牙鲆的病毒病及其防控方法

      1 病毒性出血性敗血癥

在1996年，該病在四國(guó)的養(yǎng)殖場(chǎng)首先發(fā)生，其后發(fā)病海域擴(kuò)大到日本西部海域的多個(gè)縣的牙鲆養(yǎng)殖場(chǎng)。

【癥狀】患病魚(yú)外觀(guān)可見(jiàn)體色變黑、腹水導(dǎo)致的腹部膨大的特征性變化。解剖檢查時(shí)可見(jiàn)病魚(yú)腹腔和圍心腔內(nèi)積水，肝臟淤血或褪色，多見(jiàn)肝臟、脾臟腫大。有時(shí)可見(jiàn)肝臟的點(diǎn)狀或斑狀出血，生殖腺出血，也可能看到肌肉內(nèi)出血。

在海面養(yǎng)殖和陸地水槽養(yǎng)殖的魚(yú)均可發(fā)生這種疾病。疾病流行期的水溫位于8～15℃之間，但是，在18℃水溫條件下也可能發(fā)生。另外，從稚魚(yú)到成魚(yú)均可發(fā)病。低水溫期發(fā)病時(shí)多為慢性死亡的病例，魚(yú)群的累計(jì)死亡率各不相同，從百分之幾到90%左右。在養(yǎng)殖場(chǎng)可見(jiàn)這種疾病病原的水平傳播現(xiàn)象。

【病因】病原為病毒性出血性敗血癥病毒（viral hemorrhagic sepncenna virus，VHSV），屬于彈狀病毒科，病毒粒子呈子彈狀，有囊膜。依據(jù)G和P遺傳基因的分型，日本國(guó)內(nèi)分離到的病毒株，1株為歐洲型，其他均為北美型病毒株。牙鲆VHSV和已經(jīng)報(bào)道的牙鲆彈狀病毒（HIRRV）相比，在結(jié)構(gòu)蛋白分子量、敏感性細(xì)胞以及血清學(xué)特性上均存在差異。

這種疾病具有在低水溫期發(fā)病的特點(diǎn)，這是值得注意的。牙鲆彈狀病毒病伴有嚴(yán)重的肌肉內(nèi)出血，而該病基本看不到這種病例變化，因此，可以作為區(qū)別這兩種疾病的指標(biāo)。確診這種疾病可用FHM細(xì)胞進(jìn)行病毒分離以及使用間接免疫熒光抗體法進(jìn)行。

【對(duì)策】除合理飼養(yǎng)管理（可能的情況下升高飼養(yǎng)水溫等）之外，一般認(rèn)為及時(shí)處理病魚(yú)，徹底消毒，使用干凈的餌料，不引入可疑的病魚(yú)等是防治該病毒病的有效對(duì)策。

      2 牙鲆彈狀病毒病

這種病是1984年3月份被初次確認(rèn)的疾病，從冬天到春天感染當(dāng)年魚(yú)?；疾◆~(yú)死亡率由2%～90%，在不同的養(yǎng)殖場(chǎng)差異很大。該病產(chǎn)生的危害曾經(jīng)在短時(shí)間內(nèi)迅速擴(kuò)大，但是，最近已經(jīng)沒(méi)有這種疾病的發(fā)生。

【癥狀】病魚(yú)在外觀(guān)上以鰭條發(fā)紅為主要癥狀，其中也能見(jiàn)到腹部膨脹的個(gè)體。體內(nèi)癥狀主要以腹腔積水、肌肉內(nèi)出血以及生殖腺的淤血為特征。

【病因】病原是屬于彈狀病毒科的病毒，命名為牙鲆彈狀病毒（Rhabdovirus olivaceus），一般稱(chēng)為牙鲆彈狀病毒（HIRRV）。該病毒可以用RTG-2細(xì)胞進(jìn)行分離，觀(guān)察到IHNV樣細(xì)胞病變（CPE）。

【對(duì)策】尚沒(méi)有有效的防治對(duì)策。不過(guò)，將水溫升高到18℃以上，疾病會(huì)自然平息。

      3 病毒性神經(jīng)壞死病

海產(chǎn)魚(yú)病毒性神經(jīng)壞死病（VNN）最初是發(fā)生在日本的石鯛，隨后這種病在多種魚(yú)類(lèi)中均有發(fā)生，并造成了嚴(yán)重的危害。此外，東南亞、大洋洲、歐洲以及美國(guó)也有歐洲真鱸、斑雙棘石斑魚(yú)、花斑、星鰈等30種以上的魚(yú)類(lèi)發(fā)生了這種疾病。該病毒還能感染天然魚(yú)。

1992年，在廣島縣下屬的牙鲆種苗生產(chǎn)場(chǎng)的稚魚(yú)（17～18mm）首先被確認(rèn)發(fā)生了這種疾病。隨后，該病給牙鲆的養(yǎng)殖場(chǎng)和種苗生產(chǎn)場(chǎng)帶來(lái)了重大損失。

【癥狀】雖然這種疾病在體長(zhǎng)40mm以上的魚(yú)體中的發(fā)病率較高，即使體長(zhǎng)20mm以下的小型魚(yú)體也可發(fā)生。通常在外觀(guān)和解剖檢查時(shí)，難以見(jiàn)到具有特征性的癥狀，不過(guò)，在部分個(gè)體中可見(jiàn)到腦發(fā)紅，受感染組織的神經(jīng)細(xì)胞存在顯著的空泡變性。

【病因】和其他魚(yú)種患該病的情況一樣，原因病毒為粒子大小約27nm正二十面體、沒(méi)有囊膜的RNA病毒，該病毒屬于野田病毒科（Alphanodavirus）的β野田病毒屬（Betanoda virus）。

可用PCR法進(jìn)行診斷。確診時(shí)需要確認(rèn)病魚(yú)神經(jīng)組織（腦、脊髓、網(wǎng)膜）的空泡變性和用熒光抗體法、電鏡法觀(guān)察到的病毒顆粒。另外，使用SSN-1細(xì)胞分離培養(yǎng)也可診斷這種疾病。

一般認(rèn)為，該病的傳播方式是垂直和水平傳播。從牙鲆的親魚(yú)的卵巢、精巢所監(jiān)測(cè)到的病毒基因、親魚(yú)血清中抗體檢查、親魚(yú)的病毒檢測(cè)以及仔魚(yú)發(fā)病之間的相關(guān)性來(lái)看，認(rèn)為該病毒可通過(guò)受精卵從親魚(yú)垂直傳遞給仔魚(yú)。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證明了從死亡個(gè)體到健康仔魚(yú)存在病毒的水平傳播。

【對(duì)策】由于該病的感染源是產(chǎn)卵親魚(yú)，因此獲取不帶毒的親魚(yú)或病毒感染性低的親魚(yú)所產(chǎn)的卵是最重要的。臭氧消毒受精卵也有預(yù)防疾病的效果。

此外，作為水平感染的防治對(duì)策，應(yīng)降低仔魚(yú)的飼養(yǎng)密度，消毒飼養(yǎng)用水以及用具，限制其他人員進(jìn)入飼養(yǎng)設(shè)施，消毒飼養(yǎng)員的手臂，注意通風(fēng)，防止水槽間的飛沫感染等。

通過(guò)實(shí)施以上綜合預(yù)防措施，可以降低牙鲆的VNN發(fā)病率。

4 水生雙片段RNA病毒病

1986年3月，該病在日本國(guó)愛(ài)媛縣民營(yíng)牙鲆種苗生產(chǎn)場(chǎng)培育的稚魚(yú)種首次被確認(rèn)。1987年以后，這種疾病在日本西部各地的種苗生產(chǎn)場(chǎng)和養(yǎng)殖場(chǎng)呈現(xiàn)流行趨勢(shì)。到1990年前后，給1～2.5g的稚魚(yú)帶來(lái)了很大的危害，隨后該病的危害又逐漸減輕了。

這種疾病的癥狀主要有3個(gè)類(lèi)型的特征性病征。即腹腔積水導(dǎo)致腹部膨大的所謂腹水型，腦及脊髓出血的所謂腦炎型以及體色變黑的所謂黑變型。腹水型和黑變型的病魚(yú)同時(shí)可見(jiàn)其肝臟褪色或透明化的內(nèi)部癥狀，腦炎型則未見(jiàn)有顯著的病變。

【病因】病因?yàn)殡p片段RNA病毒科的水生雙片段RNA病毒屬（Aquabirnavirus）的被稱(chēng)作YTAV的病毒感染引起。這種病毒可用CHSE-214等培養(yǎng)細(xì)胞分離，病毒粒子呈平面六角形，平均直徑63nm。

【對(duì)策】將飼育水溫降至20℃以下，水溫越低危害越輕。為了預(yù)防該病的發(fā)生，應(yīng)避免從懷疑被污染的養(yǎng)殖場(chǎng)引進(jìn)受精卵、魚(yú)苗和親魚(yú)。

5 病毒性表皮增生癥

這種疾病在孵化后10～25日齡的仔魚(yú)（全長(zhǎng)7～10mm）發(fā)生，發(fā)病后大多在2周之內(nèi)全部死亡。

雖然這種疾病有時(shí)也發(fā)生在變態(tài)后的稚魚(yú)（在池底部的稚魚(yú)）中，不過(guò)，這種病主要還是發(fā)生在牙鲆仔魚(yú)期，因?yàn)閭魅拘苑浅?qiáng)，因此，要特別注意防止該病的水平傳染。

【癥狀】在發(fā)病的初期，可發(fā)現(xiàn)患病魚(yú)攝食不良，在近水面無(wú)力地游泳。部分魚(yú)體時(shí)可見(jiàn)體色變黑。肉眼可見(jiàn)鰭條特征性的白濁，體表細(xì)胞增生，鰭條的表面可見(jiàn)許多球形化的細(xì)胞。

病理組織學(xué)觀(guān)察可見(jiàn)表皮細(xì)胞的顯著增生，其他臟器未見(jiàn)異常。

【病因】這種疾病是皰疹病毒之一的牙鲆皰疹病毒（FHV）感染導(dǎo)致的表皮細(xì)胞增生性疾病。仔魚(yú)期的牙鲆由于鰓不發(fā)達(dá)，要借助皮膚進(jìn)行呼吸。由于患病魚(yú)皮膚細(xì)胞增生多層化，會(huì)阻礙其呼吸。另外，表皮增生可降低患病魚(yú)體表的離子調(diào)節(jié)機(jī)能，這些被認(rèn)為是導(dǎo)致患病魚(yú)死亡的病因。

病魚(yú)的表皮細(xì)胞顯著增生，但僅憑病魚(yú)的外觀(guān)癥狀診斷該病是不準(zhǔn)確的。過(guò)去是采用特異性抗血清的間接熒光抗體法以及電子顯微鏡確認(rèn)表皮細(xì)胞內(nèi)的病毒顆粒。最近開(kāi)發(fā)出來(lái)的PCR法，可以進(jìn)行確診。

【對(duì)策】由于感染途徑不明，無(wú)法采取有效防控對(duì)策。因此，主要是依靠預(yù)防。為了阻斷來(lái)自飼育水FHV的侵入，可以進(jìn)行紫外線(xiàn)照射（4000μW·s/cm2以上）處理。

另外，使用一般的消毒劑（酒精、氯制劑）就可滅活FHV，因此可以設(shè)置消毒槽，防止通過(guò)手足媒介向飼育場(chǎng)傳人FHV。

在20℃以下的水溫飼育可導(dǎo)致患病魚(yú)癥狀?lèi)夯虼?，用適當(dāng)?shù)乃疁仞B(yǎng)魚(yú)很重要。

6 淋巴囊腫病

很早以前，人們就知道魚(yú)類(lèi)有這種病毒病，在牙鲆、真鯛、五條鰤、真鱸、圓斑星鰈等魚(yú)類(lèi)有發(fā)病的報(bào)道。

特別是養(yǎng)殖達(dá)到商品魚(yú)規(guī)格的牙鲆常常發(fā)生這種疾病，因?yàn)槠浠疾◆~(yú)外觀(guān)極其難看，失去商品價(jià)值，故這種疾病是不能輕視的魚(yú)病之一。

【癥狀】該病發(fā)生在春天到初夏期間，多在高水溫期終止，近來(lái)也有常年發(fā)病的漁場(chǎng)。通常為散見(jiàn)，有時(shí)也會(huì)帶來(lái)重大的損失。

外部特征為頭部、軀干和鰭條等的表面可見(jiàn)米粒狀到直徑3cm的白色細(xì)胞團(tuán)塊，嚴(yán)重時(shí)覆蓋患病魚(yú)體表可達(dá)1/3。

已確認(rèn)有過(guò)該病發(fā)病史的大齡魚(yú)體很少再發(fā)生這種疾病。

【病因】該病是由屬于虹彩病毒科（Iridoriridae）的淋巴囊腫病病毒（lymphocystis disease virus，LCDV）引起，在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞團(tuán)塊，可見(jiàn)200～500μm的巨大細(xì)胞。在這些細(xì)胞中可見(jiàn)到巨大化的細(xì)胞核和在細(xì)胞膜周邊的棒狀或球形的包涵體，電鏡下可見(jiàn)直徑200nm左右呈五、六角形的病毒顆粒。

一般認(rèn)為這種病毒傳播能力比較弱，高密度飼養(yǎng)的方式有增加發(fā)病率的傾向，也可以認(rèn)為是與患病魚(yú)接觸而導(dǎo)致傳染。

【對(duì)策】現(xiàn)在尚未確立治療方法，一般的處理方法是，除去嚴(yán)重的患病魚(yú)，等待自愈。最近又報(bào)道指出，根據(jù)定量形質(zhì)分析（QTL分析）技術(shù)，為了選擇耐病毒魚(yú)而開(kāi)發(fā)了DNA標(biāo)記。而且依據(jù)這個(gè)DNA標(biāo)記進(jìn)行選育，現(xiàn)在已經(jīng)有抗該病毒的魚(yú)種銷(xiāo)售了，有可能就引進(jìn)這種抗病毒魚(yú)，減少這種疾病的危害。