鯽魚鯉魚“鰓出血”可以參照：采用免疫多糖對鯽造血器官壞死癥以及鯉皰疹病毒病的免疫預防效果

長期以來我國在養(yǎng)殖魚類疾病防控中，提倡的是“預防為主，防重于治”的方針。而在眾多預防養(yǎng)殖魚類疾病的措施中，根據(jù)養(yǎng)殖魚類疾病發(fā)生的流行病學（epidemiology）基本規(guī)律，定期使用免疫調(diào)節(jié)劑（immunomodulator）對養(yǎng)殖欲裂進行疾病的預防，已經(jīng)被國內(nèi)、外的養(yǎng)殖魚類病害研究者，用大量的試驗研究結(jié)果證明，是行之有效的預防養(yǎng)殖魚類疾病的重要措施。

本文在簡要介紹水產(chǎn)用免疫調(diào)節(jié)劑的基本概念的基礎(chǔ)上，重點介紹了我們采用免疫多糖，對危害養(yǎng)殖異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）的造血器官壞死癥（圖1），以及鯉（Cyprinus carpio）皰疹病毒病（圖2）的免疫預防效果。旨在幫助水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者正確地使用免疫調(diào)節(jié)劑，預防養(yǎng)殖魚類的各種疾病。

1異育銀鯽和鯉皰疹病毒病的特征

1.1異育銀鯽的造血器官壞死癥

從2008年開始，江蘇省鹽城地區(qū)的養(yǎng)殖異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）開始流行由皰疹病毒（屬于鯉皰疹病毒2型，Cyprinid herpesvirus 2， CyHV-2）引起的造血器官壞死癥（水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者將這種疾病俗稱為“鰓出血”）。流行病學調(diào)查結(jié)果證明，異育銀鯽的造血器官壞死癥，主要在每年的4~6月和8~11月初流行，其中在每年的5月和10月份分別出現(xiàn)兩個流行高峰期。

每年當水溫處于上升期時，異育銀鯽造血器官壞死癥流行的水溫范圍為15.0~28.0℃，即當池塘水溫自然上升至15.0℃時，異育銀鯽造血器官壞死癥開始發(fā)生，而繼續(xù)上升至29.0℃或者以上時，這種疾病就幾乎停止流行。當水溫進入下降期時，即使池塘水溫尚處于28.0℃以上，異育銀鯽造血器官壞死癥也是可以發(fā)生的。

異育銀鯽造血器官壞死癥原本只是在江蘇省鹽城地區(qū)流行的一種惡性傳染病，現(xiàn)在已經(jīng)在全國養(yǎng)殖異育銀鯽的地方均有發(fā)生了。對各地異育銀鯽養(yǎng)殖業(yè)每年均有不同程度地流行與危害。該病一旦發(fā)生，造成的死亡率一般為30.0%~40.0%，嚴重時可達90.0％以上。如果養(yǎng)殖業(yè)者在疾病發(fā)生期間，采用錯誤的處理方法（如采取“致病先殺蟲”的方法等）即可加速患病魚體的死亡，甚至導致整個池塘中異育銀鯽全部死亡的事例也是時有發(fā)生（圖3）。

對于廣大的異育銀鯽養(yǎng)殖業(yè)者而言，現(xiàn)在就采取對異育銀鯽造血器官壞死癥的預防措施，對于減少因這種病害造成嚴重經(jīng)濟損失，是很有必要的。

1.2鯉皰疹病毒病

鯉皰疹病毒病的病原是錦鯉皰疹病毒（Koi herpesvirus，KHV），又稱為鯉皰疹病毒3型（Cyprinid herpesvirus 3，CyHV-3）。

這種疾病于1997年在德國首次報道，一年后由美國科學家在以色列和美國的患病魚類中分離并鑒定到這種病毒。現(xiàn)在這種危害養(yǎng)殖鯉的疾病，已經(jīng)在世界上幾十個國家有了其相關(guān)的報道。

患病魚體顯示出的典型臨床癥狀是，反應(yīng)遲鈍、食欲不振、呼吸困難、常在水面或進水口處游動；鰓出血壞死，眼睛凹陷，頭骨萎縮，皮膚有灰白色斑點（圖2），黏液分泌增多；鱗片有血絲，體表無明顯損傷，感染后第7~10d開始出現(xiàn)死亡，2~3周后死亡率可達100%。同池飼養(yǎng)的其他種類的魚類，則不會受到感染、發(fā)病。

鯉皰疹病毒病多發(fā)于春、秋季。該病毒在細胞中增殖的最佳溫度是20℃~25℃，高于30℃和低于4℃不能增殖，對溫度的最低要求是10℃。但是，在不適宜的溫度下，病毒也可能在細胞中持續(xù)存在，當再返回到適宜溫度時，病毒基因的轉(zhuǎn)錄再次活化，產(chǎn)生細胞病變。

當水溫為16℃~27℃時，鯉皰疹病毒病最容易暴發(fā)，根據(jù)水溫變化的情況，該病潛伏期為7~21d左右。在13℃低溫條件下，養(yǎng)殖鯉會感染這種病毒，但一般不會發(fā)病。若養(yǎng)殖鯉已感染了該病毒，水溫位于18℃~27℃的時間持續(xù)越長，這種疾病暴發(fā)的可能性就越大。

病魚最明顯的受到損傷的部位是在鰓。感染后第２d，鰓薄片減少，并伴隨炎性細胞浸潤；第６d起鰓結(jié)構(gòu)消失，鰓弓內(nèi)血管充血，鰓耙變細。鰓的損傷早于其他組織（因此，在我國北方地區(qū)，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者將這種疾病稱為“急性爛鰓病”）。除了鰓以外，最主要的病變發(fā)生在腎。感染后第2d在腎小管周圍出現(xiàn)炎性浸潤；第6d出現(xiàn)嚴重的間質(zhì)性炎癥，并伴隨著血管充血。隨后炎癥加重，并伴隨有一些腎單位管狀上皮細胞的輕微變性。另外，其他器官也出現(xiàn)不同的病變。肝實質(zhì)出現(xiàn)輕微炎性浸潤，腦組織切片顯示局灶性腦膜和腦膜旁炎癥。

鯉皰疹病毒病發(fā)病迅速，死亡速度快，給治療帶來了極大的挑戰(zhàn)，一旦人們發(fā)現(xiàn)這種魚病，至今能夠采取的處理方法都是將患病魚殺滅，切斷病毒源。因此做好該病的預防工作具有重要意義。

由于 鯉皰疹病毒對溫度敏感，因此保持水體溫度恒定，適當控制水溫在一定程度上可以防治鯉皰疹病毒病發(fā)生。同時向水體定期加入益生菌和定向營養(yǎng)劑，維持水質(zhì)環(huán)境穩(wěn)定，可以有效預防養(yǎng)殖鯉爛鰓病等常見細菌性疾病。

2預防養(yǎng)殖異育銀鯽和鯉皰疹病毒病的免疫多糖投喂程序

2.1預防養(yǎng)殖異育銀鯽皰疹病毒病的免疫多糖投喂程序試驗與結(jié)果

我們曾經(jīng)在江蘇省射陽縣黃沙港鎮(zhèn)的裕達水產(chǎn)養(yǎng)殖場，在養(yǎng)殖池塘中設(shè)置網(wǎng)箱，完成了采用多種免疫多糖類物質(zhì)預防養(yǎng)殖異育銀鯽皰疹病毒病的試驗（圖4）。

將500尾來源相同、活潑無外傷的體重為（113.5±5.5）g的異育銀鯽，仔細挑選后放在同一個網(wǎng)箱中飼養(yǎng)。在同一個池塘中放置的30個條件相同網(wǎng)箱，將7個網(wǎng)箱設(shè)置為投喂同一種免疫多糖類物質(zhì)的1個試驗組，在各組每個網(wǎng)箱中投喂不同劑量的含有免疫多糖類物質(zhì)的飼料，在28個網(wǎng)箱中共投喂4種免疫多糖飼料，另設(shè)2個不投喂含有免疫多糖飼料的網(wǎng)箱，作為對照網(wǎng)箱。

試驗期間溫度變化在17.5~25.5℃之間，每天上午8:00、中午13:00和下午16:30各投喂餌料1次，投餌量以使異育銀鯽達到飽足并有少量剩余為準。所用飼料為惠裕飼料科技有限公司生產(chǎn)的異育銀鯽專用飼料。

根據(jù)各組試驗異育銀鯽的總體重，在定量的飼料中添加不同劑量的免疫多糖，制作成內(nèi)含不同水平的免疫多糖的顆粒飼料后，分別投喂各組試驗異育銀鯽，即在Ⅰ~Ⅵ組的各7個網(wǎng)箱中，按照魚體重投喂免疫調(diào)節(jié)劑的劑量分別為100 mg/kg、200.0 mg/kg、300.0 mg/kg、400.0 mg/kg、500.0 mg/kg、600.0 mg/kg和600.0 mg/kg。在余下的2個網(wǎng)箱中，投喂未添加免疫多糖的普通飼料作為對照組。每天投喂相當于魚體重2.5%的飼料，連續(xù)投喂28 d。

投喂28d時間結(jié)束后，從試驗和對照組網(wǎng)箱中隨機各撈取50尾供試異育銀鯽，放養(yǎng)在盛水2.0M3的圓形塑料水族箱中充氣飼養(yǎng)。在每個水族箱中放置5尾體重300.0g左右的具有“鰓出血”典型癥狀的病魚，與50尾供試魚同居飼養(yǎng)2 d后將其撈出，將供試魚繼續(xù)飼養(yǎng)觀察21 d。對在此期間死亡的異育銀鯽進行解剖觀察，判斷是否由于感染“鰓出血”疾病而致死，統(tǒng)計各組的死亡率，依下式計算相對免疫保護率（Relative percent survival，RPS）。

免疫保護率（RPS）= [1-（免疫組死亡率/對照組死亡率）]×100

對照及試驗魚在與典型病魚同居感染攻毒后，經(jīng)過投喂免疫多糖的異育銀鯽均獲得了一定的免疫保護率，而在飼料中添加免疫多糖的試驗組異育銀鯽死亡率明顯的低于未添加免疫多糖的對照組，與對照組相比，當酵母免疫多糖在飼料中的添加量為500.0 mg/kg時，受免異育銀鯽的獲得了最高的免疫保護率。但是，各個添加酵母免疫多糖的試驗組之間的免疫保護率則未出現(xiàn)顯著性差別（t測驗，P>0.05）。

2.2在江蘇省射陽縣和遼寧省沈陽市遼中區(qū)投喂酵母免疫多糖預防養(yǎng)殖異育銀鯽和鯉皰疹病毒病的結(jié)果

根據(jù)上述網(wǎng)箱內(nèi)試驗獲得的結(jié)果，選擇酵母免疫多糖作為預防養(yǎng)殖魚類病毒病的免疫調(diào)節(jié)劑，添加在養(yǎng)殖魚類飼料中制備成所謂“免疫飼料”。根據(jù)養(yǎng)殖魚類病毒性疾病發(fā)生的時間，提前投喂養(yǎng)殖異育銀鯽和鯉，預防養(yǎng)殖異育銀鯽的造血器官壞死癥和養(yǎng)殖鯉的鯉皰疹病毒病。結(jié)果證明，連續(xù)投喂免疫飼料28d，可以有效地預防病毒性疾病的發(fā)生。

根據(jù)我們在江蘇省鹽城地區(qū)，完成的對養(yǎng)殖異育銀鯽造血器官壞死癥流行病學調(diào)查結(jié)果，異育銀鯽造血器官壞死癥，主要在每年的4~6月和8~11月初流行，其中在每年的5月和10月份分別出現(xiàn)異育銀鯽造血器官壞死癥兩個流行高峰期。

在每年3月底，異育銀鯽造血器官壞死癥進入流行期之前，開始投喂免疫飼料，預防第一個發(fā)病高峰，當水溫進入下降期時，再繼續(xù)投喂28d免疫飼料，可成功地預防第二個發(fā)病高峰到來的疾病。

預防養(yǎng)殖魚類病毒性疾病的主要措施，就是采取能調(diào)節(jié)養(yǎng)殖魚類機體免疫防御機能的方法。可以在其養(yǎng)殖魚類的飼料中添加適宜的免疫調(diào)節(jié)劑（可以采取安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)的酵母細胞壁、酵母水解物；北京英惠爾生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的酵母培養(yǎng)物等，根據(jù)水溫的不同，在每噸飼料中添加4.0~5.0kg，水溫低多添加、水溫高時少添加），在每年開始投喂飼料時（在全國大多數(shù)地區(qū)大約是4月初，水溫上升到12℃左右）和8月中旬（池塘水溫開始下降以前20天左右），每次連續(xù)投喂添加有免疫調(diào)節(jié)劑的飼料28d左右。通過調(diào)節(jié)養(yǎng)殖魚類自身的非特異性免疫機能，達到有效提高抵抗病毒性病原感染的能力。

(來源：農(nóng)財寶典。文章內(nèi)容有修改)

(作者：華中農(nóng)業(yè)大學 陳昌福，武漢科研時代生物技術(shù)有限公司 周鑫軍)