一例黃顙魚(yú)腹水癥的診治

        一例黃顙魚(yú)腹水癥的診治

唐 鵬 王 均 賀 揚(yáng) 李 煜 唐 梟 蒲森婷 石桉寧

(內(nèi)江師范學(xué)院，“長(zhǎng)江上游魚(yú)類(lèi)資源保護(hù)與利用”四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 內(nèi)江 641100)

2019年6月，四川內(nèi)江一土池養(yǎng)殖的黃顙魚(yú)(已達(dá)上市規(guī)格)出現(xiàn)群體性死亡，死亡率20%～30%。瀕死魚(yú)出現(xiàn)離群、塘邊游動(dòng)、腹部膨大，部分魚(yú)眼球出血、尾部和下頜部充血、出血等癥狀。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌鑒定和人工感染實(shí)驗(yàn)，最后確定引起此次黃顙魚(yú)發(fā)病的主要病原為殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌。

一、養(yǎng)殖條件

養(yǎng)殖場(chǎng)位于四川內(nèi)江，養(yǎng)殖面積約180畝，其中30畝主養(yǎng)黃顙魚(yú)，套養(yǎng)花白鰱。2019年初放入大規(guī)格魚(yú)苗(購(gòu)于眉山)，發(fā)病時(shí)已經(jīng)達(dá)到上市規(guī)格，養(yǎng)殖量為1000～1500千克/畝。發(fā)病時(shí)水溫(23±2)℃，簡(jiǎn)易試劑盒測(cè)得養(yǎng)殖水體水質(zhì)指標(biāo)如下：溶氧3.0～4.0毫克/升，pH7.0～8.2，亞硝酸鹽0.45毫克/升，氨氮0.3毫克/升。

二、發(fā)病情況

2019年5月中旬開(kāi)始發(fā)病，患病魚(yú)食欲減退，離群在塘邊游動(dòng)，部分魚(yú)懸浮于水中，受驚嚇時(shí)反應(yīng)遲緩；大體癥狀表現(xiàn)為腹部膨大，部分魚(yú)眼球出血，鰓絲腫脹、出血，下頜和尾柄充血。發(fā)病初期每天死亡量50～100尾，高峰期達(dá)到300尾左右。發(fā)病后，使用聚維酮碘進(jìn)行消毒，先后拌飼投喂多西環(huán)素等常用抗菌藥物1周左右，效果不明顯，仍有魚(yú)死亡。

三、疾病診斷

1.解剖觀察

將瀕死黃顙魚(yú)解剖，發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有大量膠狀淡黃色或血紅色腹水，肝臟、腎臟和脾臟腫大、出血，并伴有少量出血點(diǎn)，腸道嚴(yán)重出血，胃部膨大，腸腔內(nèi)充滿氣體或透明液體。

2.病原檢測(cè)

寄生蟲(chóng)檢測(cè)結(jié)果顯示，在鰓部、腸道和體表未檢測(cè)到寄生蟲(chóng)。提取病魚(yú)的肝臟、腎臟和組織DNA進(jìn)行疑似病毒核酸檢測(cè)，斑點(diǎn)叉尾病毒(ChannelCatfishVirus，CCV)檢測(cè)結(jié)果為陰性。無(wú)菌條件下，采集病魚(yú)肝臟、腎臟和脾臟進(jìn)行細(xì)菌接種，在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)后分離到一株革蘭氏陰性短桿菌。將優(yōu)勢(shì)菌株使用天根公司細(xì)菌DNA提取試劑盒提取基因組DNA，采用通用引物進(jìn)行16S rRNA基因和gyrB基因PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物送生工生物工程(上海)股份有限公司測(cè)序，通過(guò)NCBI比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析，最后確定分離細(xì)菌為殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌。按照科赫法則，選用無(wú)病無(wú)傷健康黃顙魚(yú)暫養(yǎng)1周，然后人工感染殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌，復(fù)制出與自然發(fā)病魚(yú)相似的癥狀，最后確定引起此次疾病的病原為殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌。

3.病情分析

根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、水質(zhì)檢測(cè)和病原鑒定分析，推測(cè)引起此次黃顙魚(yú)發(fā)病的原因包括以下幾個(gè)方面：其一，養(yǎng)殖密度較高，底質(zhì)較差，而黃顙魚(yú)屬于底棲魚(yú)類(lèi)，耐低氧能力一般。據(jù)養(yǎng)殖戶(hù)介紹，2017－2019年，雖然每月均有換水，但從未使用過(guò)改底劑，池塘底部有大量殘餌、糞便，導(dǎo)致底質(zhì)惡化，黃顙魚(yú)處于長(zhǎng)期缺氧狀態(tài)。其二，黃顙魚(yú)冬季采食量偏少，體質(zhì)也有所下降，初春開(kāi)始逐漸增加投餌，由于胃腸道功能還沒(méi)有完全恢復(fù)正常，大量攝食必然加重胃腸道負(fù)荷，導(dǎo)致胃腸道受損，引發(fā)腸炎；而且，大量高蛋白質(zhì)食物在消化代謝過(guò)程中加重黃顙魚(yú)肝腎負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致肝腎受損，最終使得水鈉代謝失衡，出現(xiàn)腹水的癥狀。另外，因其所投餌料為浮性顆粒飼料，攝食魚(yú)搶食劇烈，投喂點(diǎn)較為集中，黃顙魚(yú)的堅(jiān)硬鰭條可能導(dǎo)致互相劃傷，而消毒又不及時(shí)，為疾病的暴發(fā)打開(kāi)門(mén)戶(hù)。其三，春末夏初，內(nèi)江溫度變化大，白天溫度有時(shí)可高達(dá)30℃，多為晴熱天氣，夜間有時(shí)出現(xiàn)雷陣雨，冷熱驟變對(duì)魚(yú)體產(chǎn)生應(yīng)激。加上長(zhǎng)期投餌，水中積蓄的有機(jī)物的量超過(guò)池塘承載量，氨氮和亞硝酸鹽的超標(biāo)導(dǎo)致魚(yú)體免疫力下降，引起疾病暴發(fā)。

四、疾病治療

對(duì)分離出的殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，通過(guò)紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，分離菌株對(duì)氟苯尼考、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、諾氟沙星以及氧氟沙星敏感，對(duì)多西環(huán)素、鏈霉素、克拉霉素、卡那霉素及多粘菌素B中介，對(duì)其他抗生素均耐藥。根據(jù)藥敏結(jié)果制定以下治療方案：按每千克魚(yú)體重計(jì)算，恩諾沙星30毫克/千克(10%有效含量)、三黃粉0.5克/千克、板藍(lán)根4克/千克、水產(chǎn)用多維5克/千克，拌餌投喂，連用5天；同時(shí)全池潑灑聚維酮碘消毒，保障充足溶氧。4天后黃顙魚(yú)死亡量減少，5天后未出現(xiàn)死亡，1周后黃顙魚(yú)腹水癥狀消失。

五、討論與總結(jié)

殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌是2013年從遲緩愛(ài)德華氏菌中分離出的新亞種，還未見(jiàn)引起黃顙魚(yú)發(fā)病的報(bào)道。據(jù)報(bào)道，魚(yú)類(lèi)感染遲緩愛(ài)德華氏菌后會(huì)引起敗血癥、爛身、內(nèi)臟組織的壞死、腸炎、腹水等病癥，最終導(dǎo)致養(yǎng)殖品種大規(guī)模死亡。此次黃顙魚(yú)疾病暴發(fā)癥狀與遲緩愛(ài)德華氏菌引起的病癥有相似之處，其危害性不亞于遲緩愛(ài)德華氏菌。養(yǎng)殖過(guò)程中存在著同病不同菌的現(xiàn)象，兩者在治療方案上不能同一而論，兩者雖都為愛(ài)德華氏菌屬，但其各自所具有的耐藥性卻可能不相同，養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)根據(jù)病原菌的特性選擇其敏感的藥物進(jìn)行治療。如多西環(huán)素在水產(chǎn)養(yǎng)殖中是常用抗生素，對(duì)大多數(shù)病原菌有殺滅作用，但此次分離的菌株對(duì)多西環(huán)素卻為中介，達(dá)不到治療目的，反而會(huì)造成耐藥性。

水產(chǎn)動(dòng)物發(fā)病往往是多因素造成的，此次黃顙魚(yú)感染殺魚(yú)愛(ài)德華氏菌暴發(fā)腹水癥，其中高蛋白質(zhì)飼料的大量投喂是主要誘因之一，水質(zhì)惡化、溫度不穩(wěn)定等加劇了疾病發(fā)生的可能，另外沒(méi)有定期殺滅水體里的有害病原，最終導(dǎo)致黃顙魚(yú)腹水癥的暴發(fā)。水產(chǎn)動(dòng)物疾病重在預(yù)防，要每半個(gè)月進(jìn)行1次消毒；平時(shí)養(yǎng)殖過(guò)程中，飼料應(yīng)添加免疫增強(qiáng)劑，提高魚(yú)體自身免疫力，從而降低病害發(fā)生率。本次黃顙魚(yú)疾病的治療方案中，采用恩諾沙星為主要治療藥物，輔以中藥制劑和維生素，避免了單一用藥的局限性。