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實現牙鲆全雌化養(yǎng)殖的關鍵技術
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一、人工誘導雌發(fā)育（人工誘導牙鲆雌核發(fā)育）：牙鲆雌魚成熟的卵子用異源真鯛精子激活。采集成熟的真鯛精液，用林格氏液稀釋50倍，在30W紫外線燈下照射45秒，使其遺傳物質失活，然后與牙鲆卵子進行人工“受精”，卵子被激活。受精3分鐘洗卵后放入0～2℃海水中進行冷休克處理，抑控第二極體釋放，使染色體加倍，形成雌核發(fā)育二倍體。45分鐘轉入15～16℃水中孵化，卵子正常發(fā)育，但真鯛精子并沒有提供任何遺傳物質。
二、高溫誘導偽雄魚
1、偽雄魚：即遺傳上是雌性（染色體為XX），功能是上雄性（性腺成熟時產生精液），是排精的雌魚。
2、偽雄魚的制備：用成熟的牙鲆魚卵與經紫外線滅活的異源真鯛精子受精，再冷休克處理制備牙鲆雌核發(fā)育二倍體，孵化后在仔魚30日齡～100日齡，利用高溫誘導（28℃），則產生偽雄魚。經過2年的培育，性腺發(fā)育成熟，能夠自然排放正常精子。性成熟偽雄可與普通雌魚自然交配，獲得優(yōu)質受精魚卵。
3、親魚培育技術：正常促熟培育是當自然水溫下降到8～9℃時，停留數十日，根據生產所需用卵時間，提前2～3個月設計控溫、控光時間。反季節(jié)繁殖是在高溫期根據生產所需時間，利用機械制冷或深井水降溫，當開始降溫時，黑暗7天，然后每天降溫0.5℃，到水溫14.0℃，保持溫度不變；光照從每天12小時開始，采用日光燈照明延長光照時間促進性腺發(fā)育。在性腺促熟期（產卵前三個月）餌料中應添加營養(yǎng)強化劑和維生素，以滿足親魚生產精卵的物質需求。親魚促熟溫度應控制在性腺發(fā)育適宜溫度9～22℃之間，最好在14℃左右。親魚開始產卵后，餌料中不再添加強化劑，延續(xù)促熟期光照時間。水溫控制在12～18℃，最適水溫14～16℃，常流水，產卵其鹽度應在27～32，最好在30以上。光照以不超過2000LX為好。
三、全雌牙鲆苗種培育技術：
1.全雌牙鲆苗種培育的關鍵是水溫的控制，在30日齡～100日齡牙鲆苗種性腺分化期間，溫度控制在20℃以下,100日齡后溫度可隨自然溫度的升高而提高。
2.培育密度：在水量足，水質好的育苗室，初孵仔魚可放到3～5萬尾/m3；仔魚生長到5mm左右時，密度控制在1萬尾/m3～2萬尾/m3；仔魚附底前，利用虹吸法把魚苗倒入新池培育，密度降低到1萬尾/m3～1.5萬尾/m3左右；全長18～20mm時，密度以0.5萬尾/m3～0.8萬尾/m3為宜；20mm以上的全雌牙鲆苗種密度占池底面積2/3即可，給苗種預留生長空間。
3.其他日常管理條件：基本同普通牙鲆。養(yǎng)殖用水鹽度適宜范圍為15～32，最適鹽度20左右；pH為7.8～8.2；溶解氧6mmg/L以上；氨氮含量低于0.02mg/L，養(yǎng)殖餌料一般為配合餌料和小雜魚。
二、高溫誘導偽雄魚
1、偽雄魚：即遺傳上是雌性（染色體為XX），功能是上雄性（性腺成熟時產生精液），是排精的雌魚。
2、偽雄魚的制備：用成熟的牙鲆魚卵與經紫外線滅活的異源真鯛精子受精，再冷休克處理制備牙鲆雌核發(fā)育二倍體，孵化后在仔魚30日齡～100日齡，利用高溫誘導（28℃），則產生偽雄魚。經過2年的培育，性腺發(fā)育成熟，能夠自然排放正常精子。性成熟偽雄可與普通雌魚自然交配，獲得優(yōu)質受精魚卵。
3、親魚培育技術：正常促熟培育是當自然水溫下降到8～9℃時，停留數十日，根據生產所需用卵時間，提前2～3個月設計控溫、控光時間。反季節(jié)繁殖是在高溫期根據生產所需時間，利用機械制冷或深井水降溫，當開始降溫時，黑暗7天，然后每天降溫0.5℃，到水溫14.0℃，保持溫度不變；光照從每天12小時開始，采用日光燈照明延長光照時間促進性腺發(fā)育。在性腺促熟期（產卵前三個月）餌料中應添加營養(yǎng)強化劑和維生素，以滿足親魚生產精卵的物質需求。親魚促熟溫度應控制在性腺發(fā)育適宜溫度9～22℃之間，最好在14℃左右。親魚開始產卵后，餌料中不再添加強化劑，延續(xù)促熟期光照時間。水溫控制在12～18℃，最適水溫14～16℃，常流水，產卵其鹽度應在27～32，最好在30以上。光照以不超過2000LX為好。
三、全雌牙鲆苗種培育技術：
1.全雌牙鲆苗種培育的關鍵是水溫的控制，在30日齡～100日齡牙鲆苗種性腺分化期間，溫度控制在20℃以下,100日齡后溫度可隨自然溫度的升高而提高。
2.培育密度：在水量足，水質好的育苗室，初孵仔魚可放到3～5萬尾/m3；仔魚生長到5mm左右時，密度控制在1萬尾/m3～2萬尾/m3；仔魚附底前，利用虹吸法把魚苗倒入新池培育，密度降低到1萬尾/m3～1.5萬尾/m3左右；全長18～20mm時，密度以0.5萬尾/m3～0.8萬尾/m3為宜；20mm以上的全雌牙鲆苗種密度占池底面積2/3即可，給苗種預留生長空間。
3.其他日常管理條件：基本同普通牙鲆。養(yǎng)殖用水鹽度適宜范圍為15～32，最適鹽度20左右；pH為7.8～8.2；溶解氧6mmg/L以上；氨氮含量低于0.02mg/L，養(yǎng)殖餌料一般為配合餌料和小雜魚。
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