草魚出血病的診斷及綜合防治

近些年，草魚因肉質(zhì)緊實且鮮嫩，得到了廣大消費者的喜愛，已成為我國目前養(yǎng)殖數(shù)量較多的淡水魚種之一。草魚在魚苗時期通常以浮游動物為食。幼魚可以采食水中的昆蟲，當(dāng)發(fā)育達(dá)到50厘米以上后轉(zhuǎn)為草食。成年時期的草魚身長可達(dá)到100厘米。隨著草魚需求量的增加，養(yǎng)殖面積也隨之增加，草魚病害的問題日趨嚴(yán)重，尤其是草魚出血病。草魚出血病是一類傳染性高、傳播速度快的病毒性疾病，并且已對草魚養(yǎng)殖行業(yè)造成一定的威脅。草魚出血病是于1970年首次發(fā)現(xiàn)。經(jīng)過不斷研究于1978年確定了該病是由于草魚呼腸孤病毒引起的。該病不斷危害養(yǎng)殖草魚，并帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

1　草魚出血病概述

1.1　病原

草魚出血病，又稱之為“病毒性出血病”其病原是草魚呼腸孤病毒，該病毒屬于呼腸孤病毒科。草魚出血病病毒自1978年發(fā)現(xiàn)由草魚呼腸孤病毒引起后，經(jīng)過一系列的研究，直至1983年通過分離病毒的方法從病魚組織中獲得了濾液感染草魚，而后經(jīng)過單層細(xì)胞傳代，成功得到這一病毒，該病毒是一種直徑70納米的球狀病毒，有雙層衣殼，無囊膜，含有11個雙鏈RNA片段。同時，該病毒有較強的酸堿耐受能力，即使在高溫環(huán)境下也可以長時間生存。此外，該病毒能夠在敏感的細(xì)胞中產(chǎn)生合胞體狀細(xì)胞病變效應(yīng)。

1.2　流行情況

寄生蟲、水體等載體是草魚出血病主要的傳播工具，其主要危害對象是長2.5～15厘米的草魚或者150～350克/尾的一齡草魚種。草魚一旦感染出血病，最先表現(xiàn)出來的特征就是存活率下降，同時該病還會感染其他魚種，例如羅漢魚、青魚、麥穗魚和稀有鯽等。草魚出血病有明顯的季節(jié)性，在6～9月高溫季節(jié)發(fā)病，此時水溫通常在25～28℃，患病后的草魚死亡率可達(dá)80%以上。根據(jù)調(diào)查顯示，該病毒主要流行于湖北省、江蘇省、河南省、廣東省、福建省、上海市、四川省、河北省、浙江省、廣西區(qū)等養(yǎng)魚區(qū)域，并且出血病發(fā)病時節(jié)較長，致死率較高，嚴(yán)重影響了漁業(yè)養(yǎng)殖的發(fā)展及養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益，必須引起高度重視，及時做好防控。

1.3　主要表現(xiàn)癥狀

草魚出血病致死率較高，癥狀較為復(fù)雜，可在體內(nèi)外出現(xiàn)一系列明顯癥狀，其中最為基本的表現(xiàn)癥狀是草魚各大器官或組織充血、出血。從外表癥狀看，病魚體色呈現(xiàn)暗黑紅色，較小的魚種在燈光或者陽光下透視，明顯見到皮下和肌肉出血，病魚的下頜、眼光四周及頭頂出現(xiàn)充血現(xiàn)象，并且魚腔也有明顯出血點，眼球外突。鰓蓋和鰭基都可觀察到充血現(xiàn)象，通常情況下鰓部無明顯病變，但是由于內(nèi)出血導(dǎo)致鰓部蒼白，俗稱為“白鰓”，也有的鰓瓣呈鮮紅色斑點狀充血。從內(nèi)部病變看，可明顯看出病魚肌肉呈點狀或塊狀出血，嚴(yán)重時全身呈現(xiàn)鮮紅色；解剖后發(fā)現(xiàn)腸壁充血，腸內(nèi)無食物，腸子整體有韌性，并且在內(nèi)部脂肪、膽囊、腎、脾、腸系膜、鰾發(fā)現(xiàn)明顯出血點。其臨床癥狀主要分為3種類型，“紅腸型”“紅鰭紅鰓蓋型”“紅肌肉型”?；疾◆~可能出現(xiàn)一種或者兩種以上的癥狀。

2　草魚出血病的診斷

2.1　常規(guī)診斷方法

常規(guī)診斷主要分為以下幾方面：（1）對發(fā)病魚塘的生長環(huán)境、日常飼養(yǎng)管理情況、魚塘水質(zhì)整體狀況、發(fā)病魚在池塘狀態(tài)等方面做好現(xiàn)場調(diào)查。（2）仔細(xì)觀察病魚體內(nèi)外所有情況（3）通過鏡檢的方式檢查魚體內(nèi)外是否存在寄生蟲。（4）根據(jù)病魚的品種、規(guī)格、發(fā)病率、死亡率及發(fā)病時的狀態(tài)等其他情況進(jìn)行綜合判定。

2.2　實驗室診斷方法

通過實驗室細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)或者免疫學(xué)等方法可進(jìn)一步確診草魚出血病。具體操作如下：取病魚內(nèi)臟組織，在無菌操作下處理敏感細(xì)胞分離病毒，使用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附劑測定）或者RT-PCR法進(jìn)行鑒定，也可以用組織病料制備的病毒懸液直接接種細(xì)胞后取細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行特異性RT-PCR，通過特異性或進(jìn)一步測序結(jié)果確定病魚是否感染草魚出血病。此項技術(shù)方便、準(zhǔn)確、快速、安全，且只需要普通PCR儀和電泳儀就可檢測，具有較好的特異性和穩(wěn)定性。還可以直接取病魚的心、脾、腎、肝進(jìn)行病理切片，于顯微鏡下觀察是否出現(xiàn)典型、異常的巨大細(xì)胞或嗜堿性細(xì)胞腫大，進(jìn)而判斷是否患有出血病。

3　草魚出血病的綜合防治

3.1　綜合預(yù)防措施

（1）注重草魚餌料喂養(yǎng)工作。根據(jù)草魚的采食特點投放適口性較強的優(yōu)質(zhì)餌料，不能用腐爛餌料，以次充好，餌料的投喂順序應(yīng)當(dāng)先青料后精料，青料以鵝菜、蘇丹草、浮萍等優(yōu)質(zhì)青餌料為主，精餌料應(yīng)當(dāng)為全價熟化餌料，并且要保證蛋白質(zhì)含量大于30%。與此同時，為了滿足草魚不同生長階段的需求，定期對餌料進(jìn)行調(diào)整。（2）深度清掃。對老化池塘的淤泥進(jìn)行全面清除，保持淤泥深度小于20厘米。（3）定期、全面消毒?？衫蒙?、漂白粉、硫酸銅預(yù)防草魚出血病。具體操作如下：每水深1米占地面積1畝的池塘可用25公斤石灰石進(jìn)行潑灑，再用350克完全溶解的硫酸銅進(jìn)行潑灑，每18天輪換用藥一次，從6月份一直用到9月下旬。同時堅持在食場懸掛硫酸亞鐵合劑和硫酸銅的布袋，并根據(jù)魚池自身的大小和水深決定掛袋的只數(shù)及用藥量。（4）人工免疫預(yù)防。目前主要分為兩種免疫方式。第一種是浸洗法，用濃度為3%的鹽水浸洗3分鐘左右，再將其放入0.5%疫苗液中浸洗5～10分鐘；第二種是注射法，該方法針對于體長達(dá)10厘米以上的草魚，每尾草魚在腹腔或者背鰭基部注射0.3～0.5毫升疫苗。（5）注意季節(jié)保護(hù)。6～9月是草魚出血病流行時期，需要加強疾病防治工作，采用“內(nèi)外結(jié)合”的方法進(jìn)行全面防治，內(nèi)用板藍(lán)根、維生素B粉、維生素C粉、恩諾沙星等藥物拌餌飼喂，外用亞氯酸酐或聚乙烯等消毒劑殺死病毒，從而提高草魚自身的免疫力及抗病能力。

3.2　中藥防治措施

中草藥防治是目前使用率較高的方法之一，其優(yōu)點頗多，例如無毒副作用、抗藥性較小、資源豐富、使用到的藥材容易獲取、性能多樣化等。在有效控制草魚出血病中，研究、開發(fā)和利用中草藥不僅可以解決抗生素及替代品無法解決的抗藥性及藥物殘留問題，而且還可以提高我國漁業(yè)產(chǎn)品整體質(zhì)量。因此人們在對中草藥防治草魚出血病方面的研究越來越多，并總結(jié)篩選出較多的應(yīng)用方案。《中國漁業(yè)》報道稱，研究人員發(fā)現(xiàn)每100公斤草魚，用洗凈的鮮地榆根1公斤、稻谷10公斤，加水煮至稻谷裂口，待冷卻后喂魚，經(jīng)過一段時間發(fā)現(xiàn)效果顯著。每畝池塘用40公斤粉碎的水花生擠汁后伴入豆餅粉制成藥餌，每天喂2次，連續(xù)用15天，效果明顯。每畝水深1米的池塘用0.6公斤大黃及1.75公斤菜籽油并在水中煮沸30分鐘，待冷卻后二者充分混勻，全池潑灑，可有效防治草魚出血病。蔣德山和李炳文等用清瘟敗毒飲治療草魚出血病，按照草魚體重0.3%做成餌料進(jìn)行飼喂，一星期后觀察未見死魚，至出塘也沒有復(fù)發(fā)。

3.3　西藥防治措施

江西省奉新縣畜牧水產(chǎn)局通過對草魚出血病的分析，研究出如下治療方法。先將適量面粉調(diào)制成糊狀，冷卻后加入4克左右腸特靈，然后將面糊均勻曬干投喂到50公斤魚的日常餌料中，連用3天，效果顯著。每50公斤魚用0.3～0.6克鹽酸嗎啉胍，同時加50克食鹽，與餌料拌勻后投喂4～5天。每100公斤魚用2.5～5克魚血寧拌餌投喂，連用5天，可預(yù)防草魚出血病。

3.4　干擾素防治措施

干擾素是一種細(xì)胞因子，主要用來調(diào)節(jié)細(xì)胞功能，具有抗病毒、抗腫瘤、抑制細(xì)胞增值及調(diào)節(jié)免疫功能等效果，是當(dāng)代醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域中較為活躍的研究方向。但是目前僅在人類和高等脊椎等領(lǐng)域涉及了干擾素的研究，而在低等動物中的研究很少，僅處于開始階段。蘇建明等通過研究發(fā)現(xiàn)，在草魚受精卵中可用顯微注射法將A-干擾素基因轉(zhuǎn)移進(jìn)去，同時獲得轉(zhuǎn)基因群體，并通過PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)基因草魚進(jìn)行分子水平測定，檢測結(jié)果表明，外源人A-干擾素抗病基因可以整合入草魚基因組中。采用腹腔注射法，對轉(zhuǎn)基因魚進(jìn)行草魚出血病病毒接種攻毒實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比轉(zhuǎn)基因草魚的抗病能力明顯增強。此類藥物是目前為止發(fā)現(xiàn)的最為理想的一種抗病毒生物活性物質(zhì)，但是因成本頗高，在魚類研究較少，所以還未得到廣泛使用。

4　結(jié)語

綜上所述，草魚出血病為病毒性疾病，危害性較大，死亡率較高，所以我們應(yīng)秉承著“有效預(yù)防，積極治療”的基本原則，加強養(yǎng)殖過程中日常管理及預(yù)防工作，并且在用藥過程中使用安全、有效、科學(xué)的配藥比例，避免產(chǎn)生不必要的損失，這樣才能有效抑制該病的發(fā)生。