草魚出血病防治的研究進(jìn)展

草魚出血病防治的研究進(jìn)展

徐東日 吳蘇敏 胡文娟 李蓮芳

(江西省水產(chǎn)科學(xué)研究所，江西南昌 330039)

草魚(Ctenopharyngodon idellu s C et V)因其生長迅速，飼料來源廣，是中國淡水養(yǎng)殖的“四大家魚”之一，其產(chǎn)量約占淡水養(yǎng)殖總產(chǎn)量的20%。草魚出血病1970年首先在湖北黃破縣攝口水產(chǎn)養(yǎng)殖場發(fā)現(xiàn)，流行于湖北、廣東、廣西、江西、江蘇、浙江、福建、上海、河南、河北、四川等省、市、自治區(qū)的主要養(yǎng)殖地區(qū)，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的損失［1］，因此草魚出血病的防治成為我國水產(chǎn)研究中的一個(gè)重要課題。

1 草魚出血病的流行病學(xué)

1.1 草魚出血病的發(fā)病時(shí)間

根據(jù)病毒的形態(tài)和理化特性，將其定名為草魚呼腸孤病毒(Reovirus of grass carp GCRV)，該病毒隸屬水生呼腸孤病毒屬(Aquareoviridae)，是中國分離的第一種魚類病毒。人工感染健康草魚，從感染到發(fā)病死亡約需4～15 d，一般7～10 d，其病程有潛伏期、前趨期和發(fā)展期3個(gè)階段。水溫25～30℃時(shí)最為流行，死亡率高，高密度飼養(yǎng)的魚種池危害更甚，常發(fā)生患病的草魚全軍覆沒。

陳艷［2］對天津、江西、廣西、安徽、福建、重慶等省、市、自治區(qū)進(jìn)行了為期兩年的監(jiān)測，結(jié)果表明，平均死亡率的峰值在一年中發(fā)生二次，分布于七月和九月，同文獻(xiàn)曾報(bào)道的六月下旬和九月中旬時(shí)間基本吻合。同一種疾病的流行特征在不同的地區(qū)雖有共同之處，但由于受自然因素等影響，又往往有其各自的特點(diǎn)，單獨(dú)拿出任何一個(gè)省可能并不符合這個(gè)規(guī)律。同時(shí)，同地方的同一疾病，其在不同年代的流行強(qiáng)度、流行特征也不完全相同。因此，還需要各地根據(jù)自己地方的特點(diǎn)，總結(jié)出各地的規(guī)律。

1.2 草魚出血病的發(fā)病癥狀

病魚的主要癥狀是口腔、上下頜、頭頂部、眼眶周圍、鰓蓋、鰓及鰭條基部充血，有時(shí)眼球突出;剝除魚的皮膚，可見肌肉呈點(diǎn)狀或塊狀充血、出血，嚴(yán)重時(shí)全身肌肉呈鮮紅色;腸壁充血，但仍有韌性，腸內(nèi)無食物;腸系膜、周圍脂肪、鰾、膽囊、肝、脾、腎也有出血點(diǎn)或血絲，故以癥狀定名為草魚出血癥。

根據(jù)出血部位的不同可將該病的癥狀分為3種類型:一是紅肌肉型，病魚體表無明顯的出血癥狀或僅表現(xiàn)輕微點(diǎn)狀出血，但肌肉明顯充血，往往全身肌肉均呈紅色，同時(shí)鰓絲鰓瓣失血嚴(yán)重，出現(xiàn)“白鰓”，有時(shí)伴有腹水，腸道無食物、充血不糜爛，具有光澤，一般在較小的草魚種中比較常見。二是紅鰭紅鰓蓋型，病魚的鰓蓋、鰭基、頭頂、口腔、眼眶等處明顯充血，有時(shí)鱗片下也有充血現(xiàn)象或塊狀出血，但肌肉充血不明顯或局部點(diǎn)狀出血，一般在較大以上的草魚種中比較多見。三是腸炎型，病魚體表及肌肉的充血現(xiàn)象均不太明顯，但腸道嚴(yán)重充血，腸道全部或部分呈鮮紅色，腸系膜、脂肪、鰾壁有時(shí)有點(diǎn)狀充血，各種規(guī)格的草魚種中都可遇見。這三種類型的癥狀，不能截然分開，很多是三種癥狀同時(shí)出現(xiàn)，混雜在一起。

2 草魚出血病的一般發(fā)病環(huán)境

草魚出血病的一般發(fā)病環(huán)境為:

(1)池塘老化，淤泥較多，病原微生物較多，同時(shí)殘?jiān)ｐD較多，導(dǎo)致水質(zhì)惡化。

(2)魚種下塘前沒有消毒處理，魚體帶有致病菌。

(3)在出現(xiàn)赤皮、爛鰓等細(xì)菌性疾病時(shí)沒有給予足夠重視，致使病情惡化。

3 草魚出血病防治的研究進(jìn)展

3.1 草魚出血病的疫苗防治研究

草魚出血病是一種病毒性魚病，危害很大，感染此病后，當(dāng)年草魚死亡率一般為30%～50%，最高可達(dá)60%～80%。而免疫預(yù)防是該病最有效的防治方法之一。因此疫苗研制對該病的防治意義重大［3］。有研究表明，防治草魚出血病疫苗之一的“草魚凍干細(xì)胞弱毒疫苗”，預(yù)防草魚出血病的發(fā)生效果明顯，免疫保護(hù)率達(dá)95%以上，且免疫產(chǎn)生期快，免疫期長，使用安全，無副作用。草魚免疫后的第二天開始產(chǎn)生免疫力，第七天達(dá)到高峰。經(jīng)一次注射免疫，有效期長達(dá)15個(gè)月。

表1 是幾種草魚出血病毒疫苗的優(yōu)缺點(diǎn)比較［4、5、6］。鑒于此，基因疫苗以其抗原性強(qiáng)、保護(hù)時(shí)間長、改造方便、制備和運(yùn)輸方便而越來越受到人們的重視，成為一種全新的免疫方式。

表1 草魚出血病毒疫苗的優(yōu)缺點(diǎn)比較

3.2 草魚出血病的中草藥防治研究

中草藥具有天然、高效、毒副作用小、抗藥性不顯著、資源豐富以及性能多樣化等優(yōu)點(diǎn)，在防治魚病中，開發(fā)和利用中草藥不僅解決了抗生素及其替代品不能解決的藥物殘留問題，而且能顯著提高我國漁業(yè)生產(chǎn)水平及產(chǎn)品質(zhì)量。因此人們越來越關(guān)注應(yīng)用中草藥防治魚病，并總結(jié)篩選出許多在生產(chǎn)應(yīng)用中行之有效的單方、驗(yàn)方［7、8］。

周正度［9］報(bào)道中藥方劑“魚康靈”可防治草魚出血病，菊花、金銀花、黃柏、青木香、樟腦、苦參、食鹽合劑煎汁后全池潑灑，可防治魚類出血、爛鰓、腸炎并發(fā)癥。姜德山和李丙文［10］以清瘟敗毒飲治療草魚出血病，按魚體重的0.3%做成藥餌喂服，5d 后未見死魚，至出塘未見復(fù)發(fā)。

中草藥雖然在防治魚病方面有一定的功效，但在實(shí)際應(yīng)用中也存在許多問題，集中表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:

(1)濫用偏方;

(2)配方不合理;

(3)加工工藝落后;

(4)理論研究較少;

(5)缺少專業(yè)用語;

(6)藥效慢、使用麻煩和某些原材料價(jià)格偏高等。因此，充分發(fā)揮中草藥在防治魚病方面應(yīng)有的作用還需要很大的努力。

3.3 草魚出血病的干擾素防治研究

干擾素(Interferon，IFN)是一種重要的細(xì)胞功能調(diào)節(jié)因子，具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等功能，是現(xiàn)代生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等研究中一個(gè)十分活躍的領(lǐng)域。但目前對IFN的研究主要見諸于人類和高等脊椎動(dòng)物，就低等動(dòng)物的魚類研究尚處起步階段［11］。

蘇建明等［12］采用顯微注射法將人A－干擾素抗病基因轉(zhuǎn)移到草魚受精卵中，獲得轉(zhuǎn)基因群體，通過PCR 及Southern 雜交對轉(zhuǎn)基因草魚進(jìn)行分子水平的檢測，以進(jìn)一步驗(yàn)證外源人A－干擾素是否整合入草魚基因組，結(jié)果表明，外源人A－干擾素抗病基因已整合入草魚基因組中。采用腹腔注射法，對轉(zhuǎn)基因魚進(jìn)行草魚出血病病毒接種攻毒試驗(yàn)，結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因草魚比對照組的抗病毒能力有顯著提高。賈方鈞等［13］對人工誘導(dǎo)的鯽魚干擾素防治草魚出血病的效果進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，人工誘導(dǎo)的鯽魚干擾素確能有效防治草魚出血病。腹腔注射和藥浴浸泡兩種途徑均有一定效果。

干擾素雖然對草魚出血病病原具有較強(qiáng)的免疫效價(jià)，但是其生產(chǎn)成本相對較高，而且也必須采取注射法進(jìn)行接種，所以，目前也沒有在生產(chǎn)上推廣使用。

3.4 防治草魚出血病的環(huán)境控制

研究表明，影響草魚免疫應(yīng)答的環(huán)境因素主要有:溫度、pH 值、溶解氧、養(yǎng)殖密度等?？尚械姆椒òㄗ龊铆h(huán)境控制，清除池底過多淤泥，并用濃度為20.0×10－6的生石灰或濃度為1.0×10－6的漂白粉消毒，嚴(yán)格執(zhí)行檢疫制度，不從疫區(qū)引進(jìn)魚種，發(fā)病季節(jié)全池潑灑二氧化氯、表面活性劑等進(jìn)行水體全面消毒處理。

王文博等［14］在實(shí)驗(yàn)室條件下利用放養(yǎng)密度和放養(yǎng)時(shí)間構(gòu)建組間差異，模擬養(yǎng)殖過程中草魚所面臨的擁擠脅迫，結(jié)果表明，高密度組(80.0×10－3)的血清溶菌酶活性在脅迫后開始升高，并于14d 時(shí)達(dá)峰值，以后逐漸下降，呈倒“U”型趨勢。董天紅等［15］研究了pH 值對草魚血液吞噬活力的直接影響，結(jié)果表明，弱堿性(pH 值7.5)的水體能夠較大強(qiáng)度地發(fā)揮草魚免疫系統(tǒng)的功能，抵御外來抗原的侵襲，減少魚病的發(fā)生。

通過改善養(yǎng)殖草魚水體環(huán)境來調(diào)節(jié)草魚的免疫功能，可以促使草魚提高對出血病的免疫能力，但對養(yǎng)殖水體的宏觀調(diào)控也是比較難操作的。

4 總結(jié)與展望

草魚出血病病原主要侵染在草魚的活組織細(xì)胞中而致病。采用化學(xué)藥物治療則因?yàn)樗幬镫y以滲入到病毒所感染的組織細(xì)胞或滲入的含量很低而達(dá)不到殺滅病毒的藥量，療效不明顯。目前人們還沒有研制出能有效抑制和殺滅病毒的藥物。目前所采用的只是一些被動(dòng)防御措施;或加強(qiáng)機(jī)體的免疫防護(hù)功能;或創(chuàng)造不利于病毒快速增殖的寄宿內(nèi)環(huán)境。

草魚出血病的疫苗防治是行之有效的方法，但由于對草魚出血病病毒各地流行株的免疫原性尚缺乏系統(tǒng)的比較研究，因而尚未制備出能廣泛使用的魚用疫苗，并且各種疫苗都存在一定的缺點(diǎn)。

關(guān)于草魚出血病的中草藥防治，雖然在防治魚病方面有一定的功效，但在實(shí)際應(yīng)用中也存在許多問題。

干擾素是至今發(fā)現(xiàn)的最為理想的一種抗病毒生物活性物質(zhì)，目前研究較為活躍，在人及高等脊椎動(dòng)物中已有大量的研究和研制，部分已形成商品化生產(chǎn)。但魚類干擾素的研究較少。

另外，通過環(huán)境控制來防治草魚出血病，其現(xiàn)實(shí)可操作性還有待進(jìn)一步提高。

因此，進(jìn)一步加深對各種方法的研究，綜合運(yùn)用各種方法，形成合力防治草魚出血病，堅(jiān)持“以防為主、治療為輔”的原則，加強(qiáng)產(chǎn)前各項(xiàng)環(huán)節(jié)的預(yù)防措施和日常管理工作，才能有效抑制該病的發(fā)生。

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