袁圣：建立標(biāo)準(zhǔn)化魚體檢查流程---鰓絲鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)化

建立標(biāo)準(zhǔn)化的魚體檢查流程——鰓絲鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)化

• 江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院 袁圣
• 河海大學(xué) 趙哲
• 青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 章晉勇
• 江蘇省淡水水產(chǎn)研究所 薛暉
• 江蘇省漁業(yè)技術(shù)推廣中心 陳輝

水生動物病害已經(jīng)成為制約行業(yè)發(fā)展的重要瓶頸，通過標(biāo)準(zhǔn)化的魚體檢查，提前發(fā)現(xiàn)小問題，處理小問題，避免形成大的問題意義重大。飼料企業(yè)、動保企業(yè)未來的競爭核心也會偏重于服務(wù)的質(zhì)量，同樣需要建立標(biāo)準(zhǔn)化的服務(wù)流程。現(xiàn)就標(biāo)準(zhǔn)化服務(wù)流程的構(gòu)建作粗略的設(shè)想，以期拋磚引玉，更好的服務(wù)養(yǎng)殖一線。

鰓是魚類的主要呼吸器官，也是非常容易病變的組織，對鰓絲進行鏡檢是魚體檢查的重要工作之一，鰓絲的鏡檢應(yīng)做好兩個標(biāo)準(zhǔn)化，分別是鰓絲水浸片制作的標(biāo)準(zhǔn)化和顯微鏡使用的標(biāo)準(zhǔn)化。

鰓絲水浸片的制作步驟：（鰓絲水浸片制作的標(biāo)準(zhǔn)化）

a.準(zhǔn)備好干凈的載玻片、蓋玻片；

b.從3部位處（圖1）剪取適量鰓絲，放置于載玻片上;

c.用剪刀將鰓絲推到載玻片中間，用膠頭滴管滴一滴生理鹽水（或塘水）到鰓絲上;

d.將蓋玻片貼著載玻片邊緣輕輕往下放，直至接觸到鰓絲;

e.輕壓蓋玻片，使鰓絲均勻分布。

圖1：鰓絲水浸片選取位置圖，圖2：通過鏡檢可發(fā)現(xiàn)初期的爛鰓

鰓絲水浸片制作過程中的注意事項：

a.選取的鰓絲最好是靠近下頜部位的，此處寄生蟲相對較多；

b.鰓絲剪取時要適量，剪取過多會導(dǎo)致壓片不勻，鰓絲相互重疊影響觀察，鰓絲剪取過少可能導(dǎo)致樣品觀察不夠細(xì)致；

c.壓片時，應(yīng)輕輕的按壓蓋玻片，如果按壓過重會導(dǎo)致鰓組織被壓碎，大量的血細(xì)胞等流出，影響觀察結(jié)果，按壓過輕則會導(dǎo)致鰓絲壓不勻，相互重疊影響觀察結(jié)果。

d.壓片的速度不能太快，否則會有大量氣泡被壓進水浸片中，影響觀察。

圖3:剪取鰓絲過多導(dǎo)致壓片不勻，影響觀察，圖4：壓片用力過大導(dǎo)致組織破碎，影響觀察

圖5：壓片過快產(chǎn)生大量氣泡，影響觀察，圖6：正確壓片后鰓絲相互分離，便于觀察

顯微鏡的操作步驟：（顯微鏡使用的標(biāo)準(zhǔn)化）

a.將組裝好的顯微鏡插上電源，觀察是否通電;

b.將制作好的鰓絲水浸片置于載物臺上，用夾子固定好，并將物鏡中的低倍鏡調(diào)節(jié)至觀察部位;

c.調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺調(diào)節(jié)至離物鏡最近處;

d.調(diào)動粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺逐漸向下移動，直至看見物體;

e.調(diào)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直至觀察到清晰的圖像。

f.對觀察的物體進行記錄。

在顯微鏡的使用中，需要注意的是：

a.觀察時需要先用低倍鏡觀察，然后再用高倍鏡進行觀察（先用紅色的物鏡，再用黃色的物鏡）；

b.注意光圈等細(xì)節(jié)的調(diào)節(jié)，往往將光圈調(diào)節(jié)到最小，觀察的物體最清晰，進光量過多時視野較亮而無法觀察到清晰的圖像。

c.顯微鏡使用的插座最好有接地線，否則帶水操作存在觸電的風(fēng)險。

圖7：顯微鏡的外部構(gòu)造，圖8：通過光圈的調(diào)節(jié)可使觀察更清晰

圖9，10：同一視野下的顯微圖片-右圖為調(diào)小光圈后的圖像

重點觀察寄生蟲及鰓絲狀況。常見的寄生蟲可以通過鏡檢發(fā)現(xiàn)，如：指環(huán)蟲、三代蟲、車輪蟲、小瓜蟲、斜管蟲等等；鰓絲的狀況可作為評價鰓部是否病變的重要指標(biāo)，如發(fā)現(xiàn)鰓絲有血竇時需要及時消毒處理。

圖11,12：細(xì)菌感染引起的鰓絲潰爛-需對鰓絲進行鏡檢，以確定是否有寄生蟲感染

圖13,14：斜管蟲可導(dǎo)致鰓絲粘液異常分泌（魚苗扎堆）-斜管蟲顯微圖片

圖15：車輪蟲顯微圖片引起魚苗打轉(zhuǎn)，圖16：小瓜蟲顯微圖片-示馬蹄形的亮核（寄生部位形成白點）

圖17，18：鰓部的孢囊-示孢囊的完整顯微圖片（包囊需被壓破，才能看到里面的孢子蟲）

圖19：孢囊壓破以后孢子蟲的形態(tài)圖，圖20：鰓絲上的纖毛蟲

圖21,22：中華蚤寄生于鰓絲末端，引起魚焦躁不安，尾鰭上翹-示中華蚤顯微圖

圖23，24：鉤介幼蟲寄生于鰓絲可形成肉眼可見的白點-示鉤介幼蟲顯微圖片

25:三代蟲顯微圖片-頭部分為兩葉，沒有眼點，圖26：指環(huán)蟲顯微圖片-頭部4葉，有4個眼點（三代蟲、指環(huán)蟲都屬于單殖吸蟲，可引起鰓絲粘液異常分泌，呼吸不暢）

圖27：鰓絲上的血竇-提示為爛鰓初期，圖28：鰓絲血管內(nèi)的氣泡

圖29：爛鰓等可導(dǎo)致生理性缺氧的出現(xiàn)-即使池塘中溶氧充足，由于呼吸器官的壞死也可引起缺氧

另見：

袁圣：建立標(biāo)準(zhǔn)化魚體檢查流程---魚體體表檢查流程 _魚病知識http://dollarslicenewyork.com/tyui/aritcle9547.html

袁圣：建立標(biāo)準(zhǔn)化魚體檢查流程---鰓絲鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)化_魚病知識_http://dollarslicenewyork.com/tyui/aritcle9549.html

袁圣：建立標(biāo)準(zhǔn)化魚體檢查流程---內(nèi)臟及消化道檢查_魚病知識_http://dollarslicenewyork.com/tyui/aritcle9552.html

袁圣簡介

袁圣

江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院教師，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，國家大宗淡水魚產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系南京綜合試驗站及江蘇現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（鮰魚）產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系病害防控創(chuàng)新團隊成員，長期在養(yǎng)殖一線從事魚病防治工作，對常見魚類病害有較深的理解。