解讀：黃顙魚體色變化及黃化問題

目前，在廣東的佛山與江門、江浙滬成為黃顙魚主要養(yǎng)殖區(qū)域，四川、江蘇、湖北、廣西等區(qū)域黃顙魚養(yǎng)殖量也逐漸增多。近幾年來，由于魚粉價(jià)格走高、飼料配方技術(shù)或魚粉替代技術(shù)的不成熟、養(yǎng)殖管理技術(shù)不高，導(dǎo)致在日益競爭激烈的市場上出現(xiàn)黃顙魚黃化情況的頻率越來越多。

目前，養(yǎng)殖戶也對于出現(xiàn)黃顙魚黃化的情況，一概歸結(jié)為飼料問題，對于出現(xiàn)此類問題的飼料廠家，或賠或倒，即使能適當(dāng)補(bǔ)貼賠償安撫住養(yǎng)殖戶，來年產(chǎn)品聲譽(yù)與感召力也會受到影響，經(jīng)銷商會更有談判價(jià)碼，如果經(jīng)銷商層面處理不好，銷量下滑是肯定的。

在關(guān)注各大主流媒體上也時(shí)常報(bào)道黃顙魚黃化導(dǎo)致花身、“香蕉魚”的事情，不乏有成功修復(fù)的案例。鑒于黃顙魚顏色變化的塘頭圖片描述資料較少，因此將走訪塘頭收集到部分黃顙魚黃化資料整理總結(jié)出來，期望能對走訪塘頭的飼料廠技術(shù)人員或是配方師們一點(diǎn)點(diǎn)參考作用。

一、黑色素細(xì)胞及黃色沉積

(1)黑色素細(xì)胞

黑色素細(xì)胞胞體直徑大小在100~300 μm，黑色素顆粒直徑為0.3~0.7 μm。通過對黃顙魚腹部黑色素點(diǎn)進(jìn)行粗略測量其大小直徑約為100~195 μm，應(yīng)該是黑色素細(xì)胞(如圖1)。人正常能觀察的最小物體大小在100~200 μm，因此，黃顙魚表皮下的黑色素細(xì)胞能較易觀察出來，而黑色素顆粒則不能。

圖1 腹部黑色素細(xì)胞形態(tài)

(2)黃色素沉積

關(guān)于黃色素沉積資料較多，主要觀點(diǎn)為：

★ 所有魚類均不具備合成葉黃素的能力，故必需在餌料中攝取獲得;

★ 添加天然葉黃素類物質(zhì)及玉米蛋白粉等物質(zhì)魚體黃色沉積著色較好。

★ 飼料中添加色素含量至60~100 mg/kg正常投喂1個(gè)半月魚體黃色素沉積較好。

根據(jù)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)觀察到的正常黃顙魚黃色素沉積過程(見圖2)：

★ 嚴(yán)重不足：魚體背側(cè)呈青灰色，黃色條紋不明顯，同時(shí)腹部黃色淺，呈灰色;當(dāng)飼料中色素添加量少或黃顙魚養(yǎng)殖中間過程時(shí)經(jīng)常會出現(xiàn)。

★ 稍微不足：魚體背部黃色條紋嫩黃色，與黑色紋路組合整體無青灰顏色，腹部顏色嫩黃;此時(shí)顏色狀態(tài)一般出現(xiàn)在新口出魚前1個(gè)月時(shí)間，使用正常加黃料繼續(xù)用料后顏色會大有改觀。

★ 正常顏色沉積：背側(cè)、腹部黃色素顏色沉積正常，呈古銅色;老口黃顙魚基本呈這種狀態(tài)。

★ 沉積過多：背側(cè)、腹部黃色素沉積過足，脂鰭顏色偏黃(魚體狀態(tài)，內(nèi)臟情況正常);一般出現(xiàn)在飼料使用過多葉黃素導(dǎo)致。

圖2 正常狀態(tài)下黃顙魚皮膚黃色素沉積程度

華東區(qū)域黃顙魚新口、老口劃分標(biāo)準(zhǔn)主要按養(yǎng)殖時(shí)間來定，有相關(guān)資料報(bào)道，在此不做敘述。正常新口黃顙魚體表顏色表現(xiàn)為嫩黃，老口黃顙魚則為古銅色(圖3)。

老口體色的古銅色與色素的沉積量有直接關(guān)系，但并不是加大葉黃素類物質(zhì)的添加量就能快速增色，因轉(zhuǎn)運(yùn)色素的載體脂蛋白是有限的，容易被飽和。因此控制適當(dāng)?shù)奶烊簧靥砑恿坎粌H節(jié)約配方成本，還能取得滿意的效果。

圖3 正常新口與老口體色黃色素沉積對比

(3)黃色素沉積位置及黑色素帶

據(jù)研究資料顯示(葉元土，2009;丁小峰，2006)，無鱗魚不同于有鱗魚，有鱗魚僅有一層色素帶，而無鱗魚卻含有2條色素帶，切片后發(fā)現(xiàn)黃顙魚黑色素帶主要分布于表皮與真皮之間、真皮與皮下層之間，其中以表皮與真皮之間的色素帶較為明顯，含有黑色素細(xì)胞較多。而黃色素通過在魚體內(nèi)乳化、消化吸收后，主要沉積位置在皮膚的皮下層脂肪細(xì)胞內(nèi)。在養(yǎng)殖過程中，肉眼較容易觀察黃色素沉積深淺情況，仔細(xì)觀察也能較容易觀察體表黑色素細(xì)胞是處于黃色素之上的。魚體黑色也主要是兩層的黑色素細(xì)胞層疊加后的結(jié)果，且我們看到的黑色素細(xì)胞主要存積位置在真皮以上，在魚體表面能較容易觀察出來，而處于真皮與皮下層的黑色素細(xì)胞可能就會有些模糊。

正常黃顙魚體側(cè)固有的黑、黃色橫縱條紋應(yīng)該是遺傳因素決定的。黃顙魚體側(cè)皮膚各有2條橫向、縱向黃色條紋，將黑色素帶分隔為上中下三塊，中間黑色素塊分隔為頭、中、尾三塊(圖4)。

當(dāng)魚體顏色變黃時(shí)，黑、黃色橫縱條紋會消失，也即是黑素素層變薄、消失的過程。觀察黃化魚黑色素消失過程的資料，個(gè)人推測兩層黑色素細(xì)胞在體側(cè)皮膚分布的位置是不一樣的，真皮與皮下層之間的黑色素細(xì)胞層可能僅分布在圖示中黑色素塊位置，而表皮與真皮之間的黑色素細(xì)胞層主要分布于圖示黑色素塊位置，部分分布于黃色條紋區(qū)域。因此，可能表皮與真皮之間的黑色素細(xì)胞對應(yīng)激、消失變化最敏感，魚體黑色素細(xì)胞的消失時(shí)表皮與真皮之間的黑色素細(xì)胞最先不穩(wěn)定而退去，真皮與皮下層之間的黑色素細(xì)胞再褪去的過程。

圖4 黃顙魚體側(cè)皮膚黑色素帶

二、黃顙魚應(yīng)激性體色變化

由于黑色素細(xì)胞的微管指向細(xì)胞外圍，只能做單向運(yùn)動的驅(qū)動蛋白將黑色素運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞的周邊。將黑色素分散到細(xì)胞周圍會使細(xì)胞變暗，而使黑色素集中到細(xì)胞中心會是細(xì)胞顏色變淺。這是魚類在分子水平上自我防護(hù)的原理。

當(dāng)黃顙魚受到物理性應(yīng)激產(chǎn)生體色變化，但當(dāng)應(yīng)激因子解除，魚體自然恢復(fù)正常體色。通過塘頭走訪，在打樣時(shí)候經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)，當(dāng)天氣不好，打樣后放入水中后，黃顙魚顏色會變黑;而當(dāng)在大晴天打樣，黃顙魚一般體側(cè)黑色較淺的現(xiàn)象，推測可能與天氣光照強(qiáng)度有較大關(guān)系。

走訪塘頭打樣黃顙魚觀察時(shí)，當(dāng)時(shí)是陰雨天氣，魚出魚后的體色與在盛滿塘水的桶中放置10分鐘后體色是不一樣。主要表現(xiàn)在前部、腹部黃色色素未變化，但黑色素增多，魚整體顏色暗化(圖5)。

圖5 黃顙魚打樣10min后顏色暗化

在晴天陽光較刺眼的時(shí)候，塘頭打樣，當(dāng)黃顙魚從拋網(wǎng)中取出時(shí)魚體黑色顏色是較淺的，呈現(xiàn)黑色素褪化的現(xiàn)象，但當(dāng)放置水桶中10分鐘后，黑色素增多，魚體體色呈現(xiàn)正常魚體的狀態(tài)(圖6)。

圖6 打樣立即拍照與放置10分鐘后拍照魚體顏色變化

據(jù)資料顯示(高啟平，2006)，正常光照條件下，鯽魚魚體在黑色背景下顏色會轉(zhuǎn)暗，而在白魚前景下顏色會變淺;同時(shí)體色較淺的魚體鱗片黑色素細(xì)胞中色素顆粒較處理前集中，少部分能見星狀突起，較深的魚體鱗片黑色素細(xì)胞中色素顆粒由每個(gè)中心點(diǎn)向四周擴(kuò)散，星狀突起增多。

發(fā)現(xiàn)黃顙魚也同樣存在這種情況，在光照強(qiáng)烈的條件下，魚體在離水中暫養(yǎng)10分鐘后黑色增加，體色顯示正常。

因此，對黃顙魚顏色的評判需要注意當(dāng)時(shí)打樣條件及顏色變化的規(guī)律，以免誤判成黃色素不足或黑色素不足。

三、黃色素沉積及黑色、黃色體色的退化

在由蘇州大學(xué)葉元土教授等編寫的《魚類營養(yǎng)與飼料配制》(2013年)一書的第五章“魚體健康、飼料與魚類體色的關(guān)系”章節(jié)內(nèi)容中，全面論述到黃顙魚體色變化及黃色素沉積機(jī)制，內(nèi)容切合生產(chǎn)實(shí)際。書中提到，正常狀態(tài)下黃顙魚體色是受到遺傳控制及環(huán)境條件變化的控制，這種體色變化是可逆性的、適應(yīng)性的。而養(yǎng)殖條件下魚體顏色的顯著性變化如黑色體色、黃色體色的退化，不是可逆性的體色自我調(diào)控，而是屬于不可逆轉(zhuǎn)的體色退化，是魚體主要內(nèi)臟器官如肝胰臟和整體生理健康受到損傷的一種表型。

魚類體色變化一類是生理上的顏色變化，即由于黑色素細(xì)胞內(nèi)黑素顆粒的迅速聚集或擴(kuò)散造成;一類是形態(tài)上的顏色變化，即由黑色素細(xì)胞的形態(tài)或數(shù)目發(fā)生改變而造成。對于黃顙魚黑色體色的退化，主要表現(xiàn)是皮膚中黑色素細(xì)胞的消失，屬于形態(tài)上的顏色變化。一方面可能是由于肝胰臟的損傷導(dǎo)致了黑色素細(xì)胞的分化、發(fā)育、生長受到抑制而使成熟的黑色素細(xì)胞數(shù)量不足。另一方面可能是酪氨酸酶活力缺乏導(dǎo)致黑色素細(xì)胞中黑色素生成阻礙，或是適應(yīng)白色環(huán)境導(dǎo)致的黑色素生理性死亡，伴隨黑色素細(xì)胞的衰老、死亡從而體表黑色體色消失。

魚類皮膚的黑色素細(xì)胞是由神經(jīng)嵴細(xì)胞分化而來，當(dāng)其遷移到皮膚處則分化成前黑色素細(xì)胞如成黑色素細(xì)胞，再由前黑色素細(xì)胞分化形成黑色素細(xì)胞。成熟的黑色素細(xì)胞形成過程包含黑色素細(xì)胞生長發(fā)育過程及黑色素合成過程。研究發(fā)現(xiàn)的魚類皮膚的黑色素細(xì)胞凋亡退化，內(nèi)部的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)不完整，也沒有黑色素體的出現(xiàn)，只留下萎縮的細(xì)胞形態(tài)，成條帶狀。

黑色素細(xì)胞合成黑色素的特定細(xì)胞器是黑素小體，存在于黑色素細(xì)胞中。黑素小體黑素化過程為：前黑素體產(chǎn)生于細(xì)胞的滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，而粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成酪氨酸酶，在高爾基體完成組裝后，包上一層囊泡運(yùn)到黑素體的復(fù)合物中，當(dāng)囊泡接觸到前黑素體膜，酪氨酸酶即起作用，黑色素聚合物即形成。

從黑素小體黑素化過程可以知道，當(dāng)黑素小體處于Ⅳ期即完全成熟時(shí)，黑色素充滿黑素小體，同時(shí)小體內(nèi)酪氨酸酶失去活力。

研究表明，黑色素的生物合成是一個(gè)由酪氨酸酶催化體內(nèi)酪氨酸羥化而啟動的一系列生化反應(yīng)過程，而且存在于黑色素體中的酪氨酸酶，是黑素生成的限速酶，其表達(dá)和活性決定著黑色素合成的速度和產(chǎn)量。一般黑色素分為三類：第一類為黑/棕色優(yōu)黑素，又稱為真黑素，黑色的頭發(fā)、牛羊的眼睛中就大量含有這種黑素;第二類為紅/黃色褐色素，又稱為脫黑素，在紅頭發(fā)、藍(lán)眼睛中大量存在;第三類為異黑素，呈棕色或黑色，主要存在于植物中。真黑素、脫黑素生成過程如下圖。

圖 真黑素、脫黑素生成過程

觀察黃顙魚體表黑色消失過程最直接的是使黃顙魚持續(xù)處于缺氧狀態(tài)，當(dāng)魚體缺氧到一定程度，體表黑色幾乎觀察不到，僅剩下體表黃色素。當(dāng)黃顙魚處于疾病狀態(tài)，如出血病、爆頭病體表黑色素也會發(fā)生異常，解剖發(fā)現(xiàn)，其肝臟均受到嚴(yán)重?fù)p傷。

圖7 出血病導(dǎo)致華表顏色異常

圖8 “爆頭病”前期黃顙魚顏色異常

排除遺傳、環(huán)境、疾病原因影響，僅飼料中物質(zhì)導(dǎo)致黃顙魚體表黑色素細(xì)胞的生長抑制與黑色素的生成障礙的元素都較多，如維生素不足、部分微量元素過量、飼料原料摻假非蛋白氮類物質(zhì)、魚粉新鮮度差等。

研究資料表明三聚氰胺能導(dǎo)致黃顙魚黑色體色退化。一定劑量三聚氰胺對水產(chǎn)動物的腎臟組織有嚴(yán)重?fù)p傷，同時(shí)能導(dǎo)致肝功能損傷。李雅琴(2015)研究表明在飼料1.0%三聚氰胺暴露的10d，其即擾亂了吉富羅非魚肝臟酶系的正常功能，停止暴露后可逐步恢復(fù)正常。在三聚氰胺對魚類體色影響方面，薛繼鵬(2011)研究了三聚氰胺對瓦氏黃顙魚生長、體色、皮膚中黑色素含量及酪氨酸酶活力影響，結(jié)果顯示飼料中添加三聚氰胺可顯著降低魚體特定生長率;飼料中添加0.5%、1.0%三聚氰胺時(shí)瓦氏黃顙魚背部皮膚的黑色消失，背部皮膚黑色素含量顯著降低，但皮膚中酪氨酸酶活力卻無顯著性變化。表明三聚氰胺可能造成了黑色素細(xì)胞分化過程的障礙，成熟黑色素細(xì)胞不能正常形成，從而導(dǎo)致瓦氏黃顙魚體色異常。然而皮膚中酪氨酸酶活力與黑色素含量不呈相關(guān)關(guān)系，可能原因有兩種：一是酪氨酸酶在皮膚的抽提液中是具有酶活性的，但在完整的皮膚中沒有酪氨酸酶活性，處于抑制狀態(tài)(黃冰，2004)，表明可能三聚氰胺還導(dǎo)致了某些未知因子的產(chǎn)生抑制了酪氨酸酶在皮膚中的活性。二是黑色素含量降低，是否是黑素小體Ⅲ期、Ⅳ期減少造成，導(dǎo)致黑素小體大部分處于Ⅰ期、Ⅱ期，此時(shí)酪氨酸酶活力正常。據(jù)葉元土(2009)研究結(jié)果，體色已經(jīng)變?yōu)辄S色的斑點(diǎn)叉尾鲴皮膚中依然有黑色素帶，僅是沒有黑色素的存在。是否說三聚氰胺類非蛋白氮導(dǎo)致了黑素細(xì)胞中黑素小體不能正常發(fā)育成熟，這需要進(jìn)一步的研究實(shí)驗(yàn)。

氧化油脂雖然以消化系統(tǒng)為切入點(diǎn)，但肝作為營養(yǎng)物質(zhì)代謝和解毒中心，對氧化油脂的毒性非常敏感。水產(chǎn)動物攝食氧化油脂后，其肝脂肪含量會增加，肝出現(xiàn)腫大、褪色和細(xì)胞變大壞死等一系列病變。殷永風(fēng)(2011)試驗(yàn)得出隨著氧化豆油添加量的增加，肝細(xì)胞有壞死的趨勢。葉世根(2006)研究發(fā)現(xiàn)飼料加入氧化魚油(POV = 263 meq/kg)投喂鯉魚112天，試驗(yàn)組發(fā)病率為76.7%，死亡率為40.0%，同時(shí)肝細(xì)胞變性及凝固性壞死。如薛繼鵬(2011)發(fā)現(xiàn)飼料添加高度氧化魚油(POV = 300 meq/kg)養(yǎng)殖8周會顯著降低瓦氏黃顙魚前部皮膚的亮度值L*，隨著日糧中魚油過氧化值的升高，魚體背部會變黑。董小林(2010)研究發(fā)現(xiàn)長吻鮠在采集氧化魚油后，促進(jìn)其體表黑色素的合成，進(jìn)而表現(xiàn)為體色暗化。上述研究均表明氧化油脂產(chǎn)物對魚體顏色均是影響其體色暗化，而黑色素細(xì)胞并沒有退化。

目前實(shí)驗(yàn)室的研究結(jié)果顯示氧化油脂產(chǎn)物對魚體體色影響主要結(jié)論為使魚體顏色暗黑，在試驗(yàn)條件下的試驗(yàn)結(jié)果還沒有發(fā)現(xiàn)使魚體黑色素細(xì)胞退化的現(xiàn)象，但并不能說明在養(yǎng)殖條件下黃顙魚不會黃化、白化?？赡苁囚~油氧化過程中POV值變化較大，魚油氧化程度不一致導(dǎo)致有害產(chǎn)物的不同;二是可能添加的氧化油脂導(dǎo)致魚體持續(xù)處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，魚體體色暗化。在養(yǎng)殖塘頭，“香蕉魚”產(chǎn)生過程中，除部分黑色素完全退化的“香蕉魚”外，還會有部分黃顙魚體色暗黑的現(xiàn)象。所以在有害物質(zhì)損傷下，魚體體色暗化可能是黃顙魚黑色素退化的過程節(jié)點(diǎn)之一。

飼料中氧化油脂除對魚體生理機(jī)能從而影響黑色素細(xì)胞生長外，其氧化并產(chǎn)生較多的氧自由基或其它自由基，這些自由基可以導(dǎo)致類胡蘿卜素分子中的不飽和鍵發(fā)生氧化、斷裂，使類胡蘿卜素物質(zhì)失去色素功能，并導(dǎo)致魚類黃色體色退化。

四、正常黃顙魚與“香蕉魚”解剖對比

在走訪某香蕉魚塘頭，選擇較正常魚體(A)與輕度黃化魚，(B)、嚴(yán)重黃化魚,(C)進(jìn)行解剖，發(fā)現(xiàn)在體色(圖9)、內(nèi)臟情況(圖10)、肌肉(圖11)都有所不同。

1、體色

從側(cè)面顏色情況比較來看，A類型黃顙魚黑色素分布正常;B類型黃顙魚黑色素部分褪化;C類型黃顙魚黑色素原有沉積部位完全褪化。

從背部及頭部黑色素沉積來看，A類型黃顙魚背部、頭部黑色素正常，背鰭、脂鰭黑色顏色正常;B類型黃顙魚黑色素在背部、頭部、背鰭、脂鰭均稍不足;C類型黃顙魚黑色素在背部、頭部、背鰭、脂鰭均完全褪化。

從腹面的黑色素分布情況來看，A、B、C類型在腹面黑色素分布沒有明顯的不同，需要注意的是腹鰭上的黑色素C類型黃顙魚是不足的。

圖9 不同黃顙魚側(cè)面、背部頭部、腹面顏色情況

需要說明的是，C類型黃顙魚側(cè)面也有黑色素的分布，但是大部分黑色素并不在原有的正常黃顙魚黑色素分布部位上，且近距離觀察其黑色素細(xì)胞較為模糊，是否其分布位置僅在第二層，即真皮層與皮下層之間?其中原因可能還需要更多的證據(jù)進(jìn)行探討。

2、內(nèi)臟情況

從肝臟顏色來看，A類型肝臟顏色最好，呈血紅色;B類型黃顙魚肝臟顏色也較為正常;C類型黃顙魚肝臟顏色較差，血色淡，偏黃肝。

從內(nèi)臟的脂肪沉積從A到C依次遞減，可能與吃食量有較大關(guān)系。

從內(nèi)臟情況表明黃化魚其健康情況較差，肝臟受到損傷，同時(shí)伴有吃食量下降的情況。因此對肝臟采取藥物修復(fù)，可能會使黃顙魚魚體黑色素顏色回歸正常。

圖10 不同類型黃顙魚內(nèi)臟情況

3、肌肉顏色

從肌肉顏色看到，體表黑色素褪化的黃顙魚其肌肉明顯偏白、偏黃，沒有正常黃顙魚體肌肉所具有的銀色光亮色澤。這種現(xiàn)象的產(chǎn)生可能與肝臟損傷后色素運(yùn)輸沉積與代謝有較大關(guān)系。

圖11 不同黃顙魚肌肉色澤顏色比較

五、黃顙魚修復(fù)方法

養(yǎng)殖技術(shù)管控不嚴(yán)格，水質(zhì)問題突顯，導(dǎo)致黃顙魚免疫力下降，如果此時(shí)料企在黃顙魚料配方上不注重原料質(zhì)量、新鮮度及安全性評估，在養(yǎng)殖因素均惡化的條件下可能導(dǎo)致黃顙魚顏色沉積異常，并進(jìn)一步演變?yōu)辄S化魚。

對于黃化魚的修復(fù)，使用正常無色素飼料能一定程度改善魚體顏色，此主要依靠魚體自身免疫能力的修復(fù)從而使魚體轉(zhuǎn)變至正常魚體，但持續(xù)修復(fù)時(shí)間較長。也可能在飼料中添加保肝護(hù)膽藥物使魚體快速修復(fù)。據(jù)相關(guān)人士反應(yīng)，選擇修復(fù)藥物不當(dāng)，雖然能正常修復(fù)黃顙魚黃化問題，但也會使飼料料比升高。因此，對于修復(fù)藥物的選擇需要具體評價(jià)后使用。

六、結(jié)語

黃顙魚顏色變化的數(shù)據(jù)積累對于實(shí)際走訪塘頭，查找飼料原因，階段性優(yōu)化飼料配方組合有重要作用。同時(shí)正確識別正常與異常魚體顏色及顏色異常變化原因，對于更好維護(hù)客戶非常重要。通過收集到的資料，也許黃顙魚黃化過程與修復(fù)過程的顏色變化時(shí)間周期、路徑是不一致的，飼料采取動作的節(jié)點(diǎn)與策略也會有所差異，如果研究則工作量也會很大。因此，與其坐等終端塘頭黃顙魚顏色異常，不如料企與終端雙方努力，做好飼料原料的把控，規(guī)避飼料有害物質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)，終端養(yǎng)殖塘頭對水質(zhì)認(rèn)真維護(hù)、減輕病害，開創(chuàng)雙贏局面。

    (來源：粵海飼料 作者： 姚仕彬)