漂亮魚(yú)標(biāo)本的做法

觀察生物骨骼的方法有很多種，一般主要以制作干制骨骼標(biāo)本、拍攝X光與制作透明染色生物骨骼為主。干制骨骼標(biāo)本制作為比較解剖學(xué)上重要的方法之一， 分離后的骨頭可提供分類(lèi)、演化等研究之運(yùn)用。但此方法在制作過(guò)程中，常會(huì)導(dǎo)致部分生物骨骼組織的溶解。因此，當(dāng)骨骼需要重新再組合作其他應(yīng)用時(shí)，常會(huì)發(fā)生組裝不易的情形，甚至發(fā)生組裝上的錯(cuò)誤。而利用X光拍攝骨骼時(shí)，雖然由于生物體型態(tài)大小而有較多的限制，但卻能夠在不破壞生物外觀下進(jìn)行體內(nèi)骨骼的觀察。另外，因?yàn)橛跋袷瞧矫鎴D像，要獲得立體之相對(duì)位置必須多方位拍攝才行。而且X光的設(shè)備安全需求較高，人員也需通過(guò)證照考試，加上經(jīng)費(fèi)的需求較高，常讓一般的實(shí)驗(yàn)室卻步。

本書(shū)所利用的透明骨骼染色法，是利用特殊藥品將生物體的肌肉組織透明化后，再利用特殊染劑將骨骼進(jìn)行二重染色，讓生物標(biāo)本依骨骼成分呈現(xiàn)不同的紅藍(lán)兩色。此方法不但能夠避免在制作過(guò)程中骨骼遺失與錯(cuò)位的問(wèn)題；費(fèi)用方面也較X光照射法來(lái)得便宜許多，同時(shí)亦提供了立體的標(biāo)本觀察角度。

準(zhǔn)備物品

藥品：

• 10%福爾馬林
• 95%酒精
• 0.1%雙氧水
• 冰醋酸
• 胰蛋白酶
• 硼酸鈉
• 氫氧化鉀
• 茜素紅
• 亞里西安藍(lán)
• 甘油

作業(yè)器材：

• 存放標(biāo)本之容器
• 鑷子
• 解剖刀
• 藥匙
• 電子天秤
• 量筒

透明骨骼染色法制作的魚(yú)標(biāo)本。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

制作步驟

1. 標(biāo)本選擇：一般以體型小于20厘米的標(biāo)本為佳。大型標(biāo)本所需的耗材與時(shí)間花費(fèi)相對(duì)較多，且建議需先將內(nèi)臟去除。
2. 標(biāo)本固定：利用10%福馬林浸泡一周時(shí)間。盡量使用新鮮的標(biāo)本，保存過(guò)久會(huì)讓肌肉呈現(xiàn)偏黃的色澤，較不美觀。
3. 水洗：利用流水沖洗標(biāo)本數(shù)目，將標(biāo)本體內(nèi)之福馬林固定液洗掉。
4. 漂白：將標(biāo)本泡在0.1%雙氧水中一天。此步驟是為了將魚(yú)體體表的色素去除。過(guò)程中需注意避免將容器密封，若密封會(huì)導(dǎo)致容器中壓力上升以致魚(yú)體破裂。不過(guò)有時(shí)當(dāng)標(biāo)本非用于學(xué)術(shù)研究時(shí)，可省略此步驟，透明后的魚(yú)體會(huì)呈現(xiàn)出另一種不同的感覺(jué)。
5. 酒精溶液替換1：30%酒精→50%酒精→70%酒精→95%酒精。間以30分鐘至1小時(shí)更換一次為佳，用以調(diào)節(jié)魚(yú)體內(nèi)滲透壓平衡。
6. 軟骨染色：軟骨染劑制備：將冰醋酸與95%酒精以體積比1：4混合后，加入亞里西安藍(lán)染劑至溶液成深藍(lán)色，將標(biāo)本浸泡一天即可?？山逵捎^察尾鰭或背鰭是否染成藍(lán)色來(lái)辨識(shí)判定，并可避光于冰箱低溫保存以延長(zhǎng)使用的時(shí)間。
7. 酒精溶液替換2：95%酒精→70%酒精→50%酒精→30%酒精→純水。每一階段浸泡直至標(biāo)本沉入底部后再進(jìn)行更換。
8. 浸泡胰蛋白酶：胰蛋白酶溶液制備－將2.4g硼酸鈉溶于100毫升的水中后，加入1克之胰蛋白酶即可?？衫煤嫦鋵⒈４鏈囟忍嵘?5~40°C以提高反應(yīng)的效率。約每一周更換一次以加快制作速度，直至稍見(jiàn)骨骼即可。）
9. 浸泡0.5%氫氧化鉀溶液1：用來(lái)調(diào)節(jié)魚(yú)體滲透壓。
10. 硬骨染色：硬骨染劑制備：于0.5%氫氧化鉀溶液加入茜素紅至深紫色后，將標(biāo)本浸泡一天即可。
11. 浸泡0.5%氫氧化鉀溶液2：用來(lái)將硬骨染劑進(jìn)行脫色。
12. 浸泡混合液：0.5%氫氧化鉀：甘油=3：1。不同溶液比例下各浸泡直至魚(yú)體沉入底部后，多等待1~2天再進(jìn)行下一個(gè)階段。
13. 浸泡混合液：0.5%氫氧化鉀：甘油=1：1。
14. 浸泡混合液：0.5%氫氧化鉀：甘油=1：3。
15. 浸泡純甘油保存：將標(biāo)本放入保存容器后勿加滿，需留下一些空隙，因甘油在高溫下會(huì)膨脹，常容易導(dǎo)致液體滲出。

處理前的標(biāo)本仍保有原始體色。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

軟骨染色后的標(biāo)本呈現(xiàn)藍(lán)色。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

以蛋白酶與硬骨染劑處理后的標(biāo)本呈現(xiàn)紅藍(lán)交替的半透明感。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

透明化完成后的標(biāo)本。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

標(biāo)本范例：

軟骨魚(yú)

軟骨魚(yú)的骨骼由軟骨組成，為魚(yú)類(lèi)中較低階的種類(lèi)，所以在染色后魚(yú)體會(huì)以藍(lán)色為主。它們主要是利用鰓裂來(lái)進(jìn)行氣體交換，除了少部分的鯊與魟能夠主動(dòng)換氣外，大部分的軟骨魚(yú)皆需要藉由自身的移動(dòng)來(lái)讓水流通過(guò)鰓裂以利氣體的交換。

一般而言，軟骨魚(yú)的胸鰭都偏大，且與它們的體軸成水平，是重要的平衡器官。另外，角質(zhì)鰭條的不分支不分節(jié)是軟骨魚(yú)所特有。依照體態(tài)，軟骨魚(yú)可分成扁平狀的魟和鰩，以及流線型的鯊。為什么軟骨魚(yú)的脊椎骨為紅色的？軟骨魚(yú)的部分骨骼，如頭骨與脊椎骨，是較具鈣化的部位，故會(huì)被硬骨染劑染色成紅色。

廣東老板鯆是具有扁平身軀的鯆魚(yú)，喜歡底棲在深海海域里，將自己埋藏在沙泥中，只露出頭頂上小小的眼睛來(lái)搜尋食物。

從標(biāo)本上看，廣東老板鯆好像有兩雙眼睛。其實(shí)是因?yàn)轸~(yú)背部的眼睛，透明化后跟位于腹部的鼻孔看起來(lái)很像。廣東老板鯆的鼻孔能幫助它們感應(yīng)外在環(huán)境。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

硬骨魚(yú)

高階硬骨魚(yú)主要由正真骨魚(yú)亞組所組成。隨著演化的腳步，古代魚(yú)原本水平的胸鰭開(kāi)始往上移動(dòng)，并且逐漸轉(zhuǎn)為垂直；腹鰭則逐步往前，朝向原本胸鰭的位置移動(dòng)。這樣的相對(duì)位置讓魚(yú)類(lèi)有更強(qiáng)的水體控制力，可以緩慢游動(dòng)、靜止不動(dòng)，或是倒車(chē)。由于高階硬骨魚(yú)的胸鰭與體軸成垂直，因此行動(dòng)較為緩慢的魚(yú)類(lèi)，其胸鰭通常會(huì)呈現(xiàn)寬闊或舌片狀；反之速度較快的魚(yú)類(lèi)胸鰭則會(huì)呈線條狀或是鐮刀狀。

血鸚鵡是由臺(tái)灣的業(yè)者在意外中將橘色雙冠麗魚(yú)(Amphilophus citrinellus)和紫紅火口(Cichlasoma synspilum)雜交而成的人工魚(yú)種。但它的尾鰭付之闕如，脊椎連續(xù)彎曲，與我們熟知的正常魚(yú)體并不相同。近年來(lái)，血鸚鵡的外形被更進(jìn)一步地培育成愛(ài)心形，來(lái)滿足魚(yú)迷的喜好。

血鸚鵡因其胖胖的身軀與可愛(ài)的三角嘴而深受民眾的歡迎。圖片來(lái)源：《透視·魚(yú)》

文章題圖：《透視·魚(yú)》，時(shí)報(bào)出版。

原文發(fā)表于PanSci，文章原題：透明標(biāo)本制作——《透視·魚(yú)》作者：時(shí)報(bào)出版。轉(zhuǎn)載時(shí)部分文字有修改。

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