水產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)丁香酚類麻醉劑殘留現(xiàn)狀及評價

水產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)丁香酚類麻醉劑殘留現(xiàn)狀及評價

文/王鵬 李濤 賈立平 李鋒剛 王綠洲

丁香酚類對魚有麻醉作用，因而近年來被廣泛用于活魚運輸，但其在水產(chǎn)品中的應(yīng)用我國目前暫無相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。為給水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)，本研究對某地市出售水產(chǎn)品中五類丁香酚類麻醉劑殘留進行檢測，丁香酚類麻醉劑總檢出率為82%。從食用安全性評價結(jié)果看，本次監(jiān)測水產(chǎn)品中丁香酚類麻醉劑殘留對人體健康尚未構(gòu)成風(fēng)險。

隨著生活水平的提高，人們對優(yōu)質(zhì)蛋白的需求不斷增加，水產(chǎn)品作為日常生活中不可或缺的優(yōu)質(zhì)蛋白源之一，人們對其需求不再停留在品種上，而更注重質(zhì)量和鮮活度。我國地域遼闊，加之水產(chǎn)品重點養(yǎng)殖區(qū)主要分布在東南沿海一帶，要將鮮活的水產(chǎn)品輸送到北方城市不得不進行長距離的活體運輸。有硬鰭的活魚在運輸中，由于空間狹小，魚類產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致魚類不停地碰撞和摩擦，魚鱗脫落，皮膚損傷，甚至死亡，大大地增加了魚類長途運輸?shù)某杀?，減少了經(jīng)濟收益。在石斑魚、鱖魚、羅非魚等名貴品種的運輸途中使用鎮(zhèn)靜劑可以增加成活率，提高商品價值。由于麻醉劑具有良好的鎮(zhèn)靜作用，因而近年來被廣泛用于活魚運輸中。

丁香酚（Eugenol），即4-烯丙基2-甲氧基苯酚，是一種無色或蒼黃色液體，有強烈丁香香氣，難溶于水，廣泛存在于丁香油、肉桂葉油、肉桂皮油、樟腦油、肉豆蔻油等芳香油中，在醫(yī)學(xué)上被廣泛應(yīng)用于牙科鎮(zhèn)痛和防腐。1972年，日本遠藤發(fā)現(xiàn)丁香酚這種香料對魚有強烈的麻醉作用，開始將它作為麻醉劑進行研究。丁香酚已多次用于虹鱒等名貴水產(chǎn)品的麻醉，但針對丁香酚可使用的水產(chǎn)品種、含量范圍等報道不多。

國際上對于丁香酚是否可作為漁用麻醉劑及其對人體的危害還存在爭議。美國的FDA沒有規(guī)定丁香酚可以在水產(chǎn)品中使用，但可將其作為食品添加劑使用；日本、澳大利亞、韓國、新西蘭等國認(rèn)為丁香酚可作為合法的水產(chǎn)麻醉劑，但要經(jīng)過一定的休藥期才可上市。我國對丁香酚在水產(chǎn)品中的使用并沒有相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，這給水產(chǎn)品中丁香酚的合理使用及殘留監(jiān)控帶來了很大的不便。本文通過研究，希望為水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

一、材料和方法

（一）樣品采集

采集按照《水產(chǎn)品抽樣方法SC/T 3016-2004》進行。根據(jù)各種水產(chǎn)品養(yǎng)殖習(xí)性及流通環(huán)節(jié)特點，于春（4月）、夏（8月）季對水產(chǎn)品批發(fā)市場進行了調(diào)查，對石斑魚、鱖魚、羅非魚等3個水產(chǎn)品種進行了樣品采集，共計采集樣品78個。采樣后立刻將樣品送回實驗室進行前處理及冷藏。每份水產(chǎn)品均取3個平行樣進行檢測。

（二）儀器與試劑

Waters2695型液相色譜儀、2487紫外檢測器、超聲波提取儀、渦旋混勻器、LXJ-II型大容量低速離心機和旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

丁香酚（CAS號：97-53-0）、異丁香酚（CAS號：97-54-1）、甲基丁香酚（CAS號：93-15-2）、甲基異丁香酚（CAS號：93-16-3）、乙?；惗∠惴樱–AS號：93-29-8）標(biāo)準(zhǔn)品（純度均≥97%）；甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純）；正己烷、氯化鈉（均為分析純）；無水Na2SO4（分析純）；實驗用水（超純水）。

二、實驗方法

（一）水產(chǎn)品中丁香酚類麻醉劑檢測

參照J(rèn)incheng Li等人（2016）測定水產(chǎn)品中丁香酚殘留的方法，結(jié)合實驗室實際情況，對其進行優(yōu)化。

（二）色譜條件

Symmetryshield TM RP18色譜柱（5μm，250mm×4.6mm），柱溫35℃；流動相配比比例為甲醇：水（52:48）；進樣流量大小為1.3mL/min；監(jiān)視器采用熒光檢測器；波長為280nm。

三、結(jié)果

（一）丁香酚類麻醉劑檢出的總體情況

本次共抽檢3種水產(chǎn)品78份，檢出率為82%。丁香酚檢出值為3.28μg/kg～54.58μg/kg，異丁香酚檢出值為4.00μg/kg～9.40μg/kg，甲基異丁香酚檢出值為6.80μg/kg～16.00μg/kg，乙?；惗∠惴訖z出值為17.50μg/kg～54.00μg/kg。從陽性樣本數(shù)量來看，石斑魚32例、鱖魚26例、羅非魚6例，陽性率分別為88.9%、86.7%、50%，依次為石斑魚＞鱖魚＞羅非魚，檢出構(gòu)成比分別為石斑魚50.0%、鱖魚42.9%、羅非魚7.1%。詳見表1。

表1 陽性樣品數(shù)量統(tǒng)計表 單位：個

測定結(jié)果表明，樣品中五種丁香酚類組分之間的檢出率沒有關(guān)聯(lián)，各種組分的檢出率高低不同，以丁香酚為主，由高到低順序為丁香酚＞乙?；惗∠惴樱炯谆惗∠惴樱井惗∠惴樱炯谆∠惴印?/span>

（二）不同品種中丁香酚類麻醉劑殘留情況

所采集樣品中，石斑魚中丁香酚、甲基異丁香酚含量分別為24.50μg/kg、7.51μg/kg，鱖魚中丁香酚、異丁香酚、乙?；惗∠惴雍糠謩e為8.48μg/kg、9.40μg/kg、35.80μg/kg，羅非魚中丁香酚、甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴雍糠謩e為43.30μg/kg、6.80μg/kg、37.00μg/kg外，除此之外三個品種其余各組分均為未檢出。丁香酚在石斑魚、鱖魚、羅非魚肌肉組織中均有不同程度的殘留，分布在3.30μg/kg～118.00μg/kg之間，數(shù)據(jù)分布區(qū)間較寬，異丁香酚、甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴釉趥€別樣品中檢出，含量范圍較窄，且殘留較?。ǔ阴；惗∠惴?4.00μg/kg外），甲基丁香酚全部為未檢出。表2顯示，石斑魚與鱖魚差異極顯著（p=0.003＜0.01）、與羅非魚（p=0.30＞0.05）無顯著性差異；鱖魚與羅非魚（p=0.06＞0.05）無顯著性差異。

表2 不同品種檢測結(jié)果統(tǒng)計表 單位：μg/kg

（三）不同月份丁香酚類麻醉劑殘留情況

從表3可以看出，甲基丁香酚均未檢出。石斑魚、鱖魚在春、夏季丁香酚均有檢出，羅非魚僅夏季檢出丁香酚，其余組分在夏季樣品中有不同殘留程度的檢出現(xiàn)象，春季均為未檢出。試驗研究期間，全部樣品尚未發(fā)現(xiàn)甲基丁香酚殘留。

表3 不同月份檢測結(jié)果統(tǒng)計表 單位：μg/kg

四、分析與討論

（一）不同組分殘留比較分析

從天然植物中，通過乙醇蒸汽蒸餾法、超臨界CO2萃取法等方法，可提取丁香揮發(fā)油，提取物中主要組分為丁香酚（80.0%以上），并含有多種成分。本研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)樣品中主要殘留也為丁香酚，其平均含量為24.50μg/kg，其他各組分、含量差異明顯，部分樣品中乙?；惗∠惴痈哂诙∠惴?。筆者分析認(rèn)為，存在丁香酚類麻醉劑殘留的水產(chǎn)品，其流通過程中使用的丁香酚麻醉劑是多種丁香酚類物質(zhì)摻雜在一起，形成的混合物；或者使用的是以甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴拥榷∠惴宇愇镔|(zhì)為主的麻醉劑。

（二）不同季節(jié)之間的變化分析

石斑魚、鱖魚、羅非魚等水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，主產(chǎn)地分布在我國海南、廣東、湖北、廣西等南方、中部省份，屬熱帶、亞熱帶季風(fēng)性氣候區(qū)域，商品魚銷往國內(nèi)各地。銷往我國北方的鮮活水產(chǎn)品，要經(jīng)過長途運輸，對魚類的生命力、商販的經(jīng)濟效益是一個很大的考驗，此為麻醉劑的使用先決條件。從表3可以看出，丁香酚類麻醉劑春、夏季間（p石斑魚=0.13、p鱖魚=0.08，p＞0.05）無顯著性差異。僅本研究而言，丁香酚類麻醉劑在春季、夏季均有使用，無季節(jié)性變化。

（三）不同品種之間的差異分析

實際生產(chǎn)中丁香酚使用劑量在40mg/L～50mg/L或100mg/L～150mg/L之間，范圍較寬。研究結(jié)果表明，所抽取品種石斑魚、鱖魚、羅非魚中均存在使用丁香酚的現(xiàn)象，品種間差異顯著性僅見于石斑魚與鱖魚之間，且石斑魚（24.50μg/kg）高于鱖魚（8.48μg/kg）。分析認(rèn)為造成以上結(jié)果有兩個原因，一是石斑魚主產(chǎn)地在我國南方地區(qū)，銷往北方地區(qū)，運輸路途較遠，一般需要30h～40h，可能造成其使用丁香酚的劑量較鱖魚大；二是可能存在低濃度多次使用現(xiàn)象，以確保運輸期間魚類處于麻醉狀態(tài)。

（四）食用安全性評價分析

丁香酚使用后，經(jīng)過生物體內(nèi)血液、肌肉、肝臟等組織器官代謝，產(chǎn)生各種代謝物。Fischer等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，丁香酚經(jīng)過人體代謝之后，可在24h內(nèi)通過尿液基本完全排除。尿液中未代謝的丁香酚含量低于0.1%。由此可見，丁香酚在人體中代謝效果好，但其代謝產(chǎn)物還需要進一步證實。

JECFA（食品添加劑聯(lián)合專家委員會）規(guī)定丁香酚的ADI（每日允許攝入量）為0～2.5mg/（kg·bw）。根據(jù)WHO GEMS/Food Cluster Diets（2012）的調(diào)查結(jié)果顯示，中國居民水產(chǎn)品（未經(jīng)處理）的平均消費量分別為淡水魚27.0g/d，海水魚1.29g/d，其他水產(chǎn)品7.16g/d，合計消費水產(chǎn)品35.5g/d。根據(jù)本研究檢測結(jié)果，水產(chǎn)品中丁香酚殘留有較高的檢出率（88.9%、86.7%、50%），殘留量范圍為3.28μg/kg～54.58μg/kg。按照最高殘留量計算，每人每天從食用魚中攝入的丁香酚總量最多為1.94μg，僅為JECFA推薦ADI的0.78‰。歐盟藥品管理局對異丁香酚使用安全性進行評估，建議其ADI為0.075mg/（kg·bw），最大殘留量為6mg/kg。本研究所檢樣品異丁香酚殘留均小于6mg/kg。因此，總體上看，本研究抽檢的水產(chǎn)品中存在使用丁香酚類麻醉劑的現(xiàn)象，但丁香酚類麻醉劑殘留對人體健康尚未構(gòu)成風(fēng)險。