論文：黃緣閉殼龜繁殖孵化的研究

黃緣閉殼龜（Cuora flavomarginata）別名黃緣盒龜，俗稱夾板龜、斷板龜、金頭龜、黃板龜?shù)?，主要分布于我國南方各省，大別山區(qū)、皖南山區(qū)、日本琉球群島等地，為珍稀瀕危國家二類動物。從2006 年至今作者開展了黃緣閉殼龜一系列的人工馴化養(yǎng)殖、繁育、病害防治等生物學(xué)的科學(xué)研究。現(xiàn)將2017—2019 年度進(jìn)行的同批同池黃緣閉殼龜?shù)姆敝?、人工孵化的研究總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 黃緣閉殼龜?shù)挠H本

親龜來自2006 年信陽大別山的野生個體，人工飼養(yǎng)至今。親龜體質(zhì)健壯，體型飽滿，無病無傷，活潑好動，全部達(dá)到性成熟，龜齡為20—30 齡，產(chǎn)卵12 年以上，其中雌龜68 只，平均體質(zhì)量910 g 左右，雄龜28 只，平均體質(zhì)量650 g 左右，以每年雌龜雄龜出越冬室的重量為準(zhǔn)，體質(zhì)量幾乎沒有變化。雄龜與雌龜在每年的四月下旬至七月中旬分開飼養(yǎng)，待雌龜結(jié)束產(chǎn)卵后再合并飼養(yǎng)。雌雄親龜均自然交配、自然產(chǎn)卵。

1.2 親龜池的建造

龜池建在環(huán)境安靜，背風(fēng)向陽的地方，池長12 m，池寬5 m，池高0.6 m，池壁光滑，由水泥和磚塊建成，并附有0.05 m 的防逃檐，池底平整，由泥土垛實(shí)呈緩坡狀，坡度10°左右。池內(nèi)配有喬木和灌木，搭配常青落葉植被，起到遮蔭降溫作用，占池內(nèi)總面積的三分之二左右。龜池內(nèi)建有龜?shù)碾[蔽區(qū)、產(chǎn)卵區(qū)、飲水洗澡區(qū)、活動區(qū)等功能區(qū)，整個養(yǎng)殖區(qū)域仿生態(tài)環(huán)境。龜池用隔墻分開，三分之一的面積養(yǎng)雄龜，三分之二的面積養(yǎng)雌龜。

1.3 親龜?shù)呐嘤叭粘９芾?

驚蟄后，氣溫穩(wěn)定且平均16 ℃以上時，于晴天的上午將親龜從越冬房內(nèi)移到消過毒的飼養(yǎng)池內(nèi)，雌雄親龜分開飼養(yǎng)。投喂嚴(yán)格按照“四定”的要求，飼料為某品牌黃緣閉殼龜專用料，再用鮮河蝦、西紅柿、胡蘿卜、南瓜和促進(jìn)龜健康生長、促產(chǎn)卵的維生素添加劑等與原料按照一定比例配比而成，飼料粗蛋白質(zhì)（CP）水平41%~43%。按照體質(zhì)量1%~3%的日餌率，現(xiàn)配現(xiàn)喂，每日15：00—17：00 把飼料放入投餌臺內(nèi)，1 h 左右吃完為宜，大部分龜達(dá)到六至八成的飽食度。每天6：00—8：00 對龜池進(jìn)行打掃，清潔投餌臺、清除池內(nèi)糞便、剩餌和其他雜物，對飲水洗澡區(qū)重點(diǎn)清理并及時注入新水。

每日早中晚巡視龜池，觀察龜?shù)臄z食、交配和產(chǎn)卵等活動，保持良好的生態(tài)環(huán)境，防止敵害生物的入侵或龜?shù)奶右荩瑱z查龜體有無病傷，及時發(fā)現(xiàn)疾病并準(zhǔn)確診斷，對癥下藥，認(rèn)真做好生產(chǎn)日志記錄。

1.4 親龜?shù)慕慌洚a(chǎn)卵

雌龜雄龜分開飼養(yǎng)，可防止雌龜產(chǎn)卵期間受雄龜?shù)拇驍_，保證親龜之間的新鮮感，有利于提高親龜之間的交配率。

7 月中旬，雌龜產(chǎn)卵結(jié)束后，可把雌龜雄龜合養(yǎng)，至10 月初這段時間黃緣閉殼龜均可自由交配，交配前雄龜圍繞著雌龜打轉(zhuǎn)，有時在雌龜?shù)那胺阶柚勾讫斍靶?，若雌龜不動，雄龜則爬到雌龜背上，兩龜尾纏繞在一起，時間長達(dá)10 min 左右，交配后自動分離。

黃緣閉殼龜每年5 月中旬至7 中旬為產(chǎn)卵期，6 月為產(chǎn)卵高峰期。氣溫25~32 ℃，為適宜產(chǎn)卵溫度。黃緣閉殼龜一般在傍晚產(chǎn)卵，產(chǎn)卵前雌龜選好產(chǎn)卵位置后開始挖穴，挖穴時用前肢固定身體，兩后肢輪換挖土，挖土?xí)r以一后肢做支點(diǎn)，另一后肢則在穴內(nèi)用力挖土，并用腳爪將土踢出穴外，再用尾巴清掃浮土，經(jīng)1~2 h 即可成穴。卵穴口徑5 cm 左右，深8 cm 左右，卵穴挖好后雌龜稍作休息，即開始產(chǎn)卵。產(chǎn)卵時前肢支撐，頭高昂，后肢趴伏在穴口兩側(cè)，尾巴深入穴中。每產(chǎn)出一枚卵要間隔5 min 左右，直至產(chǎn)完。龜產(chǎn)完卵，一般都要原地休息8 min左右，再開始蓋穴。蓋穴時，前肢固定不動，兩后肢輪著作業(yè)，把穴外的泥土扒往穴內(nèi)，每扒土一次就用后肢壓一下。當(dāng)穴窩填滿泥土?xí)r，雌龜用整個身體后半部的腹甲用力壓，一旦卵穴蓋好，龜便離去，整個過程約需3 h 左右。

1.5 孵化的設(shè)備設(shè)施和準(zhǔn)備

孵化房間面積為28 m2，具有良好的保溫保濕效果，裝有空調(diào)、排氣扇、自動檢測濕度溫度的設(shè)備，通過智慧終端設(shè)備實(shí)現(xiàn)實(shí)時手機(jī)監(jiān)控。孵化箱為規(guī)格50 cm×50 cm×40 cm 的泡沫箱，箱底和箱壁有小的通氣孔，孵化基質(zhì)為直徑0.4~0.6 cm 的膨化蛭石。房間內(nèi)另配有溫度計、濕度計、淋水器、水桶等生產(chǎn)工具。

在孵化房間使用的前半月，將孵化房間徹底清掃，進(jìn)行殺菌、殺蟲、消毒，將孵化基質(zhì)進(jìn)行暴曬殺菌，把孵化箱及生產(chǎn)工具用高濃度的高錳酸鉀進(jìn)行浸泡后暴曬，營造干凈、清潔的生產(chǎn)環(huán)境。

1.6 龜卵的收集及人工孵化

信陽的黃緣閉殼龜一般在5 月中旬至7 月中旬產(chǎn)卵。雌龜產(chǎn)卵期間，每天傍晚時觀察龜?shù)漠a(chǎn)卵情況，確定產(chǎn)卵位置。次日清晨8：00 左右找到產(chǎn)卵窩后，輕輕扒開卵窩上的沙土，將龜卵小心取出輕放在盛卵具中。采卵結(jié)束后，整理好產(chǎn)卵場，隨后把卵拿到孵化房間進(jìn)行人工孵化。孵化前在每個孵化箱內(nèi)裝入4 kg 蛭石，用純凈水按照70%~90%的含水量進(jìn)行調(diào)配。當(dāng)龜開始產(chǎn)卵時，將收集到的龜卵放入孵化箱后，在卵、箱體上用筆標(biāo)注產(chǎn)卵的相關(guān)信息。作者采用半裸露孵化法進(jìn)行孵化，即卵面積的80%左右填入基質(zhì)中，且動物極向上。沒有明顯受精的卵，可隨意平放，然后蓋上箱蓋，這種方法便于觀察龜卵的發(fā)育情況，在整個孵化過程中，孵化箱不采取任何加溫加濕措施。

在孵化過程中不能隨意翻動受精卵，否則會造成胚胎死亡，室內(nèi)的濕度始終保持在75%~95%。每日早晚各巡視一次孵化室，檢查濕度、溫度、空氣流通性及卵的發(fā)育、破殼出苗情況，及時清除霉變、壞死及未受精的卵，防止蛇、鼠等敵害生物的入侵。受精卵經(jīng)過70~90 d 的發(fā)育，發(fā)育良好的胎體陸續(xù)破殼出苗，幼苗進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，隨后進(jìn)入稚龜?shù)娘曫B(yǎng)管理階段。

2 結(jié)果

2017—2019 年同批次黃緣閉殼龜親龜繁殖人工孵化情況見表1、表2 和表3。

表1 親龜產(chǎn)卵情況

表2 龜卵受精情況

表3 受精卵孵化情況

3 分析與討論

3.1 親龜產(chǎn)卵情況分析

試驗(yàn)的黃緣閉殼龜為第一批下山野生種，經(jīng)過十多年的人工飼養(yǎng)培育龜齡在20—30 齡之間，屬人工養(yǎng)定的一批老龜。每只雌龜?shù)漠a(chǎn)卵情況基本穩(wěn)定在2.46~3.24 枚之間。部分雌龜每年產(chǎn)卵兩次，產(chǎn)卵期基本穩(wěn)定在5 月中旬至7 月中旬，高峰產(chǎn)卵期在6 月，產(chǎn)卵期兩個月。這種情況說明，黃緣閉殼龜在20—30 齡的繁殖力是相對穩(wěn)定的。但自身的產(chǎn)卵量并不是很大。因此，應(yīng)建立更加適應(yīng)的仿生態(tài)環(huán)境，在親龜培育中加入利于性腺發(fā)育的各種營養(yǎng)物質(zhì)如鮮活蚯蚓、青蝦、果蔬等。采取人為的干預(yù)措施，延長親龜?shù)纳L期等綜合性技術(shù)手段，提高親龜?shù)漠a(chǎn)卵量。至于黃緣閉殼龜?shù)姆敝沉蜕芷诘难芯坑写院蟪掷m(xù)跟蹤進(jìn)行。

3.2 龜卵受精率的分析

至今的生產(chǎn)實(shí)踐表明此批黃緣閉殼龜產(chǎn)卵的受精率在67.07%~74.14%之間。龜卵完全未受精的產(chǎn)卵窩數(shù)占11.24%~23.61%之間，部分未受精的窩數(shù)占20.83%~31.94%之間，龜卵的受精率較低，可能由于此批雄龜?shù)凝旪g過大，雄龜在長期人工培育過程中，各種生態(tài)因子沒有自然環(huán)境下的適宜，造成精子的活力下降。同時，雄龜與雌龜?shù)谋壤秊?∶2.4，雌雄龜配比不盡合理。

龜卵的受精率不理想，可以調(diào)整雌雄龜?shù)谋壤秊?∶1，保持群體的穩(wěn)定性，同時營造良好的養(yǎng)殖環(huán)境，加強(qiáng)親龜?shù)娘曫B(yǎng)管理，確保親龜?shù)膬?yōu)良性狀不退化。

3.3 龜卵的孵化分析

龜卵的孵化時間與孵化溫度呈負(fù)相關(guān)，在適宜的孵化溫度范圍內(nèi)，溫度越高，受精卵出苗的時間越短，有效孵化積溫越小。從近幾年的情況看，最短龜卵孵化天數(shù)62 d，平均孵化溫度30.8 ℃，孵化積溫1 909.6 ℃·D；最長孵化天數(shù)96 d，平均孵化溫度28.5 ℃，孵化積溫2736 ℃·D。

通過統(tǒng)計分析，受精卵的出苗率在74.82%~87.79%之間，孵化過程中出現(xiàn)受精卵發(fā)育停止、溫度濕度控制不好造成死卵和炸裂、不破殼兒或提前破殼、受精卵霉變等情況，對孵化造成了一定的影響，因此應(yīng)通過仿生態(tài)的生境培育優(yōu)質(zhì)的親龜，產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的受精卵。孵化過程中，通過人為干預(yù)措施，實(shí)現(xiàn)胚胎發(fā)育所需的溫度、濕度的精準(zhǔn)調(diào)控，控制溫度在23~33 ℃之間，空氣的濕度在75%~95%之間，以保證受精卵的正常發(fā)育。同時應(yīng)每天早晚巡查孵化房一遍，清除霉變和壞死的卵，嚴(yán)防敵害生物的侵入，做好孵化的日常管理。