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曾令兵:魚病診斷技術(shù)
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魚病的診斷是病害防治的基礎(chǔ),尤以魚病的早期診斷更為重要,能否對癥下藥、能否使藥物發(fā)揮效果、能否有效控制疾病的傳播,都取決于魚病的診斷。
魚病診斷應(yīng)遵照以下程序:
(一)采樣
1、病魚 選擇患病瀕死或剛死不久、癥狀典型的病魚作為診斷檢查的對象;對不能立即確診的疾病應(yīng)采取冷藏運輸方法(4℃)將樣本運輸至專業(yè)實驗室進行檢查,新鮮樣本對魚病的快速診斷十分重要。如果需要進一步診斷分析,可用固定劑將病魚或內(nèi)臟器官組織進行固定和保存。
2、發(fā)病池水樣 于多個采樣點取發(fā)病魚池水樣(水面下50-80厘米處),立即送專業(yè)實驗室分析。
(二)現(xiàn)場調(diào)查
1、養(yǎng)殖的品種結(jié)構(gòu)、苗種來源、規(guī)格大小、健康狀況和放養(yǎng)密度等。
2、池塘清塘消毒以及日常防病措施、使用的藥物和使用方法等。
3、投喂飼料的種類、來源、投餌方法、投餌量等。
4、養(yǎng)殖過程中的衛(wèi)生與健康管理措施。
5、水源、水質(zhì)、水溫、底質(zhì)等情況。
6、發(fā)病和未發(fā)病養(yǎng)殖池中魚的活動情況,如游動、攝食等。
7、發(fā)病過程以及采取過的措施,包括發(fā)病時間、患病種類、病癥與病情、死亡情況、采取的措施與效果等等。
8、發(fā)病池塘的面積、底質(zhì)、水深、水色、透明度等。
(三)病原鑒別
1、肉眼檢查
(1)肉眼觀察患病魚體及器官(包括鰓)的顏色有無變化,有無炎癥、充血、出血、貧血、腫脹、潰瘍、粘液、腹水等,有無異物附著。
(2)肉眼觀察患病魚體有無真菌或寄生蟲寄生等。
2、顯微鏡觀檢
用鑷子刮取皮膚、鰭、鰓等外部器官的粘液,或用眼科剪取其一部分患病組織如鰓絲、鰭條等,于載玻片上制成水浸壓片,于顯微鏡下檢查有無真菌或寄生蟲寄生,必要時拍照記錄觀察結(jié)果。
3、解剖檢查
肉眼檢查 解剖新鮮患病魚,肉眼觀察內(nèi)臟器官組織的顏色和形狀有無變化,如炎癥、充血、出血、腫脹、潰瘍、萎縮退化、肥大增生、體腔積水等病理變化,有無寄生蟲及其包囊等。
4、病理切片檢查 取一小塊患病組織或器官,經(jīng)固定、脫水、包埋等程序處理后,將樣品切片,再用相應(yīng)的染色方法染色,以顯示不同細胞和細胞的變化,然后進行光學(xué)或電子顯微鏡檢查(此法需要在專業(yè)實驗室進行)。
5、PCR儀檢測 PCR儀檢測技術(shù)已被世界動物衛(wèi)生組織推薦為一些魚類疾病的診斷方法之一。其主要原理是通過設(shè)計特異引物來擴增病原生物的特異基因片段而實現(xiàn)病原生物的確認和疾病的診斷(此法需要在專業(yè)實驗室進行)。
6、免疫學(xué)技術(shù)檢測 如血清中和試驗、免疫熒光、酶聯(lián)免疫檢測等技術(shù)(此法需要在專業(yè)實驗室進行)。
7、藥敏試驗檢測 對可能由細菌引起的疾病,可通過病原分離、培養(yǎng)、鑒定、人工感染等試驗后,再進行相應(yīng)的藥敏試驗檢測。目前,有一種快速藥物敏感試驗方法可以指導(dǎo)水產(chǎn)用藥,即直接從患病魚腹水或內(nèi)臟器官采樣,涂布培養(yǎng)平板,進行藥物敏感試驗,其結(jié)果是對混合菌群的總體抑制效果。
(四)多病原引起的疾病
進行魚病診斷時,要分析發(fā)病原因和考慮復(fù)合或繼發(fā)感染的可能,確定只要原因和次要原因,再對癥治療。
(長江水產(chǎn)研究所 曾令兵)
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