蝦類9種病毒性疾病及其防治

1.白斑綜合征

俗稱白斑病，是對蝦的嚴(yán)重傳染性疫病，20世紀(jì)90年代以來一直嚴(yán)重威脅著全世界對蝦的養(yǎng)殖安全。該病的特點是感染率高、發(fā)病急、死亡率高、死亡速度快。病蝦活力弱，部分瀕死蝦頭胸甲部位出現(xiàn)白色斑點，白斑綜合征因此而得名，但亦可不出現(xiàn)白斑而蝦體變紅。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為一類動物疫病，OIE將其列為必須申報的疾病。

【病原體】白斑綜合征病毒（Whitespot syndromevirus，WSSV）。

【流行與危害】20世紀(jì)90年代初，該病首先出現(xiàn)于日本及我國臺灣、廣東、福建等地，隨后擴散并遍及亞洲主要對蝦養(yǎng)殖國家和地區(qū)。幾年后蔓延到南北美洲，造成全球性的對蝦養(yǎng)殖業(yè)損失。一般蝦池發(fā)病后2～3天，最多不足1周時間可致全池死亡。

白斑綜合征病毒的宿主范圍非常廣泛。已知40多種對蝦和非對蝦甲殼動物可感染該病毒，其中中國明對蝦最為易感，其他可被感染致病或成為病毒攜帶者的對蝦科生物有：斑節(jié)對蝦、凡納濱對蝦、日本囊對蝦、墨吉對蝦、長毛對蝦、印度對蝦、桃紅對蝦、細(xì)角對蝦、白對蝦、褐對蝦、刀額新對蝦等。另外，羅氏沼蝦、海南沼蝦、埃氏沼蝦、藍(lán)氏沼蝦、脊尾白蝦、鼓蝦、克氏原螯蝦、哈氏美人蝦、龍蝦、蝦蛄、三疣梭子蟹、鋸緣青蟹、中華絨螯蟹、天津厚蟹、肉球近方蟹、日本大眼蟹、鱟等甲殼類動物等也可被感染。

在自然感染過程中，經(jīng)口和鰓感染是傳播的主要途徑，對蝦在幼體期易經(jīng)口和鰓感染從而使蝦苗攜帶病毒。此外，發(fā)病對蝦精巢、精莢、卵巢中都能檢測到病毒，因此受精卵可被污染從而造成垂直傳播。由于多種甲殼動物都可攜帶該病毒，自然環(huán)境中病毒極易在動物個體間進(jìn)行傳播，使白斑病的防治工作變得較為困難。

【癥狀及病理變化】發(fā)病蝦厭食，空胃，行動遲緩，彈跳無力，靜臥不動或在水面兜圈。頭胸甲易剝離，殼與真皮分離，部分患病對蝦在頭胸和最后的尾節(jié)甲殼內(nèi)側(cè)可見白色斑點；患病中國明對蝦、凡納濱對蝦、日本囊對蝦體色發(fā)紅，而患病斑節(jié)對蝦在瀕臨死亡時則顯示變藍(lán)現(xiàn)象。血淋巴混濁、不凝固，血淋巴細(xì)胞減少。甲殼上白斑的主要成分是碳酸鈣，是由于白斑綜合征病毒在上皮細(xì)胞內(nèi)的迅速增殖導(dǎo)致鈣、磷比顯著增高，使甲殼上形成了碳酸鈣的沉積。

病毒侵害的主要組織和器官是甲殼下上皮組織、胃及后腸上皮組織、結(jié)締組織、觸角腺、造血組織、鰓、血淋巴器官。胃部壞死最嚴(yán)重，肝胰腺實質(zhì)細(xì)胞、中腸上皮細(xì)胞、肌纖維細(xì)胞不被感染。

感染早期，被侵害組織的少量細(xì)胞核略微膨大，核中出現(xiàn)嗜酸性著色區(qū)域，核仁邊移；隨著感染時間延續(xù)，細(xì)胞核內(nèi)嗜酸性著色很快轉(zhuǎn)變?yōu)榇蟮氖葔A性包涵體，使細(xì)胞核顯著膨大，染色質(zhì)只在細(xì)胞核邊沿隱約可見，大量細(xì)胞被侵染。

病毒粒子在細(xì)胞核中復(fù)制和裝配，成熟病毒粒子聚集于細(xì)胞核中，最后細(xì)胞解體，病毒粒子再感染周圍細(xì)胞。在肌纖維之間的結(jié)締組織及肝胰腺血竇的血細(xì)胞中也可見到病毒粒子。甲殼內(nèi)面的白點在顯微鏡下可見呈重瓣的花朵狀，外圍較透明，花紋較清楚，中部不透明。

【診斷方法】在本病嚴(yán)重暴發(fā)流行時，可根據(jù)其發(fā)病史、臨床特征及病理特征作出初步診斷，最后確診需要通過實驗室檢查。診斷時應(yīng)注意與桃拉綜合征、細(xì)菌性白斑病相區(qū)別。本病的實驗室診斷方法主要是通過采集急性病例的鰓、胃、附肢或其他上皮組織，進(jìn)行下列檢查。

（1）樣品采集采集150尾蝦，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中對蝦幼體、仔蝦取完整個體，幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部，非對蝦的甲殼類動物參照對蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。

樣品采集的要求參照SC/T7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法）》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（2）組織及病理學(xué)檢查

①新鮮組織的快速染色法：取新鮮的蝦組織做成涂片，用“臺盼藍(lán)-伊紅”染色法（T-E染色法）染色后，檢查受感染細(xì)胞的典型變化。該方法適用于在現(xiàn)場或診斷實驗室對患病瀕死的對蝦仔蝦、幼蝦或成蝦進(jìn)行快速診斷。

②組織病理學(xué)診斷：經(jīng)HE染色后可清晰地觀察到各種不同組織結(jié)構(gòu)的病理變化。HE染色適用于發(fā)病對蝦或其他敏感宿主的初步診斷和對懷疑染病宿主的診斷，不適于非感染性攜帶病毒樣品的病毒檢測。

③電鏡診斷：電鏡切片可在病蝦鰓、胃、淋巴器官、皮下組織等的細(xì)胞核內(nèi)觀察到病毒粒子，通過提純負(fù)染，電鏡下可觀察到完整的病毒粒子或無囊膜的核衣殼從而進(jìn)行確診。

（3）病原學(xué)鑒定

①生物診斷法：該法采用白斑綜合征病毒指示器-SPF凡納濱對蝦幼蝦進(jìn)行試驗。將采集的可疑蝦附肢或蝦頭尖與TN緩沖液混合勻漿，離心上清液用2%無菌生理鹽水按1：10的比例稀釋，對指示蝦進(jìn)行肌內(nèi)注射（IM），然后進(jìn)行臨床觀察和組織病理學(xué)診斷。

②核酸探針檢測法：采用白斑綜合征病毒特異性的非放射性的地高辛標(biāo)記探針進(jìn)行，敏感性高于傳統(tǒng)的病理組織學(xué)診斷法。核酸探針斑點雜交檢測法適用于對蝦的成蝦、幼蝦、仔蝦、幼體和受精卵的活體、冰鮮或冰凍產(chǎn)品和其他甲殼動物感染病毒的篩查、臨床病癥的確診。

③PCR檢測法：通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，檢測病毒的特定基因。適用于對蝦各種樣品、環(huán)境生物和餌料生物的各種樣品以及其他非生物樣品中WSSV的定性檢測，具有高靈敏度和高特異性，適用于病原篩查和疾病確診。

④單克隆抗體檢測法：應(yīng)用特異性的病毒單克隆抗體，采用斑點免疫印跡、免疫熒光和ELISA等方法進(jìn)行診斷。

【防治方法】

（1）預(yù)防選擇健康蝦作為親蝦，培養(yǎng)健康蝦苗。受精卵用含氯漂粉精或碘伏（聚乙烯砒咯烷酮碘）浸洗或用過濾海水并經(jīng)紫外線消毒后沖洗5分鐘。育苗用水應(yīng)過濾和消毒，育苗期間切忌溫度過高和濫用藥物。

做好養(yǎng)殖池塘的清淤、消毒及培水工作。蝦池在養(yǎng)蝦前盡可能徹底清淤，然后進(jìn)行消毒。用生石灰或含氯消毒劑均勻潑灑全池，消毒后應(yīng)曝曬1周左右，然后進(jìn)水。養(yǎng)殖過程中合理用水、培好水色、保持優(yōu)良水質(zhì)。在養(yǎng)蝦場附近有蝦病流行時，停止從海區(qū)向蓄水池注水，應(yīng)將蝦池中的水與蓄水池中的水循環(huán)使用。養(yǎng)蝦池中適當(dāng)混養(yǎng)一些攝食浮游生物或底棲藻類的魚或貝類，有利于防止水質(zhì)過肥，起凈化水質(zhì)的作用。

放養(yǎng)密度要合理。對蝦的放養(yǎng)密度應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)厮?、海域環(huán)境、蝦池的結(jié)構(gòu)和設(shè)備、生產(chǎn)技術(shù)、管理經(jīng)驗、蝦苗的規(guī)格、飼料的質(zhì)和量等條件而定。飼養(yǎng)管理過程中要注意水質(zhì)及各種理化因子的變化，保持水體的相對穩(wěn)定；堅持巡塘，定期檢查，正確診斷，積極預(yù)防。在養(yǎng)蝦池中接種和培養(yǎng)光合細(xì)菌凈化水質(zhì)，投喂能提高對蝦細(xì)胞免疫力的中草藥和免疫促進(jìn)劑，也是目前常用的防治途徑之一。

（2）控制對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強疫病監(jiān)測與檢疫、掌握流行病學(xué)情況?？赏ㄟ^培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。

（3）處理苗種繁殖場內(nèi)WSSV檢疫呈陽性的親蝦和苗種應(yīng)全部撲殺；病毒陽性的種用和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

2.桃拉綜合征

俗稱“紅尾病”，是一種嚴(yán)重傳染性對蝦疾病，急性期以蝦體變紅（蝦紅素增多）、軟殼，過渡期以角質(zhì)上皮不規(guī)則黑化為特征。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動物疫病。OIE將其列為必須申報的疾病。

【病原體】桃拉綜合征病毒（Taura syndromevirus，TSV）。

【流行與危害】該病主要侵害凡納濱對蝦和細(xì)角對蝦，對蝦科濱對蝦屬所有成員均對本病易感，中國明對蝦也對本病易感；凡納濱對蝦除卵、受精卵和蝦蚴外，仔蝦、幼蝦及成蝦等各期均對本病易感，主要感染14～40日齡、體重0.05～5g以下的仔蝦，部分稚蝦或成蝦也容易被感染。對蝦科其他屬成員經(jīng)直接攻毒也可感染，但一般不表現(xiàn)癥狀。細(xì)角對蝦選擇系對TSV（基因1型或A抗原型）有抵抗力。

其他已報道TSV的自然感染或試驗感染宿主有白對蝦、南方對蝦、斑節(jié)對蝦、刀額新對蝦、中國明對蝦、日本囊對蝦、褐對蝦和桃紅對蝦。

目前，本病廣泛流行于美洲和東南亞對蝦養(yǎng)殖區(qū)。該病1992年首次發(fā)現(xiàn)于厄瓜多爾桃拉河地區(qū)，之后隨染疫仔蝦和親蝦貿(mào)易迅速傳播到厄瓜多爾、秘魯、哥倫比亞、洪都拉斯、危地馬拉、薩爾瓦多、巴西、尼加拉瓜、伯利茲、墨西哥、美國等美洲各大蝦類養(yǎng)殖區(qū)。1999年中國臺北從中南美洲進(jìn)口凡納濱對蝦而傳人本病，此后，隨親蝦和仔蝦的貿(mào)易傳播到中國大陸、泰國、馬來西亞、印度尼西亞等地。

該病發(fā)病急，死亡率高。一般發(fā)病蝦池自發(fā)現(xiàn)病蝦至對蝦拒食人工飼料僅5～7天，10天左右大部分對蝦死亡。部分蝦池采取積極消毒措施后轉(zhuǎn)為慢性病，逐日死亡，至養(yǎng)成收獲時成活率一般不超過20%。本病主要通過健康蝦攝食病蝦、帶病毒水源等方式水平傳播；也可經(jīng)海鷗等海鳥、劃蝽科類水生昆蟲攜帶病毒傳播。攜帶病毒親蝦也可能經(jīng)垂直途徑傳播到后代，但目前尚無可靠證據(jù)。持續(xù)感染蝦和終生帶毒蝦是傳染源；染疫存活凡納濱對蝦和細(xì)角對蝦可終生帶毒成為疾病傳播者。

【癥狀及病理變化】

（1）癥狀根據(jù)病程和癥狀，桃拉綜合征可分為急性期、過渡（恢復(fù)）期和慢性期3個階段。

①急性期：蝦紅素增多，蝦體全身呈淡紅色，尾扇和游泳足呈鮮紅色，因此蝦民稱之為“紅尾病”。取尾扇發(fā)紅的病蝦，用10倍放大鏡仔細(xì)觀察細(xì)小附肢（如末端尾肢或腹肢）的表皮上皮，可以看到病灶處的上皮壞死。急性感染蝦常死于蛻皮期間，處于脫殼后期的病蝦以軟殼、空腹為特征，瀕死蝦常浮于水面或池體邊緣。

②過渡（恢復(fù)）期：介于急性期與慢性期之間，病程極短，以病蝦角質(zhì)層上皮多處出現(xiàn)不規(guī)則黑色斑點為特征。在過渡期，典型的急性期表皮損傷在數(shù)量和嚴(yán)重程度上都有所減少或降低，病灶壞死處聚集了大量血細(xì)胞及其滲出物。大量血細(xì)胞隨后開始黑化，進(jìn)而導(dǎo)致病蝦角質(zhì)層上皮呈現(xiàn)不規(guī)則的黑色斑點。

③慢性期：成功蛻皮的病蝦，從過渡期轉(zhuǎn)入慢性期，一般無明顯的臨床癥狀，但對正常的環(huán)境應(yīng)激（如突然降低鹽度）明顯不如未染疫蝦。有的因病毒在淋巴器官持續(xù)感染而成為終生帶毒者。

（2）病理特征

①急性期：全身角質(zhì)層上皮、附肢、鰓、后腸、前腸（食管、前后胃室）可見多灶性壞死；有時在角質(zhì)層皮下結(jié)締組織細(xì)胞，以及靠近感染角質(zhì)層上皮的條紋肌纖維基質(zhì)也可見感染灶。嚴(yán)重的病例，觸角腺管狀上皮也遭破壞。多灶性表皮壞死的典型癥狀包括多個感染細(xì)胞聚集在一起、細(xì)胞質(zhì)嗜酸性增加、細(xì)胞核固縮或崩解。

②過渡（恢復(fù)）期：該期病理特征是桃拉綜合征過渡期的典型特征。在HE染色的組織病理切片上，這樣的病灶表現(xiàn)為角質(zhì)層被侵蝕，暴露的表皮血細(xì)胞和上皮被大量弧菌感染和侵襲。在桃拉綜合征過渡期，對蝦淋巴器官的組織切片在HE染色后觀察，可能外觀正常。但如果應(yīng)用TSV特異性的cDNA探針對這些切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色（ISH），就可以觀察到大量的病毒聚集在淋巴小管的外周實質(zhì)細(xì)胞內(nèi)。

③慢性期：該期病蝦的組織病理變化不明顯，僅可見大量的“類淋巴器官球體”（LOS）。類淋巴器官球體可能與成對淋巴器官的主體相連，或脫離形成異位的類淋巴器官體，位于血腔的局部區(qū)域（如心、鰓或皮下結(jié)締組織中等）。類淋巴器官球體由淋巴器官細(xì)胞和血淋巴細(xì)胞呈球形堆積而成，但從其球形特征以及缺乏中心管（典型的淋巴器官小管），可與正常淋巴器官進(jìn)行區(qū)別。應(yīng)用TSV特異性的cDNA探針進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，這些“類淋巴器官球體”的部分細(xì)胞會呈現(xiàn)陽性反應(yīng)，而其他靶組織細(xì)胞呈陰性反應(yīng)。

【診斷方法】

（1）初步診斷僅急性期的病蝦表現(xiàn)出行為的改變。急性期病蝦呈現(xiàn)缺氧狀態(tài)，常聚集在池塘邊緣或水面等溶氧高的地方，從而吸引大量的海鳥捕食。因此由垂死對蝦吸引來的海鳥在蝦池上空大量聚集，?？纱砦r池內(nèi)暴發(fā)了嚴(yán)重的流行?。ㄍǔＪ翘依C合征或白斑綜合征）。通常可以依據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征對急性期桃拉綜合征做出初步診斷：病蝦蝦體全身淡紅色、尾扇和游泳足鮮紅色，游泳足或尾足邊緣處上皮呈灶性壞死，常死于蛻皮期間，表現(xiàn)為軟殼、空腹等特征。

（2）樣品采集采集病蝦10尾，健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對蝦幼體、仔蝦取完整個體，幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部，非對蝦的甲殼類動物參照對蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。

樣品采集的要求參照SC、T7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法）》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（3）組織和病理學(xué)檢查依據(jù)前述病蝦的組織病理特征對該病作出診斷。該方法適用于桃拉綜合征的急性期、過渡期和慢性期患病對蝦的確診和對桃拉綜合征的篩查，不適用于對潛伏性感染或非感染性攜帶病毒標(biāo)本進(jìn)行疾病診斷。過渡期病蝦角質(zhì)層上皮多處出現(xiàn)不規(guī)則黑化斑，血細(xì)胞聚集，軟殼及蝦紅素不明顯。慢性期一般無明顯臨床癥狀。

（4）實驗室診斷和病原學(xué)鑒定

①生物診斷法：采用SPF凡納濱對蝦幼蝦作為桃拉綜合征病毒指示器，對疑似感染蝦進(jìn)行生物檢測，具體方法有口服法和注射法?？诜ǎ涸摲ū容^容易操作，可用較小的SPF凡納濱對蝦幼蝦進(jìn)行試驗。指示蝦隨機分為兩組，其中感染組以剁碎的疑似感染蝦樣品飼喂，對照組以正常飼料飼喂，然后對兩組蝦進(jìn)行臨床觀察和大體病理、組織病理學(xué)診斷。注射法：將采集的可疑蝦頭或全蝦樣品與TN緩沖液或2%的無菌生理鹽水按1：2或1：3混合勻漿，離心取上清作為接種物，對指示蝦進(jìn)行肌內(nèi)注射，然后進(jìn)行臨床觀察和外觀癥狀、組織病理學(xué)診斷。注射接種法宜采用較大的指示蝦進(jìn)行。

②免疫檢測技術(shù)：

斑點酶免疫反應(yīng)（DBI）：該法以感染蝦或SPF蝦血淋巴制取純化病毒，作為檢測抗原，點加于MA-HA-N45反應(yīng)板表面，干燥后，以磷酸鹽緩沖液和含山羊血清與酪蛋白的吐溫20進(jìn)行阻斷。用單抗TSVMAb1A1進(jìn)行斑點酶免疫反應(yīng)。

其他抗體檢測方法：包括利用TSV MAb1A1單克隆抗體的間接熒光抗體法（IFAT）和免疫組化法（IHC）等。這些方法適用于組織印片、冰凍切片和脫蠟的固定組織樣品及Davidson'sAFA固定的組織樣品中的病毒檢測。

③分子檢測技術(shù)：目前已開發(fā)有原位雜交實驗（ISH）、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（real-timequantitativeRT-PCR）等方法。原位雜交實驗是采用非放射性的以地高辛標(biāo)記的eDNA探針進(jìn)行，敏感性高于傳統(tǒng)的病理組織學(xué)診斷方法。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法適用于對蝦的各生活期、非對蝦的生物和底泥等樣品中TSV帶毒情況的定性檢測，以進(jìn)行病原篩查和疾病的確診，但該法單獨使用時不適用于對病毒量、存在狀態(tài)（玷污、攜帶和感染狀態(tài)）或感染活性等的估測以及宿主感染程度的評估。實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法具快速、特異和敏感優(yōu)點，對TSV基因組目標(biāo)序列檢測靈敏度大約為100個拷貝。

【防治方法】

（1）預(yù)防進(jìn)行水體消毒，每10～15天（特別是在進(jìn)水、換水后）應(yīng)及時用漂白粉等含氯消毒劑消毒。調(diào)控水質(zhì)，保持整蝦池水質(zhì)平衡及穩(wěn)定。蝦池pH一般維持在8.0～8.8，氨氮0.5mg/L以下，透明度維持在30～60cm。在養(yǎng)殖過程中，定期使用水質(zhì)及底質(zhì)改良劑，改良養(yǎng)殖池底質(zhì)。特別是在養(yǎng)殖中后期，應(yīng)用光合細(xì)菌、硝化細(xì)菌等微生態(tài)制劑的改良劑進(jìn)行水質(zhì)和底質(zhì)改良。配合使用維生素、聚維酮碘等進(jìn)行預(yù)防。也可以在飼料中添加生物活性物質(zhì)或免疫促進(jìn)劑，增強蝦體非特異性免疫功能。

（2）控制可通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病的暴發(fā)。對苗種場、良種場應(yīng)實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度；加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握其流行情況。

（3）處理TSV檢疫陽性結(jié)果的親蝦和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

3.黃頭病

對蝦傳染性疾病。該病急性感染的對蝦在染病2～4天時即出現(xiàn)停食等癥狀，死亡率高。瀕死蝦頭胸部因肝胰腺發(fā)黃而變成黃色，因此稱之為黃頭病。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動物疫病。OIE將其列為必須申報的疾病。

【病原體】黃頭病毒（Yellow head virus，YHV）。

【流行與危害】黃頭病最先（1990）在泰國東部和中部地區(qū)的養(yǎng)殖斑節(jié)對蝦中出現(xiàn)，隨后在印度、中國、馬來西亞、印度尼西亞、菲律賓、越南等亞洲地區(qū)和美洲國家流行和蔓延。自然或人工感染狀態(tài)下，可感染斑節(jié)對蝦、食用對蝦、日本囊對蝦、墨吉對蝦、凡納濱對蝦、細(xì)角對蝦、白對蝦、褐對蝦、桃紅對蝦、刀額新對蝦、綠尾新對蝦等多個對蝦品種。斑節(jié)對蝦為主要受感染者，可能是黃頭病毒的自然宿主。自然狀態(tài)下黃頭病毒還可感染日本囊對蝦、墨吉對蝦、白對蝦，試驗感染條件下感染斑節(jié)對蝦、凡納濱對蝦、細(xì)角對蝦、褐對蝦、桃紅對蝦、白對蝦，引起較高死亡率。該病嚴(yán)重影響?zhàn)B殖約50～70d的對蝦，感染后3～5天內(nèi)發(fā)病率高達(dá)100%，死亡率達(dá)80%～90%。

水平傳播是該病病原的主要傳播方式。鳥類也是傳播媒介之一，海鷗等鳥類攝食患病對蝦，然后通過排泄物將病毒傳播到鄰近的池塘中去。

【癥狀及病理變化】黃頭病能引起對蝦迅速大量死亡，常見患病蝦攝食量先增大然后突然停止，一般2～4天內(nèi)就會出現(xiàn)頭胸部發(fā)黃和全身發(fā)白的臨床癥狀。許多瀕死蝦聚集在池塘角落的水面，肝胰腺比正常蝦軟且發(fā)黃，與健康蝦肝胰腺的褐色有明顯區(qū)別。

黃頭病毒主要侵染外胚層和中胚層起源的組織器官，可感染血淋巴、造血組織、鰓瓣、皮下結(jié)締組織、腸、觸角腺、生殖腺、神經(jīng)束、神經(jīng)節(jié)等，出現(xiàn)全身性細(xì)胞壞死。組織壓片可觀察到中度到大量球形強嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體；血淋巴涂片可觀察到中度到大量血細(xì)胞發(fā)生核固縮和破裂；組織切片可觀察到壞死區(qū)域有球形強嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體，直徑為2μm或稍小，胃皮下組織和鰓是觀察特征性包涵體的最佳部位。

【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需通過實驗室檢查。

（l）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對蝦幼體、仔蝦取完整個體，幼蝦和成蝦取蝦的頭胸部，非對蝦的甲殼類動物參照對蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。

樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第l部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（2）組織及病理學(xué)檢查

① 組織壓片的快速染色法：取瀕死蝦鰓絲或表皮用Meyer's HE染色，觀察細(xì)胞內(nèi)球形強嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。該方法適用于對蝦活體中的黃頭病毒檢測，但不適于非感染性病毒攜帶樣品的診斷及對宿主進(jìn)行組織病理學(xué)評價。

② 組織病理學(xué)診斷：HE染色后觀察各種不同組織的病理變化和強嗜堿性細(xì)胞質(zhì)包涵體。本法適用于對蝦感染黃頭病毒初步診斷或未知疾病樣品組織病理學(xué)評價，不適于非感染性病毒攜帶樣品的檢測。

③ 電鏡診斷：可對病蝦鰓、淋巴器官等的病毒粒子觀察和確診。

（3）病原學(xué)鑒定

① 原位雜交法：用YHV特異性的地高辛標(biāo)記的cDNA探針進(jìn)行，敏感性比病理組織學(xué)診斷法高，適用于黃頭病毒敏感宿主的感染程度及病毒擴增狀況的評估和疾病確診。

② RT-PCR檢測法：通過RT-PCR檢測YHV的特定基因。適用于對蝦各個生活期及其他生物或底泥等樣品的黃頭病毒情況進(jìn)行定性檢測，也適合于病原篩查和疾病確診。

④ 免疫檢測技術(shù)：通過制備的抗黃頭病毒特異性抗體來檢測病毒?？扇』钗r血淋巴，采用Western blot、ELISA或免疫熒光等方法鑒定樣品是否有黃頭病毒感染，從而進(jìn)行確診。

【防治方法】

（l）預(yù)防對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。

（2）控制苗種繁殖場內(nèi)YHV檢疫陽性的親蝦和苗種應(yīng)全部撲殺；病毒陽性的種用和商品養(yǎng)殖蝦必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

4.羅氏沼蝦白尾病

又稱羅氏沼蝦肌肉白濁病，是一種急性病毒性疾病，主要危害羅氏沼蝦苗種，以急性死亡、病蝦肌肉呈白斑或白濁狀為特征。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動物疫病。OIE將其列為必須申報的疾病。

【病原體】羅氏沼蝦野田村病毒（Macrobrachium rosenbergiinodavirus，MrNV）及其衛(wèi)星病毒-超小病毒（Extra small virus，XSV）。

【流行與危害】本病最先在泰國被發(fā)現(xiàn)，隨后出現(xiàn)于中國及圭亞那。目前該病已在中國、泰國、印度、越南、緬甸、澳大利亞、加勒比海地區(qū)（法屬圭亞那等）等國家和地區(qū)發(fā)生并流行。浙江省近年采用無野田村病毒苗種培育技術(shù)，自2005年以來未檢出病毒。

羅氏沼蝦是病毒主要的易感宿主，日本沼蝦、秀麗白蝦、克氏原螯蝦等養(yǎng)殖品種未發(fā)現(xiàn)發(fā)生羅氏沼蝦野田村病毒的感染。病毒主要感染羅氏沼蝦蝦苗，淡化后3天至3周是疾病高發(fā)時期，嚴(yán)重時死亡率可高達(dá)90%以上，目前沒有有效控制措施。發(fā)病后部分苗種可存活并長至商品規(guī)格的成蝦，但有發(fā)病史的蝦可攜帶病毒，造成子代蝦苗的發(fā)病。成蝦及親蝦可查出病毒，但未發(fā)現(xiàn)MrNV感染引起的大規(guī)模流行。

病毒可通過水平和垂直傳播感染，其中帶毒種蝦垂直傳播是引起我國蝦苗發(fā)病的重要原因；帶病毒水體、餌料、工具、未徹底消毒的育苗池等均可傳播病毒；有學(xué)者報道帶病毒的輪蟲等生物餌料也可傳播疾病。

蝦苗池缺氧、水質(zhì)不良及營養(yǎng)因素等也可引起蝦體肌肉白濁，但這類白濁分布于整個腹部，無分散的白濁斑點，改用水質(zhì)良好的水后蝦苗的白濁可消退；病毒感染引起的白濁不能消退并可在蝦群中迅速傳播。

【癥狀及病理變化】發(fā)病蝦苗先在腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊，而后逐漸向其他部位擴展，最后除頭胸部外，全身肌肉呈乳白色。蝦甲殼不出現(xiàn)白斑，這一點可區(qū)別于對蝦白斑綜合征。

發(fā)病蝦苗腹部肌纖維、肝胰腺、血細(xì)胞、心臟和鰓組織胞漿內(nèi)可觀察到嗜堿性包涵體；超微病理觀察可發(fā)現(xiàn)肌纖維間線粒體腫脹、變形，肌質(zhì)網(wǎng)變性、壞死和空泡化，表明細(xì)胞處于缺氧和鈣代謝紊亂狀態(tài)；肌細(xì)胞包涵體內(nèi)存在大量晶格排列、無囊膜、大小為26納米的球狀病毒顆粒。用病毒核酸探針或抗MrNV單抗進(jìn)行免疫酶染色，可發(fā)現(xiàn)肌肉及組織間隙細(xì)胞內(nèi)存在大量病毒顆粒。

【診斷方法】

（1）初步診斷可根據(jù)蝦苗腹部出現(xiàn)白色或乳白色混濁塊、肌肉白濁、個別蝦苗腹部存在分散的白濁點，排除水質(zhì)因素引起的肌肉白濁后作出初步診斷。應(yīng)與對蝦傳染性肌肉壞死病相區(qū)別。

（2）樣品采集發(fā)病蝦苗應(yīng)采集150尾以上，正常蝦500尾以上，取完整個體，用于病毒核酸提取或ELISA測定；種蝦應(yīng)采集病蝦10尾，用于病毒測定。

（3）組織和病理學(xué)檢查典型病例切片經(jīng)HE染色后，可發(fā)現(xiàn)嗜酸性包涵體，為本病重要特征，但此方法費時，且觀察難度較大，診斷意義不大。

（4）實驗室診斷和病原學(xué)鑒定

①RT-PCR檢測法：用MrNV特異性的引物進(jìn)行RT-PCR檢測，適用于對蝦各種樣品、環(huán)境生物和餌料生物的各種樣品以及其他非生物樣品中MrNV的定性檢測，具有高靈敏度和高特異性，適用于病原篩查和疾病確診。

②三抗體夾心ELISA法：其過程是先用兔抗MrNV抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，然后加入待測樣品、陽性及陰性對照，通過預(yù)包被抗體捕捉待測樣品中的MrNV，再加入小鼠抗MrNV單抗，洗脫后最后加入抗小鼠單抗的酶標(biāo)抗體，然后進(jìn)行顯色，有病毒的樣品可顯示較深的顏色。

【防治方法】

（1）預(yù)防對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。并加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過培育或引進(jìn)抗病品種，提高抗病能力。加強飼養(yǎng)管理，降低發(fā)病幾率。在疾病發(fā)生流行時，未發(fā)病苗種場可采用嚴(yán)格消毒、控制外來人員進(jìn)入苗種生產(chǎn)車間等辦法，防止疾病的傳播。使用抗病毒藥及微生物制劑可延緩疾病過程，減少死亡，但養(yǎng)成的成蝦可能攜帶病毒。

（2）控制病毒檢出陽性的苗種場應(yīng)停止生產(chǎn)，繁殖場親蝦和苗種檢疫陽性的全部撲殺，并按有關(guān)規(guī)定對發(fā)病養(yǎng)殖區(qū)、用具和種蝦作無害化處理；檢疫陽性蝦禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料。

5.對蝦桿狀病毒病

對蝦桿狀病毒病是威脅對蝦幼體、仔蝦和幼蝦階段的疾病。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動物疫病。

【病原體】對蝦桿狀病毒（Baculovirus penaei）。

【流行與危害】該病毒主要感染西半球的養(yǎng)殖及野生對蝦。目前已發(fā)現(xiàn)3個地方株，分別分布在東南大西洋、美國、墨西哥沿岸和加勒比海、美國南、中北部太平洋沿岸及夏威夷。該病毒宿主廣泛，可感染濱對蝦屬、美對蝦屬、明對蝦屬和溝對蝦屬等在內(nèi)的所有對蝦品種，以幼體、仔蝦和早期幼蝦對病毒最為敏感。病毒主要經(jīng)對蝦相互殘食以及糞-口途徑經(jīng)口傳播。親蝦產(chǎn)卵時排泄帶毒糞便也可使病毒傳給下一代種群。試驗表明輪蟲和鹵蟲可將該病毒傳給對蝦幼體。

【癥狀及病理變化】病蝦嗜睡厭食，體色呈藍(lán)灰色或藍(lán)黑色，胃附近白濁化，浮頭，停滯岸邊，鰓和體表有固著類纖毛蟲、絲狀細(xì)菌、附生硅藻等生物附著，容易并發(fā)褐斑病等細(xì)菌性疾病，最終側(cè)臥于池底死亡。解剖后可發(fā)現(xiàn)肝胰腺腫大、軟化、發(fā)炎或萎縮硬化，腸道發(fā)炎等。

病毒主要侵害肝胰腺腺管、中腸等上皮細(xì)胞。感染病毒后可在肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞中形成細(xì)胞核內(nèi)核型多角包涵體，少量包涵體也可在糞便中游離存在。肝胰腺和中腸上皮細(xì)胞核內(nèi)存在數(shù)量不等的金字塔狀包涵體，包涵體為具有明顯折射性的四面體，高度約20μm。受感染的對蝦肝胰腺小管和前中腸的上皮細(xì)胞的細(xì)胞核肥大，核內(nèi)有1個至幾個角錐形包涵體。核仁被擠到一邊，并退化或消失，染色質(zhì)分布于核的邊緣，呈環(huán)狀排列。

【診斷方法】根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可以做出初步診斷，確診需進(jìn)行實驗室診斷。診斷時應(yīng)注意與斑節(jié)對蝦桿狀病毒病相區(qū)別。

（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對蝦幼體取完整個體，仔蝦取頭胸部，幼蝦和成蝦取小塊肝胰腺或小截中腸組織。糞便樣品采集：將幼蝦或成蝦暫養(yǎng)于水族箱中，待數(shù)小時直至水族箱底部出現(xiàn)糞便，用干凈的塑料虹吸管吸取排泄物，注入玻璃試管中。

樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒病診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（2）診斷方法

① 壓片顯微鏡檢查法：取病蝦肝胰腺和中腸進(jìn)行濕片壓片，顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)角錐形包涵體基本可診斷。結(jié)果可疑時根據(jù)組織病理或PCR結(jié)果確認(rèn)。

②組織病理學(xué)診斷法：觀察組織切片經(jīng)H＆ E染色后細(xì)胞核內(nèi)角錐形包涵體。適用于對蝦感染對蝦桿狀病毒情況的初步診斷或未知疾病樣品的組織病理學(xué)評價，不適用于非感染性攜帶病毒的樣品檢測。

③透射電鏡診斷法：制備病蝦中腸腺超薄切片，透射電鏡檢查包涵體和核質(zhì)中有無許多桿狀病毒顆粒，從而確診。

④原位雜交法：采用地高辛標(biāo)記eDNA探針進(jìn)行病毒檢測，敏感性高于病理組織診斷法，適用于對蝦桿狀病毒敏感宿主組織細(xì)胞的感染程度及病毒擴增狀況的評估和疾病的確診。

⑤PCR檢測法：通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，檢測病毒特定基因。適用于大量樣品的病毒篩查和疾病確診，可檢測對蝦活體、糞便、冰凍和冰鮮蝦產(chǎn)品的對蝦桿狀病毒的篩查和疾病診斷，但單獨使用不能對病毒劑量、感染活性及宿主感染程度作出評估。

【防治方法】

（1）預(yù)防對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。加強親蝦及幼體的檢疫，及時銷毀受病毒污染的對蝦，染疫場的池塘、用具徹底消毒。改善水質(zhì)和采取合理的養(yǎng)殖密度，可降低本病的發(fā)生。

（2）控制繁殖場親蝦和苗種檢疫陽性的全部捕殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽性的必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作餌料使用。

6.傳染性皮下和造血器官壞死病

對蝦的一種傳染性疾病，主要感染細(xì)角對蝦和凡納濱對蝦。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動物疫病。OIE將其列為必須申報的疾病。

【病原體】傳染性皮下和造血組織壞死病毒 （infctioushypodernmm and haematopoietic necrosis virus，IHHNV），又名“細(xì)角對蝦濃核病毒”（Penaeus stylirostris densovirus，PstDNV）。

【流行與危害】IHHNV可感染世界各地的養(yǎng)殖對蝦，主要感染太平洋東部沿岸野生對蝦、太平洋島嶼（包括夏威夷群島、法屬波利尼西亞、關(guān)島和新卡里多尼亞）的養(yǎng)殖對蝦。近年來在東南亞和中東地區(qū)的養(yǎng)殖和野生對蝦中存在該病的流行，該病在我國也有較高的發(fā)病率。細(xì)角對蝦、凡納濱對蝦、斑節(jié)對蝦等大部分對蝦品種都可被感染，細(xì)角對蝦死亡率可達(dá)90%以上，稚蝦受危害最為嚴(yán)重。該病毒主要通過帶毒蝦及其他甲殼類受病毒污染水體傳播，蝦類同類殘食或海鳥也可傳播病毒。發(fā)病后存活的對蝦仍帶毒，可以通過垂直傳播方式傳播該病。

【癥狀及病理變化】細(xì)角對蝦的稚蝦患急性傳染性皮下和造血組織壞死病后，攝食量明顯減少，繼而出現(xiàn)行為及外觀異常。患病對蝦可緩緩上升到水面，靜止不動，然后翻轉(zhuǎn)后腹部向上并緩慢沉到水底，這種行為可反復(fù)進(jìn)行并持續(xù)數(shù)小時，直到無力繼續(xù)下去或被其他蝦吞食。此感染期的細(xì)角對蝦表皮上皮層（尤其是腹部背板接合處）常出現(xiàn)白色或淺黃色斑點，使整個蝦體呈現(xiàn)斑駁的外觀。在瀕死的細(xì)角對蝦中，這些斑點會有所褪色，導(dǎo)致蝦體色偏藍(lán)。在感染的末期，細(xì)角對蝦和斑節(jié)對蝦瀕死時體色明顯變藍(lán)，腹部肌肉不透明。

在凡納濱對蝦中，由IHHNV引起的“傳染性皮下和造血組織壞死病”存在一種慢性表現(xiàn)形式，即“矮小殘缺綜合征（runt-deformity syndrome，RDS）”。RDS病蝦生長緩慢、體型畸形，患病稚蝦還出現(xiàn)額角彎曲、變形、觸角鞭毛皺起、表皮粗糙或殘缺。患RDS的凡納濱對蝦稚蝦群體中，體長普遍偏小，且個體之間體長差異很大?？捎皿w長變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）來評估凡納濱對蝦和細(xì)角對蝦稚蝦群體是否患有RDS：RDS群體的CV值多大于30%，甚至達(dá)到90%；而未患病群體的。CV值通常為10%～30%。

在組織病理學(xué)方面，IHHNV主要感染起源于外胚層和中胚層的組織細(xì)胞，主要有表皮、前腸和后腸上皮、性腺、淋巴器官和結(jié)締組織細(xì)胞，基本不感染肝胰腺細(xì)胞。靶組織細(xì)胞核內(nèi)可觀察到嗜酸性包涵體，即典型的考德里A型（Cowdry type A）包涵體。

【診斷方法】在本病嚴(yán)重暴發(fā)流行時，可根發(fā)病史、臨床特征及病理特征做出初步診斷，確診需要通過實驗室檢查。

（1）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對蝦幼體、仔蝦取完整個體，幼蝦和成蝦取頭胸部，非對蝦的甲殼類動物參照對蝦的方法取樣。非生物樣品取0.1～0.5g。

樣品采集的要求參照SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（2）組織及病理學(xué)檢查

① 組織病理診斷法：組織切片經(jīng)HE染色后，觀察細(xì)胞核內(nèi)是否存在Cowdry A型包涵體，從而進(jìn)行診斷。該方法適用于有癥狀對蝦的初步診斷或未知樣品的組織病理學(xué)評價，不適用于無癥狀帶病毒標(biāo)本的病毒檢測。

② 電鏡診斷：通過超薄切片，觀察靶組織細(xì)胞核內(nèi)有無IHHNV病毒粒子進(jìn)行確診。

（3）病原學(xué)鑒定

① 分子雜交技術(shù)：采用地高辛標(biāo)記的IHHNV eDNA探針進(jìn)行病毒檢測，靈敏度高于病理組織診斷法。適用于成蝦、幼蝦、仔蝦、幼體和受精卵活體、冰鮮或冰凍產(chǎn)品和其他甲殼類動物的病毒篩查、有臨床病癥病蝦的確診。

② PCR檢測法：通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測IHHNV特定基因。適用于各種對蝦樣品、環(huán)境生物和餌料生物樣品以及其他各種非生物樣品的IHHNV帶毒的高靈敏度定性檢測。

【防治方法】

（1）預(yù)防對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。有效的預(yù)防措施主要是加強對蝦、特別是進(jìn)口對蝦的檢疫，并銷毀染疫對蝦，對發(fā)病蝦場及其設(shè)施要進(jìn)行徹底消毒。用SPF親蝦進(jìn)行繁育。

（2）控制繁殖場親蝦和苗種檢疫陽性的全部撲殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽性的必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

7.斑節(jié)對蝦桿狀病毒病（MBVD）

一種對蝦病毒性傳染病，嚴(yán)重威脅對蝦幼體、仔蝦和幼蝦的健康。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為三類動物疫病。

【病原體】斑節(jié)對蝦桿狀病毒（Penaeus monodon-type baeulovirus，MBV）。

【流行與危害】斑節(jié)對蝦桿狀病毒病在東亞、東南亞、印度次大陸、中東、澳大利亞、印度尼西亞、東非、馬達(dá)加斯加養(yǎng)殖和野生蝦中廣泛分布，隨著斑節(jié)對蝦的引進(jìn)，病毒也傳人地中海、西非、塔希提島和夏威夷，還有南、北美洲和加勒比海的一些養(yǎng)殖地區(qū)。

斑節(jié)對蝦桿狀病毒可感染對蝦屬、明對蝦屬、囊對蝦屬和溝對蝦屬的多種對蝦。除了卵和無節(jié)幼體階段都可被該病毒感染。野生蝦帶毒率較低，病毒分布地區(qū)流行和感染都比較嚴(yán)重，幼蝦和成蝦攜帶病毒高達(dá)50％～100％。是宿主蝦的幼體、仔蝦和早期幼蝦的潛在嚴(yán)重病原。

相互殘食和糞一口途徑的經(jīng)口傳播為該病的主要的傳播方式。親蝦產(chǎn)卵時排泄被病毒污染的糞便，而使病毒傳給下一代種群。

【癥狀及病理變化】受感染后的幼體除體色加深外，并無特別的癥狀，多數(shù)攜帶病毒的蝦活動正常。幼體群常無明顯癥狀出現(xiàn)而大量死亡。死亡率與養(yǎng)殖環(huán)境有關(guān)，一般在20％ ～90％。感染嚴(yán)重的病蝦往往活力降低、食欲下降、體色較深，鰓和體表有固著類纖毛蟲、絲狀細(xì)菌、附生硅藻等生物附著。

MBV侵害的對蝦組織是肝胰腺腺管和中腸的上皮細(xì)胞，顯微鏡下可觀察到受感染的對蝦肝胰腺或中腸的上皮細(xì)胞核腫大，核內(nèi)有單個或多個折射率高的球形包涵體，單個包涵體直徑約為0.1～2.0μm。受感染的對蝦糞便壓片可觀察到帶折光性的近似球形的包涵體，大小約20μm，在新鮮糞便中，病毒包涵體常成團(tuán)聚集，并被核膜包裹著。組織病理觀察感染MBV的對蝦肝胰腺細(xì)胞的細(xì)胞核明顯肥大，內(nèi)有單個或多個近球形的核型多角體型包涵體，使染色質(zhì)減少并向邊緣遷移。在中腸上皮細(xì)胞中也偶爾可看到類似的現(xiàn)象，包涵體呈亮紅色。肝胰腺細(xì)胞受感染的比率越大，說明病毒感染程度越重。

【診斷方法】

（1）初步診斷根據(jù)流行病學(xué)、臨床特征和病理特征可作出初步診斷，確診需進(jìn)行實驗室診斷。診斷時應(yīng)注意與對蝦桿狀病毒病相區(qū)別。

（2）樣品采集采集病蝦10尾、健康蝦150尾，按不同的大小或感染期取不同組織樣品。其中，對蝦幼體取完整個體，仔蝦取頭胸部，幼蝦和成蝦取小塊肝胰腺或小截中腸組織。糞便樣品采集：將幼蝦或成蝦暫養(yǎng)于水族箱中，待數(shù)小時直至水族箱底部出現(xiàn)糞便，用干凈的塑料虹吸管吸取排泄物，注入玻璃試管中。

樣品采集的要求按SC/T 7202.1-2007《斑節(jié)對蝦桿狀病毒診斷規(guī)程第1部分：壓片顯微鏡檢查法》附錄B的規(guī)定或者按照OIE《水生動物疾病診斷手冊》中的列表要求采樣。

（3）組織和病理學(xué)檢查

①壓片顯微鏡檢查法：通過光學(xué)顯微鏡觀察新鮮組織樣品或糞便中近球形的MBV核型多角體形成的情況進(jìn)行初步判斷。適用于對蝦活體及其糞便中的MBV非致死性的疾病篩查和診斷，不適于對病毒的非感染性攜帶的標(biāo)本進(jìn)行診斷以及對宿主進(jìn)行組織病理學(xué)評價。

②組織病理學(xué)診斷法：觀察經(jīng)HE染色后細(xì)胞核內(nèi)單個或多個近球形的核型多角體形成的情況進(jìn)行判斷。適用于對蝦感染情況的確診或未知疾病樣品的組織病理學(xué)評價。不適于對病毒的非感染性攜帶的標(biāo)本進(jìn)行病毒檢測。

（4）病原學(xué)鑒定

①原位雜交法：采用非放射性的以地高辛標(biāo)記的cDNA探針進(jìn)行，敏感性高于傳統(tǒng)的病理組織學(xué)診斷法。適用于進(jìn)行MBV敏感宿主組織細(xì)胞的感染程度及病毒擴增狀況的評估和疾病的確診。

②PCR檢測法：通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，檢測特定基因。適用于進(jìn)行病原篩查和疾病的確診。其中核型多角體基因保守序列法僅適用于對蝦，包括對蝦活體、糞便以及冰凍和冰鮮蝦產(chǎn)品的病毒篩查和疾病的初步診斷。單獨使用時不適于對病毒量或感染活性的估測以及宿主感染程度的評估。

【防治方法】

（1）預(yù)防對苗種場、良種場實施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。加強疫病監(jiān)測與檢疫，掌握流行病學(xué)情況。通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病。加強親蝦及幼體的檢疫，銷毀染疫對蝦。為避免親蝦的糞便、受污染卵將病毒傳給下一代，在孵化場可采用福爾馬林、碘伏和干凈的海水徹底清洗無節(jié)幼體和卵，孵化場應(yīng)相對獨立，具有良好的隔離設(shè)施，防止病毒在孵化場內(nèi)的傳播。

（2）控制繁殖場親蝦和苗種檢疫陽性的全部撲殺；種用和商品養(yǎng)殖蝦檢疫陽性的必須進(jìn)行無害化處理，禁止用于繁殖育苗、放流或直接作為水產(chǎn)餌料使用。

8.肝胰臟細(xì)小病毒狀病毒病

【病原體】肝胰腺細(xì)小病毒狀病毒（Hepatopancreatic parvovirus，HPV）。

【流行與危害】首先發(fā)現(xiàn)在新加坡和馬來西亞養(yǎng)殖的墨吉對蝦內(nèi)，以后又發(fā)現(xiàn)在野生的和養(yǎng)殖的中國明對蝦、波斯灣的短溝對蝦、菲律賓的斑節(jié)對蝦和澳大利亞的食用對蝦。在流行病發(fā)生后4～8周內(nèi)，墨吉對蝦的累積死亡率為50％，短溝對蝦的死亡率則高達(dá)100％，并常發(fā)生弧菌病的繼發(fā)性感染。在中國明對蝦上的致病性尚不十分明顯。受感染的種群在人為的擁擠條件下會加重病情。

【癥狀及病理變化】病蝦無特有癥狀，只是食欲不振，行動不活潑，生長緩慢，體表附著物多，偶然發(fā)現(xiàn)尾部肌肉變白。幼蝦出現(xiàn)這些癥狀后很快就死亡，有時有繼發(fā)性細(xì)菌或真菌感染。

主要的病理變化是肝胰腺壞死和萎縮。肝胰管上皮細(xì)胞的細(xì)胞核過度肥大。核內(nèi)有一個大而顯著的包涵體。這種包涵體為嗜堿性，PAS陰性，弗爾根陽性，近于圓形或橢圓形，在光學(xué)顯微鏡下就可看到。在中國明對蝦仔蝦的前中腸上皮細(xì)胞肥大的核中，也發(fā)現(xiàn)有正在發(fā)育的嗜伊紅的包涵體，但較為少見，沒有發(fā)現(xiàn)充分發(fā)育的嗜堿性包涵體。正在發(fā)育的包涵體，是由電子密度很細(xì)微的顆粒物質(zhì)（即病毒基因基質(zhì)）和病毒粒子組成。

【診斷方法】初步診斷可取病蝦的肝胰腺，用FAA液或包氏液固定，HE染色，檢查出明顯的嗜伊紅，弗爾根染色陽性的核內(nèi)包涵體，核仁被擠到一邊，染色質(zhì)分布在核的周邊。確診須用透射電鏡觀察核內(nèi)包涵體中的病毒粒子。

【防治方法】

（1）嚴(yán)格檢疫，杜絕病原從親蝦或苗種帶入。

（2）使用無病毒污染或經(jīng)過過濾、消毒的海水。

（3）養(yǎng)殖蝦池應(yīng)徹底清淤消毒。

（4）投放健壯苗種或經(jīng)消毒處理的蝦苗。

（5）大池改小池，淺水改深水，合理密養(yǎng)，設(shè)立增氧機。

（6）投喂優(yōu)質(zhì)配合飼料，或添加免疫多糖類和提高抗病力的中草藥。

（7）穩(wěn)定蝦池理化因子和藻相，投放環(huán)境保護(hù)劑和有益細(xì)菌或活性生物制劑。

（8）早晚巡池，發(fā)現(xiàn)異常不亂用藥或濫用藥，應(yīng)取樣檢查，要在準(zhǔn)確診斷的基礎(chǔ)上對癥或?qū)σ蛴盟?，防止?xì)菌繼發(fā)感染等，實施全面健康的養(yǎng)殖管理。

9.日本對蝦中腸腺壞死桿狀病毒病

【病原體】中腸腺壞死桿狀病毒（Baculoviral midgut gland necrosis type viruses，BMNV）。一種C型桿狀病毒，病毒粒子大小為72納米×310納米，具雙層被膜。

【流行與危害】中腸腺壞死桿狀病毒病只侵害日本囊對蝦。在日本南部的孵化場中，每年5-9月常發(fā)生中腸腺壞死桿狀病毒病造成大批死亡。生病的仔蝦主要為P2-P12。生病時的水溫為19～29.5℃，pH為7.8～8.8。不患此病的仔蝦死亡率一般為30％以下，患此病者死亡率一般為70％～100％。在巴西和夏威夷養(yǎng)殖的日本囊對蝦也發(fā)生此病。

【癥狀及病理變化】中腸腺壞死桿狀病毒病病毒主要侵害日本囊對蝦的仔蝦。仔蝦的肝胰腺“白濁”，即混濁不透明變白色，這是最容易看到的癥狀。隨著病情的發(fā)展，白濁的程度越來越明顯。嚴(yán)重受害的仔蝦（長度為6～9mm）從癥狀上很容易區(qū)別。病蝦缺乏活力，漂浮在水面。發(fā)作突然，死亡率高。

【診斷方法】初步診斷可根據(jù)病蝦的外觀癥狀，以及日本囊對蝦的糠蝦幼體特別是仔蝦的突然發(fā)病和死亡率很高的情況。確診可用病蝦肝胰腺切片或壓片，HE染色后，在光學(xué)顯微鏡下看到肥大的細(xì)胞核而沒有包涵體，或用電子顯微鏡觀察超薄切片，看到病毒粒子。熒光抗體診斷技術(shù)，可以快速診斷，并可發(fā)現(xiàn)癥狀不明顯的帶病毒者。

【防治方法】

（1）引進(jìn)日本囊對蝦時應(yīng)嚴(yán)格檢疫，不從BMNV的發(fā)病地區(qū)引進(jìn)對蝦。

（2）受精卵用聚維酮碘溶液進(jìn)行藥浴5～10分鐘。

（3）孵化設(shè)施及用水要消毒處理。