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產(chǎn)氣莢膜梭菌
產(chǎn)氣莢膜梭菌(Clostridium perfringens)屬于梭菌科、梭菌屬,為革蘭氏陽性菌,但在陳舊培養(yǎng)基中可變?yōu)殛幮?/span>。菌體呈直桿狀,兩端鈍圓,無鞭毛,不運動,可產(chǎn)生芽孢,多數(shù)菌株可形成莢膜。
最適培養(yǎng)溫度為37-45℃,在普通營養(yǎng)瓊脂上即可生長,葡萄糖和血液可促進其生長。在血平板上培養(yǎng)24-48h,可形成表面光滑、半透明、圓頂型的菌落,周圍可見雙溶血環(huán),其中內(nèi)側(cè)環(huán)為θ毒素引起的完全溶血,外側(cè)環(huán)為α毒素引起的不完全溶血。常用的鑒別選擇培養(yǎng)基為血平板、胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂平板(TSC平板)和亞硫酸鹽多粘菌素磺胺嘧啶平板(SPS平板)等。因為α毒素具有卵磷脂酶活性,能夠分解卵黃中的卵磷脂,在卵黃瓊脂培養(yǎng)基中生長,菌落周圍可形成乳白色的渾濁環(huán)。該菌為厭氧菌,在肉湯培養(yǎng)基中也生長較好,且會大量產(chǎn)生CO2和H2,促進自身增殖。在牛乳培養(yǎng)基中培養(yǎng),可迅速分解牛乳中的乳糖產(chǎn)酸,并產(chǎn)生大量氣體,使凝塊沖至數(shù)段,呈海綿狀碎塊,這就是牛乳培養(yǎng)基的“洶涌發(fā)酵”,是本菌的突出特征。
(曲別針樣的產(chǎn)氣莢膜梭菌)
產(chǎn)氣莢膜梭菌是一種普遍存在于水、土壤以及動物腸道中的條件致病菌,是一種能夠?qū)е聞游锬c道疾病的常見病原菌,產(chǎn)生各種毒素,可引起多種動物的壞死性腸炎和腸毒血癥。
目前為止,產(chǎn)氣莢膜梭菌已發(fā)現(xiàn)至少17種毒素,分別為α、β、γ、δ、ε、η、θ、ι、κ、λ、μ和ν等,其中有致病作用的主要有α、β、ε和ι 4種毒素。
α毒素是產(chǎn)氣莢膜梭菌最重要的毒素,本質(zhì)為卵磷脂酶C,編碼毒素的plc基因位于染色體上,大小為1194bp。α毒素破壞細胞膜結(jié)構(gòu),并具有溶血活性,是一種致死性毒素。
β1毒素的編碼基因cpb1位于質(zhì)粒,其為穿孔素,毒力較強,具有溶細胞活性。β2毒素由cpb2編碼,與β1毒素在氨基酸序列上沒有顯著的同源性,但是有類似的生物學活性。
ε毒素的編碼基因etx位于質(zhì)粒,全長984bp。ε毒素被胰蛋白酶水解活化為成熟肽,被腸粘膜吸收引起腸毒血癥;擴散到全身,在腎臟可引起腎組織軟化,可使血管通透性升高,導致水腫。
ι毒素是一種二亞基毒素,由位于質(zhì)粒的iap和ibp基因編碼,可造成細胞壞死和血管通透性增加。
其他次要毒素例如θ-(溶血素),μ-(透明質(zhì)酸酶),κ-(膠原酶),λ-(蛋白酶)都可以使組織受損。
另外,NetB毒素是一種“穿孔毒素”。它能夠使細胞表面形成親水性孔道并最終導致細胞破裂死亡。該毒素的編碼基因NetB 位于質(zhì)粒。
其他還有腸毒素cpe等。
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