水產(chǎn)養(yǎng)殖高效利用顯微鏡檢查（鏡檢）魚體的方法

肉眼檢查主要是以癥狀為依據(jù)，如果同一尾魚體并發(fā)兩種以上的癥狀，就很難確定魚患何病。

還有的癥狀好幾種魚病都存在，如體色變黑、蛀鰭、爛尾、鱗片脫落、鰓絲分泌黏液增多等癥狀均在多種魚病中出現(xiàn)。

在這種情況下，僅靠肉眼檢查是不能確診的，必須進(jìn)一步用顯微鏡檢查，方可做出進(jìn)一步的診斷。

（1）鏡檢的注意事項(xiàng)

1）用活的或剛死亡的病體檢查。

2）保持濕潤(rùn)。待檢病體如體表干燥，則寄生蟲和細(xì)菌會(huì)死亡，癥狀也會(huì)模糊不清。

3）檢查工具要清潔衛(wèi)生。

4）海水動(dòng)物的檢查需用清潔的海水或生理鹽水，淡水動(dòng)物的檢查需用清潔的淡水或生理鹽水。

5）一時(shí)無(wú)法確定病原體的，要妥善保留好標(biāo)本。

6）保持臟器完好。打開體腔后，要保持內(nèi)臟器官的完好無(wú)損，有利于觀察病灶部位。

（2）檢查方法

1）玻片壓展法：

取被檢動(dòng)物器官或組織的一小部分，或一滴黏液或一滴腸內(nèi)容物等，置于載玻片上，滴少許清水或生理鹽水，用另一載玻片壓平，然后置低倍顯微鏡下觀察，辨認(rèn)病原體。

檢查后用鑷子或解剖針或微吸管取出寄生蟲的可疑組織，分別放入盛有清水或生理鹽水的培養(yǎng)皿中，以待作進(jìn)一步的處理。

2）載玻片法：

此法適用于低倍或高倍顯微鏡檢查。

取要檢查的小塊組織或一小滴內(nèi)含物置于載玻片上，滴入少許清水或生理鹽水，蓋上蓋玻片，輕輕壓平（避免產(chǎn)生空氣泡），先置于低倍鏡下檢查，尋找目標(biāo)，然后再用高倍鏡觀察，以確定病原體。

如果是細(xì)菌引起的疾病，制片時(shí)還要染色。

鏡檢一般先要用目檢來(lái)確定病變部位，然后再用顯微鏡作細(xì)微的全面檢查。

鏡檢的重點(diǎn)同樣是魚的鰓絲、體表、內(nèi)臟等病變部位。

但由于鏡檢只能檢查很小的部分組織，為了避免遺漏，每一個(gè)病變部位至少要制3個(gè)片子，檢查不同點(diǎn)的組織。

（3）檢查項(xiàng)目

1）黏液：

在魚的體表黏液中，除了肉眼可見(jiàn)的較大型的寄生蟲和病征外，往往有許多肉眼看不見(jiàn)的病原體，如顫動(dòng)隱鞭蟲、魚波豆蟲、車輪蟲及吸蟲囊蚴等，黏孢子蟲和小瓜蟲的胞囊肉眼也不易區(qū)分。

在檢查時(shí)，先用解剖刀刮取魚體表的黏液，然后按照鏡檢方法將黏液放到顯微鏡下觀察。

2）鼻腔：

用鑷子或微吸管從鼻腔內(nèi)取少許內(nèi)含物，置顯微鏡下檢查，可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、車輪蟲等原生動(dòng)物。然后用吸管吸取少許清水注入鼻孔中，再將液體吸出，置于培養(yǎng)皿中，用低倍顯微鏡觀察，可發(fā)現(xiàn)指環(huán)蟲、鳋類等。

3）血液：

從鰓動(dòng)脈或心臟取血。如從鰓動(dòng)脈取血，先剪去一側(cè)鰓蓋，然后左手用鑷子將鰓瓣掀起，右手用微吸管插入鰓動(dòng)脈或腹大動(dòng)脈吸取血液。

吸起的少許血液可直接放在載玻片上，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下檢查；吸起較多的血液，可放入培養(yǎng)皿內(nèi)，然后再取一小滴制成玻片，在顯微鏡下檢查。

如從心臟取血，先除去魚體腹面兩側(cè)鰓蓋之間最狹處的鱗片，再用尖的微吸管插入心臟，吸取血液。

血液鏡檢可發(fā)現(xiàn)錐體蟲、擬錐體蟲等原生動(dòng)物。培養(yǎng)皿內(nèi)的血液用生理鹽水稀釋后，在顯微鏡下檢查，可發(fā)現(xiàn)線蟲和血居吸蟲。

4）鰓：

可先用剪刀剪取一小片鰓組織，放在載玻片上，滴入適量的清水，蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察；

然后刮取鰓片上的黏液或可疑物，同樣按上述方法進(jìn)行檢查。

魚的鰓是特別容易被病原體侵襲寄生的部位，鰓隱鞭蟲、黏孢子蟲、微孢子蟲、膚孢蟲、車輪蟲、斜管蟲、小瓜蟲、半眉蟲、舌杯蟲、毛管蟲等原生動(dòng)物，指環(huán)蟲、三代蟲、雙身蟲等單殖吸蟲，復(fù)殖吸蟲囊蚴，軟體動(dòng)物的幼蟲及鳋類等，在鰓上往往都會(huì)寄生。

為了檢查的準(zhǔn)確性，每邊的鰓至少要檢查2片以上，取鰓組織時(shí)，最好從每一邊鰓的第一片鰓片接近兩端的位置剪取一小塊，寄生蟲大多在鰓片的這兩個(gè)位置上有寄生。

5）體腔：打開體腔，發(fā)現(xiàn)有白點(diǎn)，用顯微鏡檢查，可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、微孢子蟲、絳蟲等成蟲和囊蚴。

6）脂肪組織：

脂肪組織如發(fā)現(xiàn)白點(diǎn)，壓片鏡檢，可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲。

7）胃腸：首先應(yīng)把腸道外壁上所有的脂肪組織盡量去除干凈，不然在檢查時(shí)，脂肪進(jìn)入腸道內(nèi)的檢查物，會(huì)妨礙觀察。

脂肪去除后，一般是先進(jìn)行肉眼檢查，觀察腸道外形是否正常，若腸道外壁上有許多小白點(diǎn)，通常是黏孢子蟲或微孢子蟲的胞囊；

肉眼檢查完后，一般是將腸道分為前腸、中腸和后腸3段，分別進(jìn)行檢查。胃腸道也是最容易受細(xì)菌和寄生蟲侵襲的地方。

除了引起腸炎的細(xì)菌外，其他很多寄生蟲如鞭毛蟲、變形蟲、黏孢子蟲、微孢子蟲、球蟲等原生動(dòng)物及復(fù)殖吸蟲、線蟲、棘頭蟲、絳蟲等都可經(jīng)常發(fā)現(xiàn)，有時(shí)數(shù)量還相當(dāng)大。

復(fù)殖吸蟲、絳蟲、線蟲和棘頭蟲，通常寄生在前腸（胃）或中腸；六鞭毛蟲、變形蟲、腸袋蟲等，一般寄生在后腸近肛門3～6厘米的地方。

檢查時(shí)除了注意發(fā)現(xiàn)較大型的寄生蟲和在腸液中生活的寄生蟲外，還應(yīng)注意腸內(nèi)壁上有無(wú)白色點(diǎn)狀物或瘤狀物，有無(wú)潰爛、發(fā)紅、發(fā)紫、出血等現(xiàn)象。

如果有小白點(diǎn)，壓破其胞囊，往往可以看到大量的黏孢子蟲，有時(shí)也會(huì)是微孢子蟲。

青魚腸里潰爛或有白色瘤狀物，往往是球蟲的大量寄生；如果發(fā)紅、發(fā)紫、出血等，則一般是細(xì)菌性腸炎。

8）肝臟：同樣先用肉眼觀察，注意肝臟的顏色與正常魚有無(wú)明顯變化，有無(wú)潰爛、病變、發(fā)白和腫瘤等。

在肝臟的表面，有時(shí)可發(fā)現(xiàn)復(fù)殖吸蟲的胞囊或蟲體，有的則有黏孢子蟲、微孢子蟲或球蟲形成的胞囊的小白點(diǎn)。

將外表觀察完后，從肝臟上取少許組織，放在載玻片上，蓋上蓋玻片，輕輕壓平，先在低倍鏡下觀察，然后再用高倍鏡觀察，通常在病魚肝臟上可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、微孢子蟲等的孢子或胞囊，有時(shí)還有吸蟲的囊蚴。

9）脾臟：鏡檢脾臟少許組織，往往可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲或胞囊，有時(shí)可發(fā)現(xiàn)吸蟲的囊蚴。

10）膽囊：膽囊壁和膽汁，除用載玻片法在顯微鏡下檢查外，還要用壓展法或放在培養(yǎng)皿里用低倍顯微鏡檢查。

膽囊內(nèi)可發(fā)現(xiàn)六鞭毛蟲、黏孢子蟲、微孢子蟲、復(fù)殖吸蟲和絳蟲幼蟲等。

11）心臟：取一滴內(nèi)含物，在顯微鏡下檢查，可發(fā)現(xiàn)錐體蟲、擬錐體蟲和黏孢子蟲。

12）鰾：用載玻片法和壓片法同時(shí)檢查，可發(fā)現(xiàn)復(fù)殖吸蟲、線蟲、黏孢子蟲及其胞囊。

13）腎臟：取腎臟應(yīng)當(dāng)完整，如腎臟很大，則分前、中、后3段分別檢查，可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、球蟲、微孢子蟲、復(fù)殖吸蟲和線蟲等。

14）膀胱：用載玻片法和壓展法同時(shí)檢查，可發(fā)現(xiàn)六鞭毛蟲、黏孢子蟲和復(fù)殖吸蟲等。

15）性腺：取左右性腺，先用肉眼觀察外表，常可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、微孢子蟲、復(fù)殖吸蟲囊蚴、絳蟲的雙槽蚴和線蟲等。

16）眼：用彎頭鑷取出眼睛，放于玻片上，剖開鞏膜，釋出玻璃體和水晶體，在低倍顯微鏡下檢查，可發(fā)現(xiàn)吸蟲的幼蟲和黏孢子蟲。

17）腦：取腦組織少許，鏡檢可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲和復(fù)殖吸蟲的胞囊或尾蚴。

18）脊髓：把頭部與軀干部交接處的脊椎骨剪斷，再把尾部與軀干部交接處的脊椎骨也剪斷，用鑷子從前端的斷口插入脊髓腔，把脊髓夾住，慢慢將其整條拉出來(lái)，分前、中、后3段檢查，可發(fā)現(xiàn)復(fù)殖吸蟲的幼蟲和黏孢子蟲。

19）肌肉：剝?nèi)テつw，分前、中、后取小片肌肉組織，用玻片法和壓展法檢查，可發(fā)現(xiàn)黏孢子蟲、復(fù)殖吸蟲、絳蟲和線蟲等幼蟲。

鏡檢的準(zhǔn)確率取決于制片的技巧、顯微鏡的使用和對(duì)各種病原體外部特征的識(shí)別。

制片厚薄要適當(dāng)，先用低倍鏡找到病原體，然后再用高倍鏡仔細(xì)觀察，以識(shí)別病原體的類型。

如在檢查中發(fā)現(xiàn)某種寄生蟲大量寄生，可確定為某種疾??；如有幾種寄生蟲同時(shí)寄生，可根據(jù)蟲體數(shù)量和危害程度的不同來(lái)診斷。

同時(shí)，還要根據(jù)病魚的癥狀和水體環(huán)境等因素，進(jìn)行比較和分析，找出主要病原體和次要病原體。