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魚類麻醉劑種類及毒理學特性
1 魚類麻醉劑作用原理
魚類麻醉劑主要是為了在科研生產過程中減少對魚類的刺激,防止魚體進行劇烈的掙扎等行為對魚體造成損傷,以及在運輸過程中降低魚體新陳代謝,提高存活率[2].其中丁香酚的麻醉原理是先抑制腦的皮質( 觸覺喪失期) ,再通過作用于基底神經節(jié)與小腦( 興奮期) ,最后作用于脊髓( 麻醉期) ,過大劑量或過長的接觸可深及髓質,使呼吸與血管舒縮中樞麻痹,最終可導致死亡[3,4].
2 魚類麻醉劑種類及毒理學特性
2. 1 MS - 222
MS - 222,又名魚定安、漁夫寶,其主要成分是間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽,CAS 號 886 - 86- 2,分子式是 C10H15NO5S,分子量 261. 3,白色結晶粉末狀,易溶于水。有研究表明,MS -222 在24 h、96 h 對羅非魚的 LD50分別為 88. 84 mg·L- 1、76. 18 mg·L- 1[5]; MS -222 溶液呈酸性,魚體麻醉后血漿皮質醇含量在增加。MS -222 是經過美國食品藥物管理局( FDA) 認可,可以用于魚蝦類麻醉運輸[6].目前,美國、歐盟、加拿大等國家允許其作為魚用麻醉劑在水產動物中使用,其中美國規(guī)定休藥期為 21d,最大殘留量( MRL) 為1μg·mL- 1.FDA 要求經過 MS - 222 麻醉過的魚要在 21 d 后才能出售。
2. 2 丁香酚
丁香酚( Eugenol) ,其主要成分是 4 - 烯丙基- 2 - 甲氧基苯酚,無色或蒼黃色液體,有強烈丁香香氣,CAS 號 97 - 53 - 0,難溶于水,在醫(yī)學上被廣泛應用于牙科鎮(zhèn)痛和防腐。1972 年,日本遠藤發(fā)現(xiàn)丁香酚這種香料對魚有強烈的麻醉作用,開始將它作為麻醉劑進行了研究。日本、新西蘭、澳大利亞、智利、芬蘭等國家允許丁香油作為魚用麻醉劑,其中日本規(guī)定休藥期為 7 d,最高殘留量( MRL) 設定為 50 ng·mL- 1.澳大利亞、智力、韓國、新西蘭等國家批準異丁香酚作為魚用麻醉劑。
聯(lián)合國糧農組織( FAO) 、世界衛(wèi)生組織( WHO) 推薦丁香酚的每日容許攝入量( ADI) 為 2. 5 mg·kg- 1,另外,歐盟( CE) 推薦甲基丁香酚的 ADI 值為 5 mg·kg- 1,異丁香酚的 ADI 值為 5 mg·kg- 1.在急性毒性試驗中,丁香酚對大黃魚藥浴0. 5 h 的半數(shù)致死濃度( TLm) 為 10 mg·L- 1,對鯉魚藥浴 0. 5 h 的 TLm 為 112 mg · L- 1[7].Pirhonen[8]等通過 MS -222 和丁香酚對虹鱒飼料攝入量、血漿皮質醇水平的影響研究,發(fā)現(xiàn)丁香酚可替代 MS -222 安全使用。
2. 3 苯佐卡因
苯佐卡因,化學成分為對氨基苯甲酸乙酯,為白色粉末,難溶于水,若用于魚類浸浴麻醉,需用乙醇助溶。目前,世界上僅挪威批準該藥物作為魚用麻醉劑,并規(guī)定休藥期為 21d.苯佐卡因在24h、96 h 對 羅 非 魚 的 LD50分 別 為 44. 49mg·L- 1、22. 61 mg·L- 1.
2. 4 乙醚
乙醚( Ether) ,分子式是 C4H10O,是吸入性全身麻醉劑,屬于低毒物質,與空氣隔絕時相當穩(wěn)定但對人的神經系統(tǒng)有影響。乙醚的使用方法一般采取噴霧方式,溶液濃度為1.5% ~2.0%.由于乙醚比重小,揮發(fā)快,濃度下降使麻醉作用降低,需在運輸途中視魚的活動情況不斷酌量添加藥物。需要注意的是,有鰓病的魚,或者是水質不良,特別是在水 pH 失調的情況下,不能使用乙醚。
2. 5 CO2
目前,CO2是唯一被允許用來運輸食用魚的化學麻醉劑,沒有藥物消退期。經過 CO2麻醉運輸?shù)氖秤敏~可以直接在市場上進行銷售,對動物組織沒有毒害作用,但在魚體局部組織中積累過多,將出現(xiàn)麻醉過度,也有可能會導致魚窒息死亡[9],另外,它麻醉和復蘇時間相對較長,麻醉水溶液的濃度范圍較窄僅適用于部分魚類。
3、影響麻醉效果的因素
3. 1 魚體的品種、體重與年齡
不同品種的魚對不同麻醉劑的反應,甚至對同一種麻醉劑在不同濃度下的反應沒有顯著的規(guī)律。不同體重的魚的體表面積不同,新陳代謝率亦不同,一般體重越大,所需麻醉劑含量越高。另外,有研究認為,魚體在幼魚期主要靠皮膚呼吸,從而對麻醉劑有較強的敏感性,隨著魚類生長發(fā)育、魚齡增長,鰓呼吸逐漸占據(jù)主導地位,而麻醉劑大多通過鰓吸收,因此,隨著魚齡增加,所需麻醉劑積累和凈化的速率都會加快[10].
3. 2 溫度
隨著水溫升高,在相同濃度麻醉劑作用下,魚體達到各麻醉階段的時間均縮短,說明麻醉效果隨溫度的增加而增強,部分麻醉劑在水溫達到一定高度時,麻醉劑效果出現(xiàn)降低現(xiàn)象。在較高溫度下,魚麻醉運輸后的復蘇率和成活率也大大降低,甚至在 10℃以上時異戊巴比妥鈉會失效[3].
3. 3 pH 值與鹽度
因麻醉藥劑的種類不同而不同,一般淡水影響小,海水影響大。在較高鹽度下,魚體為調節(jié)自身滲透壓的平衡需要消耗較多的能量,耗氧量增加,從而攝入較多的麻醉劑,導致進入麻醉時間縮短,復蘇時間延長,死亡率增大[11,12].Ghazilou 等通過對里海三文魚的藥浴麻醉研究,發(fā)現(xiàn)鹽度、pH 值對丁香油的麻醉效果影響顯著[13].
3. 4 溶氧
溶氧會影響到魚類的呼吸,一般低溶氧時,作用較快,但恢復較慢。生活在高溶氧水域的魚種對麻醉劑感受性較高,所需濃度較低,魚體入麻時間延長,復蘇時間短,成活率較高。
4 魚用麻醉劑的檢測方法
目前,麻醉劑檢測方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、高效液相色譜 - 質譜聯(lián)用法、氣相色譜 - 質譜聯(lián)用法等。例如朱敏[14]等利用液相色譜 - 串聯(lián)質譜法測定水產品中麻醉劑 MS -222的殘留量,該方法檢出限為 1μg·kg- 1,定量限為2μg·kg- 1,加標回收率可以達到 80% ~ 110%.
Kiessling A[15]等利用反相高效相色譜法來檢測MS - 222 和丁香酚對魚體的生理效應。崔冶建等利用高效液相色譜法對魚腦中的 MS - 222 含量進行分析,有較好的回收率和重現(xiàn)性[16].
國內關于丁香酚的檢測方法也有報道,其中氣相色譜法是較為常見的檢測方法,如王璽和羅旭利用氣相色譜法對牙膏中微量丁香酚進行測定[17]; 王喆梔等用氣相色譜法測定了行軍散中丁香酚的含量[18]; 王海英用氣相色譜法測定了丁香油中丁香酚的含量[19].另外,關于丁香酚的其他檢測方法的報道,如李婷婷等利用高效相色譜法測定了大鼠血漿中的丁香酚,其中丁香酚的最低檢出限為 0. 0895 μg·mL[20]; 林偉豐等還研究了利用毛細管電泳高頻電導法測定幾種中藥中的丁香酚[21]; 周茂君等用氣相色譜 - 質譜法對保健品軟膠囊中的丁香酚進行分析[22].
5 存在問題及建議
5. 1 加大水產品中麻醉劑相關研究力度
目前對于麻醉劑在水產方面的研究主要側重于麻醉效果和對血液成分的影響的研究,對其麻醉機制、殘留代謝、安全范圍、休藥期、反復麻醉的危害以及對人體的安全評價等方面的研究較少。
隨著漁業(yè)快速發(fā)展,魚類麻醉劑在國內水產養(yǎng)殖業(yè)的應用將會越來越廣泛。麻醉劑在水產業(yè)的廣泛使用,迫切需要對麻醉劑的殘留代謝規(guī)律、反復麻醉危害、安全使用范圍及對人體的安全性評價等方面開展研究。
5. 2 盡快建立麻醉劑監(jiān)管規(guī)范
我國目前對魚類麻醉劑的使用缺少相應的標準,給我國水產品中麻醉劑的合理使用及殘留監(jiān)控帶來很大的不便。因此,應盡快出臺魚用麻醉劑相關規(guī)范和制度,建立相應檢測標準,制定管理規(guī)范,防止濫用的現(xiàn)象發(fā)生,并積極組織科研力量盡快開發(fā)高效、低價、低殘留或者無殘留的魚類麻醉劑,從而對我國漁業(yè)運輸、銷售以及消費者的健康起到重要的保障作用。
參 考 文 獻:
[1] 陳煥,黃和,高平,等。 高效液相色譜法測定水產品中丁香酚類麻醉劑的殘留量[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2014,( 12) : 156-160.
[2] 劉偉,陳再忠。 麻醉劑 MS - 222 對金魚體內 AKP、CAT 和 ACP 活性的影響[J]. 上海海洋大學學報,2010,19( 3) : 327-332.
[3] 李思發(fā)。 魚類麻醉劑[J]. 淡水漁業(yè),1988,(01) :22-23.
[4] 劉長琳,何力,等。 魚類麻醉研究綜述[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化,2007,( 05) :21-25.
[5] 湯保貴,陳剛,張健東,等。 兩種麻醉劑對羅非魚的急性毒性及聯(lián)合毒性研究[J]. 水產科技情報,2010,37,( 03) : 111-114.
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