一種簡便的菌種保藏方法：每五年傳代一次的菌種維護管理方案

隨著飼料工業(yè)的發(fā)展，固態(tài)發(fā)酵技術在活性酵母飼料，益生素，酶制劑等一些飼料產品生產中得到了迅速的推廣和發(fā)展，菌種退化則是一些企業(yè)經常發(fā)生的事。這里介紹一種菌種維護與保藏方法，經過多年的實踐，證明它是一套行之有效，簡單易行的管理方法。

1、 菌種的保藏

1.1 扣囊擬內孢霉，白地霉，皮狀絲孢酵母及所有產孢子的真菌
取麥麩少許，按1︰0.8的比例加入自來水，用手攪拌均勻后，塞入10×100mm的試管中，塞到試管的1/3處為止，然后用棉塞塞住試管口，10支一捆用牛皮紙包扎好，于0.1—0.14Mpa的蒸汽壓力下滅菌1小時，取出，置于無菌操作室或無菌操作柜中冷卻。
然后在無菌條件下接入菌種，移入培養(yǎng)室（箱）中培養(yǎng)，培養(yǎng)成熟后，進入組裝，成熟標志是扣囊擬內孢霉，皮狀絲孢酵母，白地霉等為全管全長成白色，一般培養(yǎng)30—40小時即可全部長成白色，而產孢子的絲狀真菌以全管長滿豐厚的本色孢子為度，一般培養(yǎng)時間長達72小時。
菌種保藏的裝置圖見圖一。組裝前，18×180mm試管必須滅菌處理，橡皮塞最好也要事先滅菌，可用70%酒精溶液擦拭，烘干。氯化鈣要事先在105度烘箱中烘干一小時。

圖一

組裝完畢后，置于冰箱中于4度溫度下保藏，可保藏4---5年不變質不退化。一般置于冰箱后，14天后麥麩曲種全部都會變干，所以該方法集干燥、低溫、缺氧三種功能于一體，有效地防止了菌種的退化，使用時也很方便易行。

1.2 其它酵母菌
如假絲酵母，擲孢酵母，鐵紅酵母，啤酒酵母，產香酵母及其它一些能產生特異物質的酵母（如產蝦青素的紅發(fā)麩酵母）等。具體保藏方法同上所述，只是培養(yǎng)基中補充0.5%的葡萄糖即可。

1.3 細菌，放線菌等
可采用砂土管保藏法，本文略。

2、菌種的維護管理方案
有一個正確而規(guī)范的管理菌種的方法是保證產品質量的前提之一，基本原則之一是盡量減少傳代次數(shù)。采用下面的工藝流程可達到這一目的。見下圖二。
一般來講，五年后保藏種不會退化，只需取一支，轉接到加富培養(yǎng)基上培養(yǎng)一次，再做生產用的斜面菌種，同時又可做出發(fā)菌種作出下一個五年用的24支組裝式保藏種，如此循環(huán)往復下去。
所以從流程中可看出，每五年實際才傳代轉管一或二次，把菌種自然變異退化的幾率減少到最低的程度，不失為一套較為規(guī)范科學的菌種維護管理方案。

圖二

(來源：《糧食與飼料工業(yè)》雜志1996年第10期，鐘啟平)

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