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對蝦的高效育種的四種技術(shù)
在動物育種實踐中,選育、雜交、等傳統(tǒng)的育種方法曾發(fā)揮了重要作用,在品種改良、新品種育成、品系繁育和經(jīng)濟雜交等方面均獲得了很大的成功。
隨著社會的發(fā)展,現(xiàn)代生物技術(shù)突飛猛進,并滲透到生物科學各個領(lǐng)域,特別是為動物育種技術(shù)開辟了更廣泛的途徑,極大地提高了動物育種的效率。目前現(xiàn)代生物育種技術(shù)主要有以下幾種:
多倍體誘導技術(shù)
與二倍體相比,三倍體魚、貝類具有許多優(yōu)良特征生長周期縮短、成熟期持續(xù)生長、肉質(zhì)改善、成熟魚壽命延長、存活率高、抗病性增強等。
因此,研究三倍體經(jīng)濟魚、貝類具有重要意義。但是僅利用自然界偶然發(fā)生的多倍體是困難的。
近年來,國內(nèi)外學者利用染色體操作技術(shù),對人工誘發(fā)三倍體魚、貝類進行了廣泛研究。
到目前為止,通過人工誘導方法,在香魚、虹蹲、三刺刺魚、銀大麻哈魚腸、羅非魚、鯉魚、草魚、三角舫、泥鰍、六須站加、蝶尸尸、川蝶尸人刀、皺紋盤鮑、扇貝、牡蝠等一些經(jīng)濟魚、貝類等都成功獲得了三倍體。
溫度休克法誘導中國對蝦三倍體,誘導率在一之間。誘導出中國對蝦三倍體,并采用熱休克及細胞松弛素分別產(chǎn)生一及一的四倍體中國對蝦應用化學法和溫度休克法曾成功培育出對蝦多倍體,并養(yǎng)成至仔蝦。
用熱休克法誘導出斑節(jié)對蝦四倍體。以熱休克誘導獲得中國對蝦三倍體,并比較病原感染條件下中國對蝦二倍體和三倍體血液學變化,為對蝦抗逆特性提供了一定依據(jù)和參考。
雌核發(fā)育技術(shù)
雌核發(fā)育是單性生殖的一種,指卵子依靠自己的細胞核發(fā)育成個體的生殖行為。同種或異種精子進入卵內(nèi)只起刺激卵子發(fā)育的作用,不形成雄性原核和提供遺傳物質(zhì),其子代的遺傳物質(zhì)完全來自雌核,因此雌核發(fā)育產(chǎn)生的后裔全部為雌性,只具有母本的性狀。
魚類中存在的天然雌核發(fā)育已確知的有一種,如黑龍江銀卿、滇池高背卿、臺灣莫氏謠、亞洲鉤齒蝶等。人工雌核發(fā)育是用射線、射線或紫外線照射精子,使精子遺傳失活與正常的卵”受精”,卵在人工條件下溫差、化學刺激等得以發(fā)育成正常的個體。
目前國內(nèi)外已有多種養(yǎng)殖魚類人工誘導雌核發(fā)育成功,年代中期我國對此展開了研究,鯉、魚即、草、鮑等人工誘導雌核發(fā)育己取得了一定的成就。
在全雌對蝦方面,中國對蝦的正常卵子與經(jīng)“射線照射精子的受精卵進行對比,研究了不同射線強度的照射劑量對受精卵發(fā)育的影響。人工誘導出中國對蝦雌核發(fā)育個體,最高誘導率達。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)
轉(zhuǎn)基因技術(shù)是20世紀90年代發(fā)展起來的一項新的品種培育方法,它直接將外源有利基因?qū)肽繕藙游镆胄碌纳a(chǎn)性狀。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)克服了物種間的生殖隔離,是定向培育新品種的有效途徑。水產(chǎn)動物中研究較成功的是轉(zhuǎn)基因魚,如轉(zhuǎn)基因蛙魚比對照生長快3~6倍。
在貝類中對蛤、牡蠣、貽貝、鮑等皆進行了轉(zhuǎn)基因研究,以轉(zhuǎn)基因鮑的研究較為成功。等研究了用電脈沖介導的精子載體法將外源基因?qū)腚s色胞中,其導入率可達65%。
通過電轉(zhuǎn)移法將蛙的生長素基因?qū)爰t鮑卵中,培育出可快速生長的鮑。國內(nèi),黑龍江水產(chǎn)研究所成功地將大馬哈魚生長激素基因轉(zhuǎn)入鯉魚。
中科院水生所分離、克隆草魚和鯉魚的生長基因產(chǎn)生了轉(zhuǎn)基因魚。在對蝦中,等采用顯微注射法等方法將基因?qū)肽戏桨讓ξr、的受精卵中并得到了瞬時表達。在我國孔杰等對中國對蝦的精子介導外源基因轉(zhuǎn)移做了初步研究。
將羊生長激素基因注射至交配過的中國對蝦雌蝦的納精囊中,以精子作為載體,獲得首例轉(zhuǎn)基因仔蝦,并比較了精子載體法和顯微注射法的轉(zhuǎn)基因效率,分別為1%和3%。等克隆到凡納對蝦的肌動蛋白啟動子,應用顯微注射、基因槍和電脈沖等方法獲得了轉(zhuǎn)基因凡納對蝦并申請了專利。
將綠色熒光蛋白基因?qū)胫袊鴮ξr的受精卵中并得到表達。目前,轉(zhuǎn)基因方法除傳統(tǒng)的顯微注射法、基因槍法和精子攜帶法外,目前已發(fā)展了逆轉(zhuǎn)錄病毒介導法、電穿孔法、轉(zhuǎn)座子介導法及胚胎細胞介導法等。對顯微注射另外,采用聚乙烯亞胺與精子載體法相結(jié)合再將外源基因轉(zhuǎn)入皺紋盤鮑時的轉(zhuǎn)導率、表達率都很高。
遺傳標記輔助育種技術(shù)
在過去的數(shù)十年中,人們利用群體遺傳學和統(tǒng)計學的原理對農(nóng)作物以及家禽家畜的種質(zhì)選育和改良進行了大量的研究工作,在很多品種上取得了成功。
但建立在種群遺傳學基礎(chǔ)上的傳統(tǒng)遺傳選育和改良技術(shù)有許多缺陷,例如,當要選擇的性狀無法準確測量時,其選育的效果會大大降低。
同時,傳統(tǒng)選育也需要對大量的個體進行測量,而如果所要選擇的性狀只在成體或生活周期的后期表達,這時的選育也非常困難。
另外,當選育的目標涉及到數(shù)個性狀,并且這些性狀之間相互制約時,傳統(tǒng)選育的效率也很難提高。
分子生物學技術(shù)的快速發(fā)展,尤其是標記技術(shù)的不斷更新為傳統(tǒng)的遺傳選育和改良帶來了新的活力,一種新型的選種方法—遺傳標記輔助育種逐漸成為研究的熱點。遺傳標記是位于染色體上能夠作為標記用于基因組分析的特殊位點。
在蛋白質(zhì)水平揭示遺傳多樣性的遺傳標記稱為生化遺傳標記,而在水平揭示遺傳多樣性的標記則稱為分子標記。
實施遺傳標記輔助育種的前提是遺傳標記與數(shù)量性狀間存在一定的關(guān)遺傳標記輔助育種由于充分利用了表型、系譜和遺傳標記的信息,與只利用表型和系譜信息的常規(guī)育種方法相比,具有更大的信息量,同時由于標記輔助選擇不易受環(huán)境的影響,且沒有性別、年齡的限制,從而提高了選種的效率和準確性,尤其是對于限性性狀、低遺傳力性狀以及難以測量的性狀,其優(yōu)越性更為明顯。
目前遺傳標記輔助育種技術(shù)主要用于水產(chǎn)動物的種質(zhì)鑒定與系統(tǒng)進化、群體遺傳與分化、基因定位與連鎖圖譜的構(gòu)建等研究。
近年來,水產(chǎn)育種專家逐漸利用標記輔助育種技術(shù)逐漸轉(zhuǎn)向探索與生長、抗病、抗逆等性狀相關(guān)的遺傳標記,同時結(jié)合傳統(tǒng)育種技術(shù),培育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、抗逆能力強的新品種或新品系。
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