水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中的“弧菌“

      你知道嗎？奠定了歐洲文明基礎(chǔ)的古希臘居然是毀于一場聞所未聞的大瘟疫；羅馬帝國的命運(yùn)居然也是由大瘟疫而改變；令人難以置信的是，在戰(zhàn)爭之外居然還有另外一場恐怖的大戰(zhàn)-- 瘟疫。更令人難以置信的是，中國東漢末年三國鼎立局面的形成、基督教的興衰、文藝復(fù)興時(shí)期的到來、拿破侖命運(yùn)的轉(zhuǎn)折，居然也都掌握在一只看不見的黑手 --大瘟疫上。了解大瘟疫的發(fā)生歷史，我們也許可以找到使人類遠(yuǎn)離瘟疫的方法。
      那么對于水產(chǎn)養(yǎng)殖朋友們來說，了解弧菌的特點(diǎn)也許能讓我們更好的防御病害的產(chǎn)生。今天讓我們深入的了解這些橫行于水產(chǎn)業(yè)的霸主究竟是何面目。
      弧菌科介紹
     外觀：菌體短小、彎曲成弧形或直桿狀、具有一端單一鞭毛、運(yùn)動(dòng)迅速；
     革蘭氏染色：革蘭氏染色陰性；
     呼吸：兼性厭氧，發(fā)酵葡萄糖，大多數(shù)菌株氧化酶陽性；
     生長需求：許多菌株生長需要2%~3%氯化鈉；
     分布：弧菌科細(xì)菌廣泛分布于自然界，以水中最為多見，其中有一些種對人類致病。
     弧菌科家族成員
     弧菌屬（Vibrio）
     氣單胞菌屬（Aeromonas）
     鄰單胞菌屬（Plesiomonas）
     發(fā)光桿菌屬（Photobacterium）
     發(fā)光桿菌屬主要存在于海水中，對人類不致病
     弧菌屬
     常見的弧菌屬有36種，其中致病性弧菌就有12種，其中副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌等最為常見。
     菌落特征：
     在TCBS平板上，呈黃色的菌落有可能是溶藻弧菌、麥?zhǔn)匣【蚧魜y弧菌等，呈米黃色的有可能是河弧菌，綠色是副溶血弧菌。在科馬嘉弧菌顯色瓊脂上，粉紫色菌落可能是副溶血弧菌，白色菌落可能是溶藻弧菌，藍(lán)色或綠色菌落的可能是霍亂弧菌、創(chuàng)傷弧菌或其他弧菌等。（2012 杭莉 ）
      副溶血弧菌
      具有嗜鹽性（halophilic）
      對酸敏感，在普通食醋中5分鐘即可殺死；
      對熱的抵抗力也較弱；
      對水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的危害極大；
      主要引起食物中毒和急性腹瀉、還可引起傷口感染和菌血癥。
      培養(yǎng)特性
      營養(yǎng)要求不高；
      需氧或兼性厭氧；
      在無鹽培養(yǎng)基上不能生長，最適合生長的氯化鈉濃度為3.5%，超過8%不能生長；
      最適pH為7.7~8.0，但pH9.5時(shí)仍能生長，最適生長溫度為30~37℃。
      抵抗力
      抵抗力弱；
      不耐熱，90℃ 1min即被殺死；
      淡水中不超過2日，但海水中能存活47天以上；
      耐堿怕酸，1%醋酸或50%食醋中1min死亡。
      致病因子：TDH、TRH以及菌毛
     最適宜的培養(yǎng)基：
     溫度為30℃—37℃，含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低于0.5%則不生長），pH值為8.0—8.5。當(dāng)pH6以下即不能生長，在固體培養(yǎng)基上菌落常隆起，圓形，表面光滑，濕潤。在3%一3．5%含鹽水中繁殖迅速，每8～9min為一周期。對高溫抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被殺死。能夠還原硝酸鹽。本菌對常用消毒劑抵抗力很弱，可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。
分布極廣，主要分布在海水和水產(chǎn)品中，我國華東地區(qū)沿岸的海水的副溶血性弧菌檢出率為47.5%~66.5%，海產(chǎn)魚蝦的平均帶菌率為45.6%~48.7%，夏季可高達(dá)90%以上。除了海產(chǎn)品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水魚等都發(fā)現(xiàn)有副溶血性弧菌的存在。
      創(chuàng)傷弧菌和燦爛弧菌
      創(chuàng)傷弧菌(海洋弧菌)、燦爛弧菌，兩種弧菌是海水養(yǎng)殖魚類危害較大的弧菌。目前報(bào)道的主要是危害黃姑魚、卵形、鯧鲹、大菱鲆、石鰈、鰻鱺和軍曹魚等 。
      據(jù)報(bào)道，研究人員研究了22味中草藥對創(chuàng)傷弧菌(Vibriovulnificus)和燦爛弧菌(V.splendidus)的體外抑菌作用。結(jié)果顯示，22味中草藥對其均有不同程度的抑制作用；其中,黃連和連翹對創(chuàng)傷弧菌的抑菌和殺菌效果最好，最小抑菌濃度分別為0.49mg/mL和1.95mg/mL，最小殺菌濃度與最小抑菌濃度相同；黃連、黃芩、連翹和黃柏對燦爛弧菌的抑菌和殺菌效果較好，最小抑菌濃度分別為0.98、1.95、1.95和3.90mg/mL，最小殺菌濃度分別為0.98、1.95、1.95和7.81mg/mL。（閆茂倉 2010）
      溶藻弧菌
      1、是弧菌屬細(xì)菌中耐鹽性最強(qiáng)的致病菌，為嗜鹽性弧菌之一，耐鹽30-100g/L。
      2、是一種常見的海洋伺機(jī)性病原體，是引起人類、水生動(dòng)物細(xì)菌性疾病的重要病原之一。其數(shù)量居海水類弧菌之首。
      3、因其生物學(xué)性狀有許多與副溶血性弧菌相似，在《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》第8 版（1974）中將其列為副溶血性弧菌生物I 型菌（副溶血弧菌為生物l 型）。
      4、它也是魚、蝦、貝等海水養(yǎng)殖動(dòng)物的一種條件致病菌，當(dāng)環(huán)境惡化時(shí)機(jī)體免疫機(jī)能下降，溶藻弧菌病容易爆發(fā)，特別當(dāng)水溫在25～32 ℃下容易流行，因此養(yǎng)殖動(dòng)物的溶藻弧菌病多發(fā)生在夏季，爆發(fā)時(shí)往往會(huì)造成水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)巨大經(jīng)濟(jì)損失。（范淑賓 2012）
      抗生素的耐藥性
      溶藻弧菌對青霉素類和糖肽類抗生素有很高的耐藥性；對頭孢4代、β-內(nèi)酰胺/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合劑、喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素及氯霉素均100.0%敏感；頭孢1~4代的耐藥率雖不是持續(xù)降低，但藥物敏感性不斷增高；對同類抗生素的耐藥性也有很大不同，如氨基糖苷類的慶大霉素和丁胺卡那霉素，耐藥率分別為15.2%和72.7%；某些抗生素雖然耐藥率不高，但也不敏感，處于中介敏感范圍，如頭孢噻吩、頭孢呋辛和復(fù)方新諾明（胡瓏玉2013）。
      如何鑒別溶藻弧菌
      溶藻弧菌會(huì)分解TCBS平板中的蔗糖，使其菌落呈黃色，但培養(yǎng)時(shí)間超過24h后，部分菌落會(huì)變成綠色，這是由于培養(yǎng)基中的蔗糖被消耗完全所造成的，因此在使用TCBS培養(yǎng)基對溶藻弧菌進(jìn)行分離時(shí)，應(yīng)選擇在37℃生長24h內(nèi)的典型菌落。同樣能夠在TCBS平板上形成黃色菌落的弧菌還包括霍亂弧菌、鰻弧菌等，但通過CV培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)、10% 嗜鹽性試驗(yàn)和ONPG試驗(yàn)基本可以排除。因此，在對溶藻弧菌進(jìn)行分離鑒定時(shí)，可先用TCBS和CV平板進(jìn)行選擇性分離，再用革蘭氏染色、10%嗜鹽性試驗(yàn)和ONPG試驗(yàn)這三種重要的生理生化指標(biāo)進(jìn)行初步篩選，最后采用分子生物學(xué)方法驗(yàn)證，可在保證分離的準(zhǔn)確性的同時(shí)減少鑒定的工作量。
      鰻弧菌
      鰻弧菌為有鞭毛的革蘭氏陰性細(xì)菌，無莢膜，不形成芽孢，能運(yùn)動(dòng)，氧化酶陽性，對O/129敏感。葡萄糖氧化反應(yīng)呈陽性，具有典型的弧菌屬細(xì)菌特征。當(dāng)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物在不良的環(huán)境條件下，遭遇不利刺激或是受傷時(shí)，會(huì)誘發(fā)疾病的產(chǎn)生。鰻弧菌引起的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病在世界范圍內(nèi)流行，可感染鮭魚、虹鱒、鰻鱺、香魚、鱸魚、鱈魚、大菱鲆、牙鲆、黃魚等。鰻弧菌是條件致病菌，當(dāng)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物在不良的環(huán)境條件下，遭遇不利刺激或是受傷時(shí)，會(huì)誘發(fā)疾病的產(chǎn)生。
      感染鰻弧菌后的魚蝦會(huì)表現(xiàn)出病情逐步加深的癥狀，有研究學(xué)者報(bào)道，部分感染鰻弧菌的魚體表最初出現(xiàn)局部褪色，鰭條、鰭基部及鰓骨下部充血發(fā)紅，肛門紅腫，繼而肌肉組織有彌撒性或點(diǎn)狀出血，體表發(fā)黑，鰭部出現(xiàn)潰爛；解剖檢驗(yàn)時(shí)有明顯的黃色粘稠腹水，腸粘膜組織腐爛脫落，部分魚肝臟壞死。
      哈維氏弧菌
      哈維氏弧菌( Vibrio harveyi ) 是引起水產(chǎn)動(dòng)物特別是海水魚類流行性疾病的一種重要病原,曾經(jīng)在世界范圍內(nèi)引起海水養(yǎng)殖蝦類疾病 ,也引起海水養(yǎng)殖魚類的流行性疾病爆發(fā)。
      擬態(tài)弧菌
      擬態(tài)弧菌(V.mimicus)與不典型的霍亂弧菌關(guān)系密切，其形態(tài)學(xué)、DNA序列及性質(zhì)與霍亂弧菌極相似，但生化反應(yīng)不典型， 1981年從腹瀉患者糞便中檢出該菌，故由國外學(xué)者命名為"擬態(tài)弧菌"。
      擬態(tài)弧菌系革蘭陰性弧菌，具有單鞭毛，有動(dòng)力，與副溶血弧菌、霍亂弧菌一樣屬正常海洋菌叢，廣泛存在于自然界河水、海水和海產(chǎn)品中。菌株在不含鈉或僅含1%氯化鈉的營養(yǎng)肉湯中生長良好，可自水生動(dòng)物中分離出來。
       氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬
       氧化酶陽性，端鞭毛、革蘭陰性桿菌、兼性厭氧。
       根據(jù)表型特征，伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊（第一版）將其歸為弧菌科。
       水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中弧菌的危害不言而喻，從根本上來說，是養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)的崩潰造成了弧菌的大爆發(fā)，并最終導(dǎo)致養(yǎng)殖動(dòng)物發(fā)病死亡。