了解魚類血液淋巴細(xì)胞

隨著魚類免疫研究的深入，充分研究魚類的各種免疫細(xì)胞的組成，魚類相關(guān)細(xì)胞的分選變得尤為重要，而認(rèn)識魚類血液中相關(guān)細(xì)胞的特征則應(yīng)是我們開展這一研究的基礎(chǔ)，小編梳理相關(guān)知識資料，帶你了解一下魚類的血液及血淋巴細(xì)胞特征相關(guān)知識，旨在提高大家對魚類血細(xì)胞認(rèn)知，為流式分析分選、魚類生理研究等奠定基礎(chǔ)。

魚類的血液是一種特殊的循環(huán)組織，由懸浮在液體細(xì)胞間物質(zhì)(血漿)中的細(xì)胞組成。硬骨魚的血容量很小，只有體重的5%。魚類的血細(xì)胞主要有紅血球(紅細(xì)胞)、白細(xì)胞(白細(xì)胞)和血小板（凝血細(xì)胞/血栓細(xì)胞）。

圖1. 魚類血液組成

一、魚類血液中的細(xì)胞成分

1.紅細(xì)胞（Erythrocytes, Red Blood Cell, RBC）

與其他非哺乳脊椎動物一樣，魚類紅細(xì)胞呈卵圓形，細(xì)胞核位于中心位置。細(xì)胞質(zhì)中血紅蛋白飽和。紅細(xì)胞的數(shù)量跟魚的種類、年齡、季節(jié)和環(huán)境條件相關(guān)聯(lián)。一般魚類紅細(xì)胞數(shù)值范圍為1.05-3.0×106/mm3。值得注意的是，在一些南極南極魚類中，血紅蛋白可以大大減少或完全消失，并且沒有紅細(xì)胞。

圖2魚類紅細(xì)胞

(A, B)紅細(xì)胞(RBC)呈卵圓形，均含有中央核，A為HE染色，B為TB染色。

(C)紅細(xì)胞(黑色箭頭)PAS染色陽性，（D）紅細(xì)胞Gomori硝酸鉛法顯示酸性磷酸酶活性。

2.白細(xì)胞（Leukocyte, White Blood Cell, WBC）

與高等脊椎動物的白細(xì)胞一樣，魚類外周血中的白細(xì)胞也分為無粒白細(xì)胞（Agranulocytes）和有粒白細(xì)胞（Granulocytes）。無粒白細(xì)胞無顆粒(溶酶體)存在于細(xì)胞質(zhì)中，它們的細(xì)胞核是不裂的。無粒白細(xì)胞2種:淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。有粒白細(xì)胞有3種：中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。

圖3. 魚類白細(xì)胞分類及其形態(tài)特征

（1）淋巴細(xì)胞（Lymphocytes）

淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞中數(shù)量最多的類型，占白細(xì)胞總數(shù)的70 - 90%。硬骨魚類淋巴細(xì)胞的平均直徑在5 ~ 8 μm之間(大淋巴細(xì)胞可達(dá)12 μm)。細(xì)胞核幾乎占據(jù)了整個細(xì)胞，只留下少量的嗜堿性細(xì)胞質(zhì)邊緣。它含有一些線粒體和核糖體。

圖4. 人淋巴細(xì)胞形態(tài)特征及分類（供參考學(xué)習(xí)）

（2）單核細(xì)胞（Monocytes）

單核細(xì)胞數(shù)量不多，占白細(xì)胞總數(shù)的0.1-0.5%，所以也有一些學(xué)者否認(rèn)硬骨魚中存在單核細(xì)胞。它們在組織化學(xué)上類似于哺乳動物單核細(xì)胞，具有少量細(xì)小分散的顆粒，被周期酸-希夫(PAS)和酸性磷酸酶陽性染色。細(xì)胞質(zhì)被注入偽足。偏心核的染色質(zhì)邊緣分散。溶酶體的電子密度很高。高爾基體發(fā)育良好。在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下，它們發(fā)展成為單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)(巨噬細(xì)胞)的成熟細(xì)胞。

圖5. 人單核細(xì)胞形態(tài)特征（供參考學(xué)習(xí)）

（3）中性粒細(xì)胞（Neutrophils）

在有粒白細(xì)胞中，中性粒細(xì)胞最為豐富。魚類相關(guān)報道表明血液循環(huán)的中性粒細(xì)胞數(shù)量變化很大，占白細(xì)胞的1-25%。硬骨的中性粒細(xì)胞有淺灰色的顆粒狀細(xì)胞質(zhì)(Romanowsky染色)。在血涂片中，中性粒細(xì)胞呈圓形或橢圓形，通常比紅細(xì)胞大。偏心核的形狀通常與人腎相似，但在成熟細(xì)胞中可以辨認(rèn)出兩個或三個核葉。中性粒細(xì)胞呈過氧化物和蘇丹黑陽性反應(yīng)。

圖6. 人中性粒細(xì)胞形態(tài)特征（供參考學(xué)習(xí)）

（4）嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophils）

硬骨魚血液中嗜酸性粒細(xì)胞的報道多種多樣。在不同種類的鮭魚(Salmo, Oncorhynchus)的血液中都發(fā)現(xiàn)了它們，但據(jù)報道在虹鱒血液中很少發(fā)現(xiàn)或不存在。目前的研究也一致認(rèn)為嗜酸性粒細(xì)胞存在于鯉科魚類血液中。中性粒細(xì)胞中通常存在大的胞漿顆粒，而可以被Romanowsky或oreosin（伊紅）染成鮮紅色來鑒別。

圖7. 人嗜酸性粒細(xì)胞形態(tài)特征（供參考學(xué)習(xí)）

（5）嗜堿性粒細(xì)胞（Basophils）

如同嗜酸性粒細(xì)胞一樣，關(guān)于魚類血液中是否存在嗜堿性粒細(xì)胞的報道也各不相同。在金魚，鮭魚，鯉魚中，部分報道Romanowsky染色的嗜堿性粒細(xì)胞具有一個大的偏心核，有均勻的染色質(zhì)和大的紫藍(lán)色的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物。此外魚類肥大細(xì)胞與哺乳動物相似(結(jié)締組織棲息地和異色胞漿顆粒)。

圖8. 人嗜堿性粒細(xì)胞形態(tài)特征（供參考學(xué)習(xí)）

3.凝血細(xì)胞（Thrombocytes）

魚類血細(xì)胞組成最大的特點在于不含有和哺乳動物血細(xì)胞一樣的血小板，而是含有類似功能的凝血細(xì)胞（也有稱血栓細(xì)胞），哺乳動物血小板是由骨髓巨核細(xì)胞分離出來的細(xì)胞質(zhì)小塊。魚類凝血細(xì)胞主要呈梭形，細(xì)胞核與細(xì)胞形狀一致。Romanowsky染色發(fā)現(xiàn)凝血細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)呈透明質(zhì)。凝血細(xì)胞與其他白細(xì)胞明顯不同的是，其細(xì)胞質(zhì)中具有泡狀和微管狀結(jié)構(gòu)，還具有糖原顆粒。姬姆薩染色后，富含染色質(zhì)的細(xì)胞核呈深藍(lán)色或深紫色。細(xì)胞質(zhì)極為稀少，在紡錘形核的一個極附近通常有淺藍(lán)色區(qū)域。除了參與血液凝血，也有報道稱，魚類的血小板是血液巨噬細(xì)胞，形成一種對外來物質(zhì)的保護(hù)屏障，被認(rèn)為可能是真正的消化細(xì)胞，因為它們可以通過吞噬直接清除血液循環(huán)中的細(xì)胞碎片。此外，魚類的血小板在功能上與高等脊椎動物的血小板是同源的。凝血細(xì)胞含量為60000-70000/mm3。

(來源： 水生動物健康評估)

參考文獻(xiàn)

【1】《The Physiology of fish, fourth Edition》，Edited by David H. Evans et al.

【2】陳曉耘. 魚類的血液[J]. 重慶師專學(xué)報, 2000(3):70-73.