刺激隱核蟲病的現(xiàn)狀及防控方法研究

1937年，日本學(xué)者Sikama發(fā)現(xiàn)一種新的纖毛蟲類寄生蟲能使45種以上的海水魚類感染，產(chǎn)生的病理特征同淡水多子小瓜蟲病類似。Brow于1951年同樣發(fā)現(xiàn)了該纖毛蟲，并將該種類的寄生蟲命名為Cryptocaryon irritans，該名稱隨后在科學(xué)界廣泛流行。徐潤林在1992年對刺激隱核蟲研究的歷史和進展進行了綜述，我國農(nóng)業(yè)部 在2008年將其列入我國動物二類疫病名錄。

1 生物學(xué)特性及生活史

刺激隱核蟲的生活史是直接發(fā)育生活史（即不需要中間宿主），在宿主寄生期和脫離宿主期經(jīng)歷四個蟲體階段。滋養(yǎng)體（trophont）是指寄生在宿主上并不斷生長的蟲體，發(fā)育成熟后就成為包囊前體（proto-mont），然后脫離宿主，粘附到水底或池壁上，形成包囊（tomont）。包囊進行無性繁殖，分裂形成許多小仔體即幼體（to‐mite），最后幼體破囊逸出，形成幼蟲（theront）。幼蟲可在水中自由活動，不進食，具有感染宿主的能力，為感染期蟲體。海水小瓜蟲的生活史在24～27.8℃平均需要7～10天。

1.1 滋養(yǎng)體

幼蟲感染宿主后，鉆入上皮內(nèi)，形成滋養(yǎng)體。滋養(yǎng)體長度在400～500μm以上，呈圓形或梨形，全身表面披有均勻一致的纖毛，近于身體前端有一胞口。外部形態(tài)與多子小瓜蟲相似，主要區(qū)別是隱核蟲的大核分成4個卵圓形的串珠狀團塊。蟲體能在宿主上皮內(nèi)作旋轉(zhuǎn)運動，以宿主體液、組織碎片及整體細胞為食。滋養(yǎng)體成長期為3～7天。滋養(yǎng)體成熟后，從宿主體上脫落下來進入水環(huán)境，依靠體纖毛的擺動在水中自由運動，停留在遇到的合適基質(zhì)（Substrate）上，繼續(xù)發(fā)育成為包囊前體。

1.2 包囊前期

滋養(yǎng)體期脫離宿主體的時間具有周期性，多數(shù)在每天黎明前最黑暗時期脫落。蟲體脫離宿主，在形成包囊前，通常在水體中緩慢游動2～8小時，此蟲體叫包囊前體。包囊前體最后固著于一些附著物上，脫掉纖毛，蟲體表面具的脊?fàn)钔黄鹱兤剑⑿纬珊蟮哪冶?，最后形成包囊?/span>

1.3 包囊

包囊包囊的大小，隨水溫和魚種不同而異，通常為（94.5～252）μm×（170～441）μm。包囊通常一系列不對稱二次分裂，最后形成子代幼體。雖然在同一魚體上的滋養(yǎng)體常在相對集中的時間內(nèi)（16～18小時）脫離宿主，但包囊發(fā)育和幼蟲的逸出則很不同步，即使在培養(yǎng)條件相同的情況下也是如此。

1.4 幼蟲

幼蟲呈卵圓形或紡錘形，大小為（20～50）μm×（30～70）μm，前端稍尖，有一變形胞口，后端鈍圓，全身密布纖毛。一個包囊可孵出200～400個幼蟲，幼蟲能在水中快速游動，尋找和感染宿主。大多數(shù)蟲株的幼蟲只能生存24小時，但孵出6～8小時后，幼蟲的感染能力大大減弱，10～12小時后則僅有少部分幼蟲還具備感染能力，18小時后完全喪失感染力。幼蟲呈日周性出現(xiàn)，即在無光的夜間孵出。

2 癥狀初期

2.1 患病初期

魚攝食量減少，在養(yǎng)殖池中分布散亂、漫游不止，時常翻轉(zhuǎn)身體摩擦池底，開口呼吸，頻率加快。

2.2 患病后期

病魚的皮膚和鰓上小白點愈加明顯，在鰭條、鰓上滋養(yǎng)體顯現(xiàn)得最為明顯；病魚體表發(fā)炎潰瘍，鰭條缺損、開叉，眼角膜渾濁發(fā)白，體表、鰓絲分泌大量黏液；鰓變蒼白；因搔癢而引起的行為異常，綢科魚類表現(xiàn)為不喜歡集群，或無規(guī)則獨游；石斑魚類通常趴在池底下集堆，有的喜歡停留在進水口或出水口張嘴、掀鰓蓋呼吸，嚴重的窒息死亡。

3 主要流行特點

3.1 魚體感染后

刺激隱核蟲主要寄生于海水魚體表、鰓及口腔等部，形成包囊，呈針頭大小白點狀，肉眼可見，嚴重時魚體全身可見白點。該蟲引起魚的活動異常、食欲降低、上皮增生、呼吸困難及機械損傷，繼而帶來細菌繼發(fā)感染從而導(dǎo)致病魚死亡。取病魚組織在顯微鏡下可以看到圓形或卵圓形全身具有纖毛、體色不透明、緩慢旋轉(zhuǎn)運動的蟲體。

3.2 易發(fā)病階段

刺激隱核蟲主要流行于水溫在24～28℃的春秋兩季，即每年的3～4月和9～10月。立春和立秋時節(jié)，水溫在20～25℃左右時尤其應(yīng)加強預(yù)防。以福建、粵東海區(qū)為例，每年進入9月份后，隨著日照減少，海水出現(xiàn)上涼下熱的溫差，從而導(dǎo)致海底殘餌、糞便等污物上升到水面，造成水質(zhì)渾濁、海水富營養(yǎng)化程度增加，加上溫度適宜，從而引起刺激隱核蟲短時間內(nèi)大量繁殖并危害當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖魚類。此外，該病還特別在海區(qū)環(huán)境變化大（如臺風(fēng)過后）、水流不暢、魚體營養(yǎng)不良、抗病力差時出現(xiàn)。在人工養(yǎng)殖條件下，除軟骨魚類和藍子魚對刺激隱核蟲有一定抵抗力外，刺激隱核蟲幾乎在宿主選擇上沒有特異性，幾乎可以對所有海水養(yǎng)殖魚類產(chǎn)生致病性。

4 防治措施

4.1 改善水環(huán)境

池塘或室內(nèi)魚池等封閉式水環(huán)境中，應(yīng)在刺激隱核蟲病發(fā)生早期進行大量換水，日交換量為50%，連續(xù)2周；進水口配置過濾裝置，過濾雜魚、蝦和水草雜物，減少刺激隱核蟲隨這些生物帶進池塘的可能；加大換水量，有助于清除包囊和幼蟲，減少傳染的機會，并可增強魚體免疫力，防止細菌繼發(fā)感染。

4.2 加強營養(yǎng)

增強抵抗力在刺激隱核蟲流行的季節(jié)，通過投喂?fàn)I養(yǎng)豐富的飼料，適當(dāng)添加復(fù)合維生素，從提高魚類體質(zhì)、增強抗病能力入手，防止刺激隱核蟲病發(fā)生。

4.3 疫苗免疫

采用刺激隱核蟲幼蟲滅活疫苗免疫，石斑魚接種該苗后可達到85%的相對保護率。

4.4 生物預(yù)警法

特別是在海洋養(yǎng)殖區(qū)中宜采用此方法。在海洋養(yǎng)殖區(qū)增設(shè)生物哨所，以免疫缺損或較養(yǎng)殖生物易感魚類作為指示生物，以指示生物的感染水平通過數(shù)學(xué)家模型預(yù)測養(yǎng)殖生物的將被感染的期限，為預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。刺激隱核蟲病的危害依然嚴峻，防治該病不能只依靠任何單一手段，而要將疫苗開發(fā)、藥物和生態(tài)控制策略相結(jié)合，綜合多條思路建立起一套高效的防治結(jié)合策略。

5 展望

刺激隱核蟲病的危害依然嚴峻。防治該病不能只依靠任何單一手段，而要將疫苗開發(fā)、藥物和生態(tài)控制策略相結(jié)合，綜合多條思路建立起一套高效的防治結(jié)合策略[10]。未來的主流研究主要集中于以下幾方面：一是滅活蟲體疫苗的制備。目前的方法致使感染程度不易把握，難以獲得足量蟲細胞，且缺乏可操作性。因此需要改良現(xiàn)有的感染及體外培養(yǎng)方法，建立新的體外培養(yǎng)及人工感染模型。二是挖掘抑動抗原。挖掘抑動抗原為制備刺激隱核蟲疫苗提供新的思路。但鑒于刺激隱核蟲獨特的密碼子使用偏好，這一途徑是否可行還需要探討。三是轉(zhuǎn)基因技術(shù)。將四膜蟲作為異源蛋白表達載體，在其膜表面表達刺激隱核蟲抑動抗原蛋白，用重組四膜蟲注射免疫實驗魚，取得了一定的效果。但是由于不同國家對轉(zhuǎn)基因生物安全性方面的限制，將活體轉(zhuǎn)基因四膜蟲直接應(yīng)用于抑動抗原的免疫還有待觀察。四是物理和化學(xué)手段相結(jié)合治療。結(jié)合刺激隱核蟲的發(fā)育規(guī)律、生活史不同時期的特點，采用物理、化學(xué)手段相結(jié)合，通過抑制病原增殖、阻斷傳播途徑、減輕患病魚體所受到的脅迫，建立一套安全、高效的生態(tài)防控技術(shù)系統(tǒng)，對開展刺激隱核蟲綜合防治具有重要的指導(dǎo)和應(yīng)用價值。

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