約為1 200粒左右，根據(jù)受精卵總體積進(jìn)行估算其總數(shù)。受精2 d開始計(jì)算受精卵的受精率，此時(shí)受精卵表現(xiàn)為細(xì)胞圓滿膨脹形成清晰的卵周隙，未受精卵則畸形或者無卵周隙。每批卵中隨機(jī)選擇100個(gè)受精卵在顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)3次取平均值。由表1可知，洪澤湖采集的的魚卵數(shù)在654萬左右，受精率為58.67%，遠(yuǎn)高于墓東水庫的30.67%，且后者僅采集到72萬粒魚卵。各孵化設(shè)施中的投卵情況見表2，平均投卵密度為20萬粒/m2。

表1 受精卵采集情況

表2 投卵情況

2.2 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

由表3可見，洪澤湖的大銀魚卵在四種孵化方式中孵化率和出苗率分別高于墓東水庫魚卵的四種方式。室內(nèi)開展的3種孵化方式孵化率和出苗率都要高于室外孵化方式，其中室內(nèi)水泥池的孵化率和出苗率最高，室內(nèi)水泥池網(wǎng)箱孵化次之，室內(nèi)塑料箱孵化方式要低于前2種方式。在孵化時(shí)間上，兩個(gè)地區(qū)的魚卵差別不大，但是室內(nèi)孵化方式均要短于室外孵化方式。

表3 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

2.3 不同餌料對仔魚成活率的影響

從表4中可發(fā)現(xiàn)，對照組的仔魚成活率僅為9.33%，遠(yuǎn)低于其他組。蛋黃組前期的成活率尚可，隨著培育時(shí)間的延長，蛋黃已不能為大銀魚所攝食，死亡逐步升高，40 d后成活率降至17.67%。輪蟲組的成活率最高，達(dá)到78.67%，鹵蟲組成活率略低于輪蟲組，為77.67%。

表4 不同餌料對仔魚成活率的影響

3 討論

3.1 不同地區(qū)受精率差異的影響

洪澤湖地段相比于墓東水庫較為北一點(diǎn)，1月份時(shí)，洪澤湖地區(qū)氣溫約為零下5～10℃，而墓東水庫地區(qū)則為1～10℃，袁新明等研究發(fā)現(xiàn)大銀魚屬低溫產(chǎn)卵類型,其最佳產(chǎn)卵水溫2～4℃[6]。洪澤湖地區(qū)溫度相對較低，水溫在2～4℃之間的區(qū)域比較多，建議在受精時(shí)，在可行范圍內(nèi)，水溫在2～4℃之間為會(huì)有最好的受精效果。

3.2 不同孵化方式對孵化率和出苗率的影響

每種孵化方式中設(shè)置3個(gè)小箱，魚卵投放時(shí)，從中隨機(jī)數(shù)出1 000個(gè)大銀魚卵置于每個(gè)小箱內(nèi)，這些魚卵中存在部分未受精卵，而未受精的魚卵孵化至10 d后極易發(fā)生水霉病。受精卵隨發(fā)育進(jìn)行，卵表面出現(xiàn)細(xì)密的卵膜絲，極易于其他魚卵相互黏連成一塊，若其中粘附一個(gè)發(fā)生水霉病的未受精卵，就會(huì)導(dǎo)致整塊魚卵都發(fā)病。試驗(yàn)小箱內(nèi)每天都需挑出未受精卵，而大的孵化設(shè)施內(nèi)由于魚卵較多，無法挑除未受精卵，兩者之間孵化率有較大差異。

表2及表3可看出在四種孵化方式中室內(nèi)孵化率遠(yuǎn)高于室外孵化率，而洪澤湖地區(qū)孵化率全部高于墓東水庫孵化率，所以室外孵化效果較差，而室內(nèi)效果則好一點(diǎn)?？梢酝茰y陽光對于大銀魚魚卵孵化率有害，即大銀魚卵孵化最好放在陰涼地方，而在室內(nèi)的3個(gè)方式中，室內(nèi)水泥地孵化率最好。韓廣建得出的結(jié)論可以確定，受精率對受精卵在網(wǎng)箱內(nèi)的存活率有明顯影響。分析認(rèn)為，當(dāng)網(wǎng)箱附著生物后，網(wǎng)箱內(nèi)外的水交換能力明顯降低，未受精卵的死亡、腐爛污染網(wǎng)箱內(nèi)水質(zhì)會(huì)造成不良影響受精卵受霉菌感染及腐爛的程度[7]。水泥地中有很多泥沙，使受精卵可以被分開，不容易堆積在一起，水霉病沒有辦法傳播。而網(wǎng)箱和塑料箱比較光滑，魚卵容易移動(dòng)，堆積在一起，水霉病容易傳播。

3.3 不同餌料對仔魚成活率的影響

由表4可知在喂養(yǎng)時(shí)間段內(nèi)，對照組的問題在于沒有食物，早期仔魚有卵黃提供生長所需營養(yǎng)，并且不開口食用食物，所以前期各種喂養(yǎng)的效果是一樣的[12]。然而到了中后期，因?yàn)槁腰S消耗干凈，沒有食物及營養(yǎng)供給，所以對照組大量死亡，而蛋黃組也是大量死亡，所以大銀魚對于蛋黃并沒有過多的食用，鹵蟲和輪蟲喂養(yǎng)效果則一直很好。關(guān)于大銀魚仔魚早期是否攝取浮游植物一直有爭議，易建國[9]等認(rèn)為，大銀魚仔魚不能利用藻類。而朱成德[9]報(bào)道的大銀魚仔魚腸道出現(xiàn)少量浮游植物相吻合。榮長寬[10]等亦報(bào)道野外水體大銀魚仔魚對小球藻、衣藻有一定量的攝入。尤楊[11]表示大銀魚仔魚早期是以浮游植物作為開口餌料，逐步過渡到捕食輪蟲這也印證了仔魚在口器的不同發(fā)育階段攝食不同的適口餌料。而鹵蟲幼蟲和輪蟲在大小上差不多，而且2種餌料對于大銀魚前40 d的喂養(yǎng)效果相近，暫可認(rèn)為鹵蟲和輪蟲作為本研究中最好的餌料，之后的喂養(yǎng)效果需后人繼續(xù)研究。

4 小結(jié)

在該研究中，一共研究了在不同的環(huán)境下大銀魚卵的孵化率和不同餌料對于大銀魚仔喂養(yǎng)的成活率。最終得出本研究的結(jié)論，在4種不同方式的孵化中，室內(nèi)水泥池孵化效果最好，室內(nèi)網(wǎng)箱和塑料箱效果次之，室外水庫最差。所以建議大銀魚人工孵化在室內(nèi)進(jìn)行比較好。而對于不同餌料喂養(yǎng)的研究，從研究結(jié)果來說，輪蟲和鹵蟲喂養(yǎng)效果最好，而蛋黃效果比較差，所以不建議用蛋黃來喂養(yǎng)，即用輪蟲鹵蟲喂養(yǎng)比較好。