魚類淋巴囊腫病癥狀及防治：最早發(fā)現(xiàn)的魚類病毒病——慢性皮膚瘤

魚類淋巴囊腫病是由淋巴囊腫病毒（LCDV）感染引起魚類的一種典型的皮膚和淺表組織慢性病，它是最早發(fā)現(xiàn)的魚類病毒性疾病。該病的普遍癥狀是病魚體表長有瘤狀物，嚴重時內(nèi)臟組織器官也出現(xiàn)病變。魚類淋巴囊腫病的較大規(guī)模流行最先發(fā)生在歐洲的牙鲆養(yǎng)殖場，隨后在南美和北美的養(yǎng)魚場中均暴發(fā)過；近年來開始在亞洲流行。

患病芽鲆淋巴囊腫（鐘妮娜）

我國在1992年養(yǎng)殖的云紋石斑魚中首次發(fā)現(xiàn)了淋巴囊腫病。1997年山東威海地區(qū)的牙鲆養(yǎng)殖場大面積暴發(fā)了淋巴囊腫病。該病通常不具有致死性，但是病魚體質(zhì)瘦弱、生長遲緩、外表異樣而失去商品價值，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。

1.病原病因

病原是淋巴囊腫病毒，病因是由淋巴囊腫病毒侵入導(dǎo)致患病。淋巴囊腫病毒，屬虹彩病毒科(病毒經(jīng)過提純結(jié)晶后，在斜射光線照射下呈現(xiàn)藍紫色的虹彩光澤，故被命名為虹彩病毒)。病毒粒子二十面體，其輪廓呈六角形，有囊膜，囊膜厚約50～70nm。大小視宿主而不同，病毒核心是纏繞在一起的DNA 纖絲團，有可辨認的衣殼。在18至20℃的水中5天，冰凍干燥后在上述溫度下150天及在零下20℃下兩年后感染力均未喪失。能用甘油和乙醚滅活。病毒能在BF-2、LBF-1、GF-1、SP-1、SP-2 等細胞系上復(fù)制，引起細胞出現(xiàn)巨型囊腫細胞，且在邊緣有嗜堿性胞漿包涵體，生長溫度20～30℃，適宜溫度為23～25℃。

患病鱸魚尾部、鰭條與皮膚上出現(xiàn)囊腫物（仿Leong Tak Seng）

淋巴囊腫病可在多種海水魚、淡水魚中發(fā)生，發(fā)病率高達80%。感染可經(jīng)由皮膚磨損處發(fā)生，在淋巴囊腫破裂或剝落后，病毒即可散出。

2.流行情況

淋巴囊腫病流行很廣，在全球范圍內(nèi)均有發(fā)生，100多種海水、淡水魚類均能患病，主要危害海水魚類，特別是鱸形目、鰈形目、鲀形目魚類苗種階段和1齡魚種，發(fā)病后2個月死亡率達30%以上，2齡以上的魚很少出現(xiàn)死亡，但病魚外表難看失去商品價值。該病一年四季都可發(fā)生。

患病牙鲆背部形成大量囊腫物（仿江育林）

淋巴囊腫病是一種非急性病，對寄主的影響小引起死亡少。成熟的淋巴囊腫細胞破裂后釋放病毒，通過水、鰓及損傷的皮膚、鰭入侵，也可經(jīng)口感染，高密度養(yǎng)殖和外傷會增加感染幾率。淋巴囊腫病的發(fā)生與養(yǎng)殖水溫?zé)o密切關(guān)系，而與苗種本身的體質(zhì)、攜帶病毒及病毒的積累程度有關(guān)，在低密度和良好養(yǎng)殖條件下一般不會引起大量的死亡。網(wǎng)箱和室內(nèi)水泥池工廠化養(yǎng)殖的感染率可高達90%以上，池塘養(yǎng)殖的感染率為20%~30%。一般皮膚擦傷或寄生蟲機械損傷的傷口，往往成為病毒侵入的門戶。

發(fā)病芽鲆

3.癥狀及病理變化

患病魚類的口唇部、軀干皮膚、鰭及尾部可見單個或成群的魚卵狀或念珠狀物水泡狀腫脹物，尤其在背鰭、尾鰭處較多。大小不一，大的有如棗或核桃大。病灶的顏色由白色、淡灰色至粉紅色，成熟的腫脹物可輕微出血。發(fā)病魚在病情較輕時，行為攝食基本正常，但生長緩慢；病情嚴重時其食欲下降，甚至不攝食，并發(fā)生死亡。在病魚的皮膚、鰭和尾部等處也會出現(xiàn)許多分散或聚集成團的大小不等的水泡狀囊腫物，偶爾在鰓絲、咽喉、肌肉、腸壁、腸系膜、圍心膜、腹膜、肝、脾等組織器官上也有發(fā)生。水泡狀的囊脹物是魚的真皮結(jié)締組織中的成纖維細胞被病毒感染后肥大而成，并在胞漿內(nèi)可見大量的包涵體和病毒顆粒。

(牙鲆發(fā)病)

淋巴囊腫病是一種慢性皮膚瘤，從外觀上看近似于體表乳頭狀腫瘤。感染率達30％，病魚的囊腫物多呈白色、淡灰色、灰黃色，有的帶有出血灶而顯粉紅色部分感染的魚體表囊腫物脫落，恢復(fù)正常并可在一定時間內(nèi)具有免疫力。有的在口唇部影響進食的病魚則需外科手術(shù)摘除，有的病魚的囊腫可以自行脫落，病癥輕的牙鲆攝食正常且有自愈現(xiàn)象。自愈大都發(fā)生在牙鲆大批發(fā)病的2～3個月之后，但自愈牙鲆體質(zhì)弱，在運輸過程中的死亡率可以超過80%，失去了商品價值。患病個體生長緩慢，體形消瘦，一是因為淋巴囊腫瘤狀物對病魚的呼吸與運動造成了障礙而影響了攝食，二是因為隨著病毒侵入內(nèi)臟器官，尤其是心臟與腎臟功能的降低而導(dǎo)致體質(zhì)惡化。

4.診斷方法

從外觀癥狀及病理變化肉眼見有瘤狀物，即可基本作出初診。但發(fā)病初期可能會與小瓜蟲病、孢子蟲病的胞囊容易混淆，后兩者可在顯微鏡下檢出胞囊內(nèi)活動的蟲體。

患病魚體表出現(xiàn)大量囊腫物（仿D．W．Bruno）

確診可用BF-2、LBF-1等細胞株分離培養(yǎng)病毒，通過電鏡觀察到病毒粒子。Nishida(1998)用ELISA檢測牙鲆抗LCDV抗體，建立了LCDV的ELISA檢測方法；戰(zhàn)文斌（2007）用抗LCDV單克隆抗體對牙鲆組織中的LCDV進行間接免疫熒光檢測，建立了LCDV的免疫熒光檢測方法。

囊腫物壓片見細胞內(nèi)包涵體（仿R．Herbert）

病理組織切片：超薄切片用電鏡觀察，可見淋巴囊腫細胞內(nèi)有大量20面體的病毒顆粒。具有厚的透明囊，在細胞中央有1個大核和核仁，胞漿內(nèi)有多個嗜堿性包涵體；開始老化的淋巴囊腫細胞可能缺乏核及包涵體，但大量的嗜酸性胞漿是同質(zhì)的。囊腫細胞在切片組織中相互擠壓、呈不規(guī)則形；細胞和細胞核肥大化，細胞體積約為正常的100倍。直徑可達100μm，有時可達1mm；細胞質(zhì)內(nèi)有許多嗜堿性、具網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)、形狀不規(guī)則的大型包涵體。

5.預(yù)防措施

1、魚池進行徹底清塘消毒。

2、引進親本、苗種應(yīng)嚴格檢疫，發(fā)現(xiàn)攜帶病原者，應(yīng)徹底銷毀。

3、發(fā)現(xiàn)病魚及時撈出。

4、用20毫克每升聚維酮碘溶液浸浴5-10分鐘。

5、有研究發(fā)現(xiàn)，使用中草藥制劑對淋巴囊腫病毒進行預(yù)防和治療，治愈率達80％，用于預(yù)防發(fā)病率低于10％的魚群。Yoshimizu等研制出LCDV滅活疫苗，并證實其對牙鲆有保護作用，但是該制備方法不適合規(guī)模化生產(chǎn)。

6.治療方法

1、每公斤體重用聚維酮碘(或者蛋氨氨酸碘)10毫克拌入餌料中投喂，每日1次，連續(xù)投喂5-7天。

2、每公斤體重用氟苯尼考60-80毫克，配合適量多種維生素拌料投喂，每日1次，連續(xù)投喂5-7天。

3、將病魚囊腫割除（囊腫在量少和輕度時），并用濃度為每立方米水300毫升福爾馬林浸浴30~60分鐘。

4、市售過氧化氫(雙氧水、H2O2)（30%濃度）稀釋至3%，以此為母液，配成50毫克/升的濃度浸洗20分鐘，然后將魚放入22-25℃水溫飼養(yǎng)一段時間后，淋巴囊腫會自行脫落，效果顯著。

5、投喂抗生素藥餌，每公斤飼料拌氟哌酸50~100mg或土霉素1~2g，連續(xù)投喂5~10天，可防止繼發(fā)性細菌感染。

6、施用現(xiàn)行市售的納米銀、頭孢、蛋氨酸碘等新型抗殺病毒藥物。

7、本病應(yīng)以防為主。受染病魚多為無良法治療，但皮膚患處的囊脹物有時也會自行脫落而痊愈。

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